Скачать презентацию Amplification du gène de l Interleukine-6 et pronostic dans Скачать презентацию Amplification du gène de l Interleukine-6 et pronostic dans

203625f9c7b9968ad6ec73a4361f50e3.ppt

  • Количество слайдов: 18

Amplification du gène de l’Interleukine-6 et pronostic dans les glioblastomes A. Tchirkov 1, T. Amplification du gène de l’Interleukine-6 et pronostic dans les glioblastomes A. Tchirkov 1, T. Khalil 1, E. Chautard 1, K. Mokhtari 2, L. Veronese 1, B. Irthum 1, P. Vago 1, J. L. Kemeny 1, P. Verrelle 1 EA 3846, Université d'Auvergne, Centre Jean Perrin / CHU, Clermont-Ferrand 2 Neuropathologie, Pitié-Salpétrière, Paris 1 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Glioblastome (GBM) Radiosensibilisat ion des tumeurs gliales : approche cellulaire et moléculaire. Médiane de Glioblastome (GBM) Radiosensibilisat ion des tumeurs gliales : approche cellulaire et moléculaire. Médiane de survie : inférieure à 1 an Récidive à l’intérieur du volume irradié Optimisation de la radiothérapie Identification puis neutralisation de nouvelles cibles biologiques potentiellement impliquées dans la radiorésistance : la voie de l'Interleukine-6, le couple Irradiation (photons, neutrons) à faibles dose et débit de dose ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Pourquoi l'Interleukine-6 ? Elle est secrétée par les cellules de glioblastome (Van Meir et Pourquoi l'Interleukine-6 ? Elle est secrétée par les cellules de glioblastome (Van Meir et al. , 1990). ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

L’IL-6 : rôle dans la progression tumorale Perte de la fonction de présentation de L’IL-6 : rôle dans la progression tumorale Perte de la fonction de présentation de l’antigène par les cellules dendritiques Immunosuppression locale (Menetrier-Caux et al. , 1998) Rein (Mizutami et al. , 1995) Prostate (Borsellino et al. , 1999) Myélome (Puthier et al. , 1999) Pancréas (Yoshiharu et al. , 2001) Col utérin (Wei et al. , 2001) VEGF Angiogénèse Blocage de l’apoptose (Cohen et al. , 1996) STAT 3 AKT Mcl-1 Prolifération cellulaire MAPK GBM (Goswami et al. , 1998) Mélanome (Lu et al. , 1996) Séquences codant pour la protéine mature 5 kb 7 p 15 28 aa 184 aa 27 k. Da ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

La voie de signalisation IL-6 p Ras /MAPK prolifération cellulaire(MM) gp 130 gp 80 La voie de signalisation IL-6 p Ras /MAPK prolifération cellulaire(MM) gp 130 gp 80 gp 130 IL-6 p JAK/STAT p. STAT 3 Mcl 1 -L et Bcl. XL VEGF PI-3 K p. AKT Inhibition de l ’apoptose ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Expression de l ’IL-6 et grade de malignité dans les tumeurs gliales Ech 1 Expression de l ’IL-6 et grade de malignité dans les tumeurs gliales Ech 1 2 3 4 5 6 7 8 9 n=51 b 2 -micro IL-6 glioblastomes P<0, 001 Ech 1 2 3 4 5 6 7 8 120 pb 9 b 2 -micro n=28 165 pb IL-6 165 pb 120 pb Autres gliomes Journal of Neurosurgery, 2001 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Expression de l ’IL-6 et grade de malignité dans les tumeurs gliales GBM négatif Expression de l ’IL-6 et grade de malignité dans les tumeurs gliales GBM négatif b 2 -micro IL-6 HES RT-PCR IHC anticorps anti-IL 6 b 2 -micro IL-6 GBM positif ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

ANOCEF, Toulouse, Mai 2007 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

L’IL-6 est-elle impliquée dans la radiorésistance des GBM ? ANOCEF, Toulouse, Mai 2007 L’IL-6 est-elle impliquée dans la radiorésistance des GBM ? ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

ANOCEF, Toulouse, Mai 2007 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

• L'irradiation freine la prolifération de la lignée G 5 mais n'a pas • L'irradiation freine la prolifération de la lignée G 5 mais n'a pas d'effet sur la fraction IL-6 positive. • Ces résultats suggèrent un rôle potentiel de la fraction cellulaire IL-6 positive au sein de la lignée G 5 dans la radiorésistance. Journal of Neuro-Oncology, 2002 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

La surexpression de l’IL-6 dans les GBM est-elle associée à une amplification du gène La surexpression de l’IL-6 dans les GBM est-elle associée à une amplification du gène ? ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Dosage du gène de l’IL-6 : PCR en temps réel (SYBRGreen I) 8 IL-6 Dosage du gène de l’IL-6 : PCR en temps réel (SYBRGreen I) 8 IL-6 7 Fluorescence 6 ADN GBM 5 63 207 5 ADN normal 12 184 4 Ratio 3 2 5, 10 b-globin 1 ADN GBM 5/b-globin 0 17 19 21 23 25 27 PCR cycle 12 933 ADN normal/b-globin 12 367 Ratio 1, 05 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Amplification du gène de l’IL-6 dans les glioblastomes British Journal of Cancer, 2001 ANOCEF, Amplification du gène de l’IL-6 dans les glioblastomes British Journal of Cancer, 2001 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Amplification du gène de l’IL-6 recherche par FISH sur coupes congelées dans 53 gliomes Amplification du gène de l’IL-6 recherche par FISH sur coupes congelées dans 53 gliomes • Recherche négative dans les gliomes de grade II (9) et III (8) • Amplification retrouvée dans 40% des GBM, corrélée à l'expression ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Amplification du gène de l’IL-6 Survie médiane : 6 mois vs 22 mois British Amplification du gène de l’IL-6 Survie médiane : 6 mois vs 22 mois British Journal of Cancer, 2007 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

Perspectives 3 axes de recherche Confirmation des résultats sur une série plus importante Étude Perspectives 3 axes de recherche Confirmation des résultats sur une série plus importante Étude de l'amplicon incluant le gène de l'IL-6 (7 p 21) EGFR, Twist, … Étude des effets de la neutralisation de la voie IL-6 sur la radiosensibilité des GBM. Étude génomique et transcriptomique comparative de la population avec versus sans amplification du gène IL-6 ANOCEF, Toulouse, Mai 2007

EA 3846 – Université d’Auvergne Centre Jean Perrin – Clermont Ferrand Pierre VERRELLE Andréï EA 3846 – Université d’Auvergne Centre Jean Perrin – Clermont Ferrand Pierre VERRELLE Andréï TCHIRKOV Toufic KHALIL Bernard IRTHUM Jean-Louis KEMENY Patrick MERLE Henri JANICOT Emmanuel CHAUTARD UMR CNRS 144 Institut Curie - Paris Charles DECRAENE Jean-Paul THIERY Département d’Immunologie Centre Jean Perrin – Clermont Ferrand Jacques CHASSAGNE Laboratoire de Neuropathologie Pitié-alpétrière, Paris Karima Mokhtari ANOCEF, Toulouse, Mai 2007