Бесприборные тест-системы для ветеринарии. Новые возможности и перспективы. Островский М. В. к. в. н. начальник отдела ветеринарии ЗАО «Биоград» .
Бесприборные тест-системы Immuno. Comb®
Страны, где уже используются эти тестсистемы Scandinavian Countries Netherlands Korea USA* UK France Spain Austria + Central Europe India Germany Ecuador Chile Italy Brazil* Japan* Philippine Israel Thailand Australia Biogal Galed Labs. - создана в 1986 году. Labs. Является лидером в области ветеринарных диагностических наборов. Серологические и прямые оценки заболеваний в ветеринарии. Клиенты > 30 стран мира. s
Миссия Biogal Galed Labs. : Улучшить здоровье животных, обеспечивая врачей превосходным и уникальным диагностическим инструментом
Что такое Immuno. Comb® ? • Тест Immuno. Comb® является модифицированным иммуноферментным анализом, который может быть описан как точечный анализ с использование вторичных антител, меченых ферментом. • Обеспечивает серологические результаты; определяет уровень антител в сыворотке или цельной крови для конкретного заболевания (например, вирусы, микоплазмы, риккетсии).
Immuno. Comb® ассортимент продукции С/Х животные Домашние животные n Собаки n Кошки n Птица КРС n МРС n С/Х птица Индейки n Куры n Грызуны n Крысы n Мыши Дополнительно: n Comb. Scan n Сделанные на заказ комплекты
Immuno. Comb® Основная Продукция для Домашних Животных • Vacci. Check для собак (ICH, CPV, CDV) • Эрлихиоз • Лептоспироз • Парвовирусная инфекция & Чума плотоядных (Ig. M & Ig. G) • Бруцеллёз • Хламидиоз (пситтакоз, орнитоз) птиц • Vacci. Check для кошек (FPLV, FHV, FCV) • Короновирусная инфекция (FIP) • Токсоплазмоз & Хламидиоз
Содержимое набора Immuno. Comb® Гребень* Проявочная ванна* Пинцет * Comb шкала* Капиллярные трубки & поршень Стандартный набор – 12 тестов (Также Индивидуально) Комплект для лаборатории – 120 тестов Примечание: * во всех наборах. Количество варьируется в зависимости от комплекта.
Процедура анализа на Immuno. Comb®
Анализ результатов Пример проявочного гребня на вирусный гепатит, парвовирусный энтерит и чуму плотоядных Цветная интенсивность пятен соответствует уровню антител. Точка контроля Гепатит Парвовирус Чума плотоядных
Оценка результатов: 3 способа прочитать результаты: (1) на глаз, (2) с помощью шкалы и гребня, (3) с помощью прибора Comb. Scan Чтение результатов на глаз Качественные результаты Чтение результатов с Полуколичественные помощью шкалы Comb результаты Чтение результатов с Количественные результаты помощью Comb сканера
Чтение результатов на глаз: Сравните цветовой тон тестового пятна с положительной точкой контроля. 4 варианта интерпретации: Отрицательный Слабоположительный(подозрительный) Положительный Высокоположительный
Чтение результатов Comb. Scale: 1. Найдите тон пурпурно-серый на шкале, который наиболее близко подходит к точке Положительного Контроля (верхняя точка). 2. Двигая желтую линейку найдите отметку С+, появившуюся в окошке над цветом, который вы только что нашли.
Чтение результатов Comb. Scale: 3. Держите линейку в таком положении на протяжении всего чтения результатов. Этот шаг фактически калибрует С+ и S 3, с которыми будут сравниваться точки теста. 4. Удерживая линейку, найдите тон на шкале, который будет наиболее подходить точке результата теста (нижние точки). Значение, которое появится в окошке сверху, является оценкой Comb. Scale (S 0 S 6).
Чтение результатов Comb. Scan: Comb. Scan Программа, которая использует компьютер и офисный сканер. Гребень помещается в сканер. Программа переводит цветовые результаты на численные значения. Предоставляется бесплатно и это очень удобно при чтении большого количества анализов (в лабораториях).
Преимущества Immuno. Comb® Biogal И вот, тогда Пискун и Джерри поняли, что у г-на Скемперса действительно было конкурентное преимущество.
Серологическое тестирование имеет важное значение в оценке иммунного статуса животного оценке иммунного статуса Для всех тестов Immuno. Comb : Immuno. Comb Диагностика клинических случаев заболеваний. Основное применение серологии - помощь в диагностировании клинических случаев заболеваний (Полуколичественный результат Например: Эрлихиоз и лептоспироз собак, инфекционный обеспечивает более полный и точный перитонит кошек (зоонозы). прогноз).
Серологическое тестирование является необходимым в оценке иммунного статуса собак/кошек Основные Преимущества Тестирования Титра : 1. Проверить Иммунный ответ, следующий за вакцинацией (котят/ щенков). 2. Определить, необходима ли вакцинация. 3. Определить, эффективна ли вакцинация. Применимо к: Vacci. Check для кошек/собак
Преимущества Immuno. Comb® Biogal Классический ИФА Иммунофлюоресцент ный Анализ 1. Простой 2. Портативный - идеален для полевых исследований. Требует аппарата для считывания результатов ИФА. Необходимо специальное оборудование в лаборатории. Нужно небольшое Необходимо количество образцов. большое количество образцов. Быстрый срок выполнения анализа. Необходимо небольшое количество образцов. Более длинный срок Долгий срок выполнения анализа. 1. Удобный, лёгкий в Выполняется освоении и специалистом в использовании. лаборатории. 2. Выполняется непосредственно ветврачом. 1. Выполняется опытным специалистом в лаборатории. 2. Субъективный.
Преимущества Immuno. Comb® Biogal: Сравнение с одношаговыми (One-Step ) тестами One-Step Biogal’s Immuno. Comb® One-Step Test Kits Обеспечивает количественный Обеспечивает только результат. качественный результат. Точный и надежный. Даёт ответ только да/нет. – Immuno. Comb ® определяет относительный уровень титра - диагностирует болезнь на гораздо более низком уровне титра, чем положительное пороговое значение. – Immuno. Comb ® может идентифицировать подозрительные случаи заболевания, за которыми в дальнейшем может быть изменение титра. – Более точный в определении, не только если, но также и до какой степени животное заражено. - Положительное пороговое значение для заболевания может давать «ложноотрицательный» результат, поскольку уровень антигена/антител может быть слишком низким, чтобы обнаружить заболевание на ранней стадии. • Поверяет несколько антигенов в одном тесте
Какую же выгоду обеспечивает каждая особенность Immuno. Comb® ? 1. Независимо от оснащённости в клинике лабораторией у вас сразу же появляется полная комплектация наборов (мини-лаборатория). 2. Для постановки анализа и его учёта не требуется приборное обеспечение. 3. Практичность (можно провести от 1 до 12 анализов, в зависимости от необходимости). 4. Быстрота получения результатов (от 20 до 60 минут). 5. Стабильность (срок хранения до 15 мес. ). 6. Простота в использовании, возможность визуального учёта результатов (не требуется специальная квалификация персонала). 7. Надёжность (наличие дополнительного, внутреннего контроля). 8. Безопасность (в комплекте нет инфицированного материала). 9. Экономичность (экономится время и финансовые затраты на исследования). 10. Возможность исследования не только сыворотки или плазмы, но и цельной крови. 11. Возможность хранения и документирования тестов. 12. Чувствительность и специфичность (до 100% - в зависимости от заболевания). 13. Полностью удовлетворяет самым строгим требованиям международных стандартов.
ЭКСПРЕСС-ТЕСТЫ ИХА • • Вирус кошачьего иммунодефицита (FIV) Лейкемия кошек (Fe. LV) Парвовироз собак (CPV) Чума плотоядных (CDV) Дирофилярио з (CDI) Лямблиоз (CFG) Лейшманиоз собак (CLI)
Что такое экспресс-тест Immuno. Run? • • • В основе теста лежит метод иммунохроматографического анализа (ИХА) в котором на коллоидное золото, распределенное в (ИХА) тест-полоске, ученые «пришили» особые вещества (моноклональные и поликлональные антитела или антигены), которые способны выявить тот или иной маркер - вестник болезни - по принципу «свой или чужой» . В основе иммунохроматографического анализа лежит классическая реакция "антиген-антитело" с образованием иммунных комплексов, реакция "антиген-антитело которые можно визуально обнаружить на тест-полоске. Принцип действия состоит в том, что при погружении тест-полоски в Принцип действия биологическую жидкость (или другой жидкий образец), она начинает мигрировать вдоль полоски по принципу тонкослойной хроматографии. Вместе с ней движутся нанесенные на нижнюю часть тест-полоски меченые специфические антитела, которые аффинно (прочно и родственно) связываются с анализируемым веществом.
Преимущества экспресс-тестов Immuno. Run (Biogal) Быстрый: - Одношаговая процедура с точным результатам в течение 10 минут. Надежный: - Высокая чувствительность, высокая специфичность, высокая точность. Легкий: - Простой в использовании и легкий в прочтении результатов. Универсальный: - Экономичный и недорогой тест-набор подходящий для обычной или большой клиники / лаборатории - удобный размер упаковки из 5 или 50 тестов.
Экспресс-тесты Immuno. Run набор для исследования на дорофеляриоз Внесение образца в лунку тест-кассеты Подготовка проб при CDV Подготовка проб при CPV
Чтение и интерпретация результатов Положительный тест Отрицательный тест Некорректный (повторить) тест
Immuno. Run. таблица данных на 01. 02. 2011 г. Название теста Чувствительность Специфичность Сравнительный тест CPV Ag 100% 98. 8% Реакция Гемагглютинации CHW Ag * 94. 4% 100% Аутопсия CDV Ag 100% 98. 5% ПЦР FIV Ab 96. 8% 99. 7% Вестерн-блоттинг Fe. LV Ag 94. 7% 99. 7% С изолированным вирусом Giardia Ag 100% Промышленные испытания Leishmania Ab 95. 6% 98% ИФА * CHW антиген чувствительности: 1 женская особь червя: 85%, 2 ж. особи червя: 100%, более 3 ж. особей червей: 100%
*Нет необходимости в холодильнике – легко хранить и отправлять. *Нет времени ожидания, чтобы тест согрелся перед использованием. * Длительный срок хранения до 24 месяцев.
Спасибо за внимание
Таблица перехода от S-значения в Титрах для Мелких домашних животных Avian Chlamyophila Canine Brucella Canine Distemper Ig. G Хламидиоз птиц Бруцеллёз собак Чума плотоядных РИФ РН S 1 < 1: 50 S 1 = 1: 50 S 1 < 1: 8 S 2 = 1: 50 S 2 = 1: 100 S 2 = 1: 16 S 3 = 1: 100 S 3 = 1: 200 S 3 = 1: 32 S 4 = 1: 200 S 4 = 1: 400 S 4 = 1: 64 S 5 = 1: 400 S 5 = 1: 800 S 5 = 1: 128 S 6 ≥ 1: 800 S 6 = >1: 1600 S 6 ≥ 1: 256
Таблица перехода от S-значения в Титрах для Мелких домашних животных Canine Distemper Ig. M Canine Ehrlichiosis Canine Hepatitis (CAV) Чума плотоядных Эрлихиоз собак Вирусный гепатит РИФ РН S 1 < 1: 10 S 1 < 1: 40 S 1 = 1: 4 S 2 = 1: 50 S 2 = 1: 40 S 2 = 1: 8 S 3 = 1: 250 S 3 = 1: 80 S 3 = 1: 16 S 4 = 1: 1250 S 4 = 1: 160 S 4 = 1: 32 S 5 = 1: 6250 S 5 = 1: 320 S 5 = 1: 64 S 6 > 1: 6250 S 6 = 1: 640 S 6 = 1: 128
Таблица перехода от S-значения в Титрах для Мелких домашних животных Canine Leptospirosis Canine Parvovirus Ig. G . Canine Parvovirus Ig. M Лептоспироз собак Парвовирусная инфекция РМА РТГА РИФ S 1 < 1: 100 S 1 < 1: 40 S 1 = 1: 10 S 2 = 1: 200 S 2 = 1: 40 S 2 = 1: 50 S 3 = 1: 400 S 3 = 1: 80 S 3 = 1: 250 S 4 = 1: 800 S 4 = 1: 160 S 4 = 1: 1250 S 5 = 1: 1600 S 5 = 1: 320 S 5 = 1: 6250 S 6 = 1: 3200 S 6 ≥ 1: 640 S 6 > 1: 6250
Таблица перехода от S-значения в Титрах для Мелких домашних животных Feline Toxoplasma FCo. V (FIP) Хламидиоз кошек Токсоплазмоз кошек Коронавирусная инфекция РСК РИФ S 1 < 1: 16 S 1 = <1: 10 S 2 = 1: 16 S 2 = 1: 10 S 3 = 1: 32 S 3 = 1: 20 S 4 = 1: 64 S 4 = 1: 20 -80 S 5 = 1: 128 S 5 = 1: 160 -320 S 6 ≥ 1: 256 S 6 > 1: 320 Feline Chlamydia
Таблица перехода от S-значения в Титрах для Мелких домашних животных Feline Calicci Virus Feline Herpes Virus Feline Panleokopenia Калицивироз кошек Герпес-вирус Панлейкопения кошек РН РН РТГА S 1 = 1: 8 S 1 = 1: 4 S 1 = 1: 20 S 2 = 1: 16 S 2 = 1: 8 S 2 = 1: 40 S 3 = 1: 32 S 3 = 1: 16 S 3 = 1: 80 S 4 = 1: 64 S 4 = 1: 32 S 4 = 1: 160 S 5 = 1: 128 S 5 = 1: 64 S 5 = 1: 320 S 6 = 1: 256 S 6 = 1: 128 S 6 = 1: 640 Иммунофлуоресцентный анализ (РИФ) Реакция нейтрализации вируса (РН) Реакция связывания комплемента (РСК) Реакция торможения гемагглютинации (hemagglutination inhibition) (РТГА) Реакция микроагглютинации (РМА)
ОТЛИЧИЕ ИФА ОТ ИХА • • • ИХА -тесты выполнены в виде тест-полоски или тест-кассеты. Подвижной фазой в данном случае является физиологическая жидкость. Для проведения анализа вносится 1 -2 капли сыворотки или плазмы в область образца тестовой полосы, далее добавляется 1 капля буфера и через 5 -10 минут получается результат в виде окрашенных линий. 1. Не допускается считывание результата после 20 минут, так как окраска линий не стабильна. Из-за этого нет возможности хранения результатов тестов для отчётности и документирования. 2. Чувствительность и специфичность ИХА-тестов не достигает показателей иммуноферментного анализа!!! Надежность и чувствительность зависит, во-первых, от качества используемых в тесте реагентов и, во-вторых, от концентрации антигена в биоматериале. Качество используемых реагентов зависит от способов их получения, очистки и фиксации на полоске. Концентрация антигена – от стадии заболевания и количества биоматериала. 3. Достаточно много фирм Китая производят тестовые полосы или сами тесты (которые в дальнейшем закупают другие страны, производящие ИХА-тесты), несмотря на указанную в инструкции 100% чувствительность и специфичность, в реальности качество данных тестов низкое, разные серии часто не одинаковы, результаты не воспроизводятся, так же много ложноположительных результатов. 4. ИХА-тесты обеспечивают только качественный результат (да-нет). 5. Экспресс-тесты (антигенные) работают только в течение ~ 3 -7 дней после заражения (полезны только при первоначальном воздействии). 6. Положительное пороговое значение для заболевания при использовании одношаговых тестов (ИХА) может давать «ложноотрицательный» результат» , поскольку уровень антигена/антител может быть слишком низким, чтобы обнаружить заболевание на ранней стадии.
Скачать презентацию Бесприборные тест-системы для ветеринарии Новые возможности и перспективы
494c3ca97c89103d9b7860c30eca738e.ppt