Балтийский форум Секция Птицеводство Санкт-Петербург 18 сентября 2014

Балтийский форум. Секция «Птицеводство» Санкт-Петербург, 18 сентября 2014 г. «Диагностический мониторинг – важное звено в системе биобезопасности птицехозяйств» Хохлачев Олег Фёдорович – к. в. н. , зав. Центром диагностики ГНУ ВНИВИП Россельхозакадемии

Общий прогноз эпидемической (эпизоотической) ситуации в мире по мнению МЭБ В ближайшем будущем инфекционные болезни птиц будут распространяться быстрее и на большие расстояния (грипп птиц – 70 км/ч) Факторы влияния: 1. Беспрецедентный рост в мире количества домашних животных и птиц в целях удовлетворения потребности человека в продовольствии. 2. Вовлечение в мировые процессы развивающихся стран, в т. ч субтропических, в которых многие болезни совершенно не изучены. 3. Возрастающий рост торговли животноводческой продукцией, животными, птицей, в т. ч. декоративной. 4. Официальный и теневой импорт-экспорт птицы.

Причины ухудшения эпизоотической обстановки в последние годы Активное расширение контактов с другими государствами – торговыми партнерами Высокая чувствительность современных кроссов кур к возбудителям болезней Генетическая трансформация возбудителей в сторону повышения патогенности Несоблюдение (нарушение) ветеринарно-санитарных правил содержания птицы (кур разных кроссов, птиц разных видов, птица на подворье) Несоблюдение правил организации профилактических мероприятий (сроки и методы вакцинации , дозировка вакцин, интервалы между вакцинациями) Проявление болезней в ассоциированных формах, наличие антигенных различий между «полевыми» и «вакцинными» возбудителями (ИБК, МПВИ, Рео) Быстрая адаптация возбудителей к действию биопрепаратов (E. coli, Salm. spp, кокцидии…) Увеличение срока эксплуатации несушек до 92 недель и более (к 2020 г. 100110 нед. , 480 -520 яиц)

Историческая справка Науке известно 1682 болезни, из которых: • Вызываются вирусами, бактериями и другими возбудителями 742 (44%) • Связаны с нарушением обмена веществ 940 (56%) Гамалея Николай Федорович 1859 – 1949 гг.

Скрытые «угрозы» 250 000

Термины: • Мониторинг – систематизированное и длительное наблюдение… + анализ получаемых данных

Биобезопасность в птицеводстве – защита птицепоголовья от патогенных факторов любой этиологии

Основные факторы биологической опасности Вирусы Бактерии Экзо-, эндопаразиты Стрессы Микоплазмы Микозы + Микотоксикозы Грызуны Хламидии Антибиотики Дикая, синантропная птица «Биологическая усталость» помещений Иммунодефициты Генетическое старение кросса

«Биологическая усталость» помещений «Биологическая + химическая усталость» птичников – контаминация возбудителями, окисями тяжелых металлов, радионуклидами поверхностей и внутренних слоёв стен, потолка, оборудования, инвентаря. Инфицирование + блокада рецепторов птиц. При клеточном содержании 60 -дневного реммолодняка с вертикальных поверхностей птичника выделяют до 85 тыс. микробов, с горизонтальных - до 1, 4 млн. возбудителей

Основные цели и задачи диагностических исследований 1. Плановый диагностический мониторинг: 1. 1. контроль качества иммунитета 1. 2. контроль эпизоотической ситуации 2. 1. 2. 3. 4. Работа в плановом режиме и чрезвычайных случаях Оценка эпизоотической ситуации На птицефабрике. Определение уровней биозащиты В ППЗ, ППР, в т. ч. зарубежных (поставщик племпродукции-угроза) В фермерских птицехозяйствах, в т. ч. отдаленных В частном секторе, на подворье, (смешанное птицепоголовье-угроза) Разработка, корректировка , контроль эффективности лечебно-профилактических программ 1. Выявление факторов инфекционной этиологии, отрицательно влияющих на основные производственные показатели (сохранность и продуктивность поголовья, рентабельность хозяйства). Дифференциация от незаразных факторов. 2. Выделение возбудителей и изучение их иммунобиологических свойств (антигенных характеристик, вирулентности).

Комплексная диагностика инфекционных болезней птиц Эпизоотологические данные Клинические признаки Патологоанатомические изменения Экономические показатели Лабораторные исследования Вирусологические Токсикологические Микробиологические Патоморфологические Выявление антител Сыворотка крови Биопроба Метод синтинелл Серологические Молекулярнобиологические Желточные фолликулы Кистозная жидкость Желток яиц

Программа серомониторинга инфекционных болезней птиц Возраст птиц (дн. ) Наименование контролируемых инфекционных болезней ИБК ИББ НБ ИЭП APV 1– 3 + + 30 – 40 + + + 80 – 90 + + + 140 – 150 + + 210 – 230 + + + 300 + + + 400 + + 450 - 500 + + Рео МГ МС ВАЦ ОРТ + + + + + + + + + + ССЯ-76 + ИЛТ + + + Примечание: Изменения и дополнения в данную схему могут быть внесены ветврачем хозяйства с целью контроля напряженности поствакцинального иммунитета и/или оценки эпизоотической ситуации по новым малоизученным болезням птиц.

Серологические исследования Сыворотка крови 1 Яичный желток Желточные фолликулы Экстракты желтков и/или желточных фолликулов Экстракты

Желточные антитела «…Гуморальные (сывороточные) антитела концентрируются в желтке и их количество не зависит от величины желточных фолликулов. Переход желточных антител из желтка в эмбрион начинается на 14 - 15 сутки инкубации и продолжается до полного рассасывания желтка (3 – 4 день жизни цыплёнка…)» Болотников И. А. , 1982 г.

Желточные антитела «…В течение 10 дней с момента снесения яиц титр антител в желтке более однородный, чем в крови птиц…» Coleman M, 1982 г.

Наличие антигемагглютининов к вирусу НБ и ССЯ-76 в сыворотке крови и экстрактах желтка куриных яиц № п/п Материал Колич. проб Титр антител (log 2) 1 2 3 4 6 7 8 9 2 5 % 10 иммунных 3 2 1 1 5 4 4 НБ Сыворотка крови Экстракт 2 желтка 1 15 1 2 15 3 1 1 80 100 ССЯ-76 Сыворотка крови Экстракт 4 желтка 3 15 1 1 2 15 Примечание: возраст кур 240 дней 1 6 2 2 2 4 1 4 3 1 67 87

Сомнительные результаты серологического РТГА - исследования на НБ Разведения сыворотки № п/п Возраст, дн. Кол-во, шт 16 32 64 128 1 80 10 3 3 3 1 2 90 10 3 3 90 10 3 4 230 10 5 230 10 6 290 10 7 380 9 8 400 10 9 435 10 10 450 10 1 11 470 10 1 12 490 10 1 ? 256 512 2048 4096 3 1 1024 1 3 4 2 2 2 4 4 3 1 5 1 1 8 8 2 7 3 6 1 1 2 7 3 2 6 1 6 ?

ИФА – диагностика МПВИ- инфекции с использованием различных тестсистем ИФА (ELISA) СИНКО - А ИФА (ELISA) Bio. Chek - А и В ИФА (ELISA) IDEXX - А, В, С ВЫВОД: Тест-системы IDEXX - «золотой» эталон»

МПВИ

Метапневмовирусная инфекция Болезнь полиэтиологична. Признаки: «сонная» птица, синусит, аэросаккулит, (овариосальпингоперитонит), энтерит Название объединяет два респираторных синдрома: воспаление носа и трахеи у индеек (TRT) и синдром опухшей головы у кур (SHS)

МПВИ (APV, TRT) 50 недель 84% 51 80, 4% 52 67, 4% 53 63, 5% 55 69, 4% 57 77, 5% 59 84, 2%

МПВИ, ИФА-серомониторинг 1

МПВИ ИФА-серомониторинг 2 3

МПВИ 100 дн s 58 нед. e

ОРТ 100 дн s 58 нед. e

Ассоциированное течение МПВИ + ИБК При ассоциированном течении болезни вирус ИБК сдерживает репликацию пневмовируса и формирование антител к МПВИ, т. е. лидирует в процессе интерференции, что приводит к атипичному (субклиническому) течению МПВИ. Это важно учитывать при диагностике пневмовирусной инфекции и организации профилактических мероприятий.

«Полевая» ИБК - инфекция • кросс: HY-LINE • схема вакцинации: «Н-120» , 1+28+90 • возраст: 6, 5 – 7 мес. • MT: 6 -9 мес. : 6500 -13200 -18300 -25900 • яйценоскость: 90% => 73% отдельные пробы: 35000 -42000

РЕЗУЛЬТАТЫ ИФА исследования желтка куриных яиц на наличие антител к вирусу ИБК Качество яиц Колич-во, (шт. ) Титра антител в интервале значений Min Max Средний титр антител Пороговые значения НП ПЛ ВП 1 Нормальное 20 2871 9636 6220 - 2 Вытянутое 20 3295 8189 6913 - 20 - 3. Шарообразное 20 2395 6627 5102 - 20 - 4 С поясками 20 3168 18126 12550 - 18 2 5 В крапинку 20 2234 9984 4723 - 20 - 6. Шероховатое 20 3718 11409 7236 - 17 3 7. "Солнышко" 20 14429 31374 2666 З - - 20 8. Обесцвеченное 20 6921 17511 10804 - 16 4 9. "Зефирное" 20 13032 30049 21252 - - 20 10. Бесскорлупное 20 5981 19607 12494 - 12 8

Кадры решают всё… С каким кроссом кур работать (куры + бройлеры + перепела…. ) Как контролировать качество вакцинации Чем и как вакцинировать Кадр ы Чем кормить Какое оборудование выбрать Ветврач Зоотехни к

Диагноз: Дерматит Этиологические факторы: • Дефицит микроэлементов (Zn, Se) • Дефицит аминокислот (триптофан) • Авитаминозы: пантотеновой кислоты (В 3), частично никотиновой кислоты (В 5), биотину (Н) • Хронические микотоксикозы • Низкая влажность воздуха в птичнике, нарушение вентиляции и воздухообмена ( «мёртвые» зоны) • Стрессы → травмы Вопрос: Что делать? Ответ: 1. Обеспечить нормативные условия содержания и кормления птиц + Миафит ; Пантотенат Zn. 2. Контроль качества вентиляции в птичнике, например, с помощью дымовых шашек.

«Полевая» ИББ-инфекция П/ф *****, суточные цыплята 10 -11 -2008 Инфекционная бурсальная болезнь Разведение: 1/401 Ср. арифм. : 5685, 32 Ср. геом. : 4072, 5 КВ%: 14, 2 ---------------Лунка OD EU Титр Группа ---------------DB A 01 0, 123 DB B 05 0, 120 - B 01 0, 117 - C 05 0, 127 + C 01 1, 192 + D 05 1, 134 ST D 01 1, 784 ST E 05 1, 648 1 E 01 0, 270 9, 31 900 НП 2 F 01 1, 033 57, 17 9615 ПЛ 3 G 01 0, 996 54, 84 9109 ПЛ 4 H 01 0, 804 42, 80 6591 ПЛ 5 A 02 1, 147 64, 31 11214 ПЛ 6 B 02 0, 590 29, 38 4033 ПЛ 7 C 02 0, 280 9, 94 980 НП 8 D 02 0, 507 24, 18 3127 ПЛ 9 E 02 0, 370 15, 58 1763 ПЛ 10 F 02 1, 383 79, 12 14696 ВП 11 G 02 0, 389 16, 78 1941 ПЛ 12 H 02 0, 746 39, 17 5869 ПЛ 13 A 03 0, 380 16, 21 1856 ПЛ 14 B 03 1, 155 64, 82 11329 ПЛ 15 C 03 0, 472 21, 98 2761 ПЛ 16 D 03 1, 481 85, 26 16203 ВП 17 E 03 1, 224 69, 14 12326 ПЛ 18 F 03 0, 670 34, 40 4955 ПЛ 19 G 03 0, 827 44, 25 6882 ПЛ 20 H 03 0, 813 43, 37 6704 ПЛ 21 A 04 0, 228 6, 68 583 НП 22 B 04 0, 949 51, 90 8475 ПЛ 23 C 04 0, 767 40, 48 6128 ПЛ 24 D 04 0, 433 19, 54 2367 ПЛ 25 E 04 0, 534 25, 87 3416 ПЛ 26 F 04 0, 611 30, 70 4271 ПЛ 27 G 04 0, 393 17, 03 1979 ПЛ 28 H 04 0, 299 11, 13 1136 НП 29 A 05 0, 557 27, 31 3666 ПЛ НП + ПЛ = 35%, МТ: 1626 (10, 6 log 2) 10 ПЛ = 38%, МТ: 6182 (12, 5 log 2 18 ПЛ + ВП = 27%, МТ = 11620 (13, 4 log 2) 22 «WF 2512» 15 и 24 дня Трупы цыплят до вскрытия (возраст – 40 дней)

ИББ Множественные кровоизлияния в мышцах Менее выраженные кровоизлияния в мышцах

ИББ Динамика гибели цыплят (начальное поголовье 43500 голов) Возраст (дн) Падёж (гол. ) 41 11 42 69 43 338 44 643 45 1519 46 1450 47 101 48 120 49 42 50 13 Всего: 4304 (9, 9%) Вопрос: Ответ: Как быть дальше? «Авикрон-ИББ» + «WF 2512» ; «БГ» 10+15+20 …

«ПОЛЕВАЯ» ИББ - ИНФЕКЦИЯ СЛАБОВЫРАЖЕННЫЕ ВНУТРИМЫШЕЧНЫЕ КРОВОИЗЛИЯНИЯ

«ПОЛЕВАЯ» ИББ - ИНФЕКЦИЯ

«ПОЛЕВАЯ» ИББ - ИНФЕКЦИЯ «ГЕМОРРАГИЧЕСКИЙ ПОЯСОК»

Результаты РТГА - исследования сыворотки крови на НБ Группа цыплят Количество проб «Здоровые» 16 1: 2 1: 4 3 1: 64 1: 128 Средний титр антител Качество иммунитета (%) 1: 8 1: 16 1: 32 2 16 «Больные» Титр антигемагглютинирующих антител в разведении 3 5 4 2 1: 46 88 2 6 1 3 1 1: 30 69 Заключение: 1. Цыплята содержат антитела к вирусу НБ в положительных диагностических титрах в интервале «вакцинных» значений. 2. У клинически «больных» цыплят качество гуморального иммунитета ниже 3. Клинические и патологоанатомические признаки «патологии» у цыплят не являются следствием ньюкаслской болезни.

Ошибка из лабораторной практики (ИББ) !?

Серодиагностика РЕЗУЛЬТАТЫ ИФА-исследования сыворотки крови кур на наличие антител к Mycoplasma synoviae (MS) и реовирусу (РЕО) (Тест-системы – Bio. Chek) ТИТР АНТИТЕЛ В ИНТЕРВАЛЕ ВП Средний титр антител Кол-во «+» проб (%) № п. п Группа птиц Болезнь Кол-во проб сыворотки (шт. ) 1 Норма MS 15 318 8293 1 7 7 0 4423 47 2 Синовит MS 15 5836 26840 - - 3 12 21747 100 3 Норма РЕО 15 137 1985 12 2 1 - 338 7 4 Синовит РЕО 15 66 3238 11 1 1 - 567 7 MIN MAX ОТР НП ПЛ Примечание: 1 Предварительный диагноз – реовирусный теносиновит 2. Заключительный диагноз - Инфекционный синовит (МС)

Диагностика Сероконверсия при микоплазма-синовиа-инфекции 21747 25000 20000 11786 15000 2338 10000 45 5000 0 пт. № 4 (45 дн. ) Здоровые пт. № 1 (75 дн) Больные

Причинно-следственная связь Птицефабрика яичного направления Откорм бройлеров

Серодиагностика МС у бройлеров (40 дн. )

Дифференциальный диагноз: Рео ОРТ 10000 9000 8000 7000 6000 5000 4000 3000 2000 677 703 444 509 1000 2000 842 1118 170 398 1000 0 0 пт. № 4 (45 дн. ) Здоровые пт. № 1 (75 дн) Больные

Меры по предупреждению заразных болезней птиц в хозяйстве v Разработка научно обоснованной программы биозащиты с учетом особенностей каждого птицехозяйства. v Комплектование племенным материалом из устойчиво благополучного по инфекционным болезням племенного птицехозяйства v Строгое соблюдение технологии содержания и кормления птицы в соответствии с зооветеринарными требованиями и рекомендациями с учетом особенностей каждого кросса. v Диагностический мониторинг. Специфическая профилактика инфекционных болезней птиц с приоритетом на применение инактивированных вакцинам в любом возрасте.

ВНИВИП: конкретная помощь v Проводим эпизоотологическое обследование птицехозяйств разных форм собственности СЗФО, РФ и СНГ. Оказываем хозяйствам научно-практическую помощь на основе разовых и долгосрочных Договоров под ответственное исполнение. v Организовываем и проводим мониторинг эпизоотической ситуации, разрабатываем и внедряем программы биозащиты, осуществляем сервисное ветеринарное сопровождение птицы и контроль эффективности предложенных программ. v Обеспечиваем организацию и проведение курсов повышения квалификации ветспециалистов птицехозяйств. v Осуществляем разработку и серийное производство диагностикумов и вакцин для промышленного птицеводства, в т. ч. аутоиммунных вакцин.

ВНИВИП: методическая поддержка

«Авикрон СВ» - стабилизатор+индикатор

Над чем работаем -Анализ эпизоотической ситуации; (ИБК, НБ, МПВИ, РЕО) - Разработка новых методов диагностики (РГА…); -Дифференциальная диагностика «синдромов» (Гепатит, гепатоз, АВГГ, СБПС, БМ, целлюлит);

Научно-практический интерес 21430 исследований из 19 регионов РФ и СНГ (2013 год)

Процедура проведения диагностики 1. Исходный материал (кровь, слюна) разводится в буферном растворе. 2. Раствор смешивается с гидрозолем и выдерживается 3 минуты. 3. Полученный препарат вносится на фильтровальную бумагу (колонку), через 10 секунд визуально определяется результат: Результат отрицательный (агглютинации нет) Результат положительный (происходит процесс агглютинации)

Гепатоз. Геморрагический экссудат в брюшной полости

Гепатоз. Абдоминальный жир

Жировая (токсическая) дистрофия печени

Решение: • Определить и устранить неблагоприятные факторы, в т. ч. токсические метаболиты, дисбаланс в кормах по аминокислотам, энергии, витаминам (рыбная мука…) • Ввести в рацион гепатопротективный комплекс, содержащий витамины группы В (В 1, В 2, холин - В 4, В 6, биотин – В 7, В 12, В 15), Е, селен (например, Аминовитал или ФЛС-микс*) * FLS – Fatty Liver Syndrom

Гипертрофия селезенки. Атрофия яичника

Гипертрофия селезенки

Синдром большой печени и селезенки (СБПС) Возбудитель – вирус гепатита Е птиц

E. coli, штамм «Р-13» • Устойчивость к: ампициллину, бензилпенициллину, гентамицину, левомицетину, линкомицину, олеандомицину, стрептомицину, тетрацинклину, окситетрациклину, эритромицину, энрофлоксацину, амоксициллину, котримоксазолу, флумеквину, каримоксу, канамицину, амфотерицину, линкоспектину, тиамулину (В), тилозину • Слабая чувствительность (менее 10 мм) к: неомицину, полимиксину, фурадонину, ципрофлаксацину колистину, флорону, каридоксу, карифлоксу, офлоксацину, доксициллин (В), • Чувствительность (23 мм) к : меропенему- (медицинский антибиотик из группы карбапенемов. Производится в Англии, Японии, Индии). ПРОФИЛАКТИКА: АУТОИММУННАЯ ВАКЦИНА!

Есть проблемы? Мы готовы подключиться! (812)372 -54 -94 vnivip. lab@gmail. com

ПРИГЛАШАЕМ ДРУЗЕЙ НА ЮБИЛЕЙ!

Спасибо за внимание