АМИНОКИСЛОТЫ АЛИФАТИЧЕСКОГО РЯДА И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ продолжение мелфалан

АМИНОКИСЛОТЫ АЛИФАТИЧЕСКОГО РЯДА И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ (продолжение) мелфалан, каптоприл, эналаприл 08. 02. 2013 1

Групповая реакция p 1. Образование медной соли. Аминокислоту 1. Образование медной соли предварительно переводят в натриевую соль (щелочь добавляют осторожно), с катионом меди (II), образуется комплексное соединение темносинего цвета: темно-синий p Комплекс плохо растворим в воде - реакция может служить для выделения аминокислот из смеси. 2

p 2. Нингидриновая проба. Нингидрин – 2. Нингидриновая проба это 2, 2 -дигидрокси-1, 3 -индандион Нингидрин взаимодействует с аминокислотами с образованием красителя сине-фиолетового цвета. «Синь Роймана» . 3

Мелфалан (Melphalan) 4 -бис(2 -хлороэтил)амино-L-фенилаланин p C 13 H 18 Cl 2 N 2 O 2 Мr 305, 2 p p p Описание. Белый или слегка желтоватый Описание кристаллический порошок, без запаха или почти без запаха. Практически нерастворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в хлороформе и эфире. Растворяется в минеральных кислотах и 4 разбавленных щелочах

Определение подлинности. p 1. ИК-спектр субстанции сравнивают со спектром стандартного образца мелфалана. p 2. УФ-спектр раствора в метаноле (1 в 100 000): Максимум поглощения при 260 нм. p 3. Для 0, 5% раствора в метаноле определяют угол оптического вращения: -32 о. p 5

p p p Можно провести следующие испытания: 1. Проба Бельштейна - на органически связанный хлор. Крупинку мелфалана нагревают на медной проволоке в пламени горелки. Пламя приобретает зеленую окраску. 2. В молекуле мелфалана атом хлора непрочно связан с атомом углерода. Для его обнаружения достаточно нагреть препарат в водно-спиртовой среде с раствором нитрата серебра. 6

p Оценка чистоты Хлориды: титриметрически. Титрант серебра нитрат. Потеря в весе при высушивании – не более чем 0, 7%. Сульфатная зола – не более чем 0, 3%. p Количественное определение Аргентометрический метод. Мелфалан количественно определяют по хлорид-иону, который образуется после деструкции молекулы в результате воздействия на навеску 0, 5 моль/л раствора гидроксида натрия. Затем уксусной кислотой нейтрализуют по фенолфталеину и титруют 0, 1 М раствором нитрата серебра. Окончание – потенциометрическое. p Применение Противоопухолевое, цитостатическое действие. Форма выпуска – таблетки, раствор для инъекций. p Хранение В хорошо закрытых контейнерах, защищая от света и поддерживая температуру 25 о. С. 7

Производные пролина p p p Каптоприл и эналаприл. Были созданы в 80 -х годах XXв. как синтетические ингибиторы фермента, обладающего антигипертензивным действием. Основой химической структуры каптоприла и эналаприла является производное аминокислоты пролина – 2 метилпропионил- L-пролин. пирролидин пролин 8

Каптоприл (Captoprilum) (2 S)-1 -[(2 S)-2 -Метил-3 сульфанилпропаноил]-пирролидин-2 карбоновая кислота p C 9 H 15 NO 3 S Mr 217, 3 p Синонимы: Капотен, Капокард, Алкадил, Каприл, Катопил. p 9

Описание. Белый кристаллический порошок со слабым запахом серы. Растворим в воде, метаноле и этаноле, а также в растворах щелочей. p p Определение подлинности (ЕР): 1. Метод ИК-спектрофотометрии. 2. Методом поляриметрии определяют удельное вращение раствора субстанции (1% раствор в этаноле): [α] от -1270 до -1320. 10

p p p Оценка чистоты Водный 2% раствор субстанции -прозрачный и бесцветный р. Н 2% раствора от 2, 0 до 2, 6. Родственные примеси определяют методом ВЭЖХ. (Каптоприл-дисульфид) p p Ионы тяжёлых металлов (не более 20 ppm). p Потеря в массе при высушивании – не более 1% p Сульфатная зола – не более 0, 2%. 11

Количественное определение проводят методом йодометрии. Титрант –раствор йода: p 2 R- SH + I 2 = R-S-S-R +2 HI p Конечную точку титрования определяют потенциометрически. p Хранение В плотно закрытых контейнерах. Применение Применяется как антигипертензивное средство при артериальной гипертензии: при гипертонической болезни, гипертоническом кризе. 12

Эналаприла малеат (Enalapril maleate) C 24 H 32 N 2 O 9 Mr 492, 5 p Синонимы: Энам, Энап, Вазолаприл, Инворил, Раниприл. p 13

p Является «пролекарством» - в организме гидролизуется до каптоприла, который ингибирует ангиотензинконвертирующий фермент. p Описание Белый кристаллический порошок, плохо растворим в воде, растворим в метиловом и этиловом спиртах, в разбавленных растворах щелочей. Определение подлинности (ЕР) 1. Метод ИК-спектрофотометрии. 2. Методом поляриметрии определяют удельное вращение раствора субстанции (1% в воде): [α] от -48, 00 до -51, 00. p p p Не ФС: Гидроксамовая реакция. Реакцию проводят с раствором гидроксиламина гидрохлорида в метаноле в присутствии гидроксида калия в этаноле. Гидроксаматы 14 железа – красно-коричневого цвета.

Оценка чистоты p Водный раствор субстанции (1%) прозрачный и бесцветный p р. Н 1% р-ра от 2, 4 до 2, 9. p Родственные примеси определяют методом ВЭЖХ. p Допустимой примесью являются ионы тяжёлых металлов (не более 10 ppm). p Потеря в массе при высушивании – не более 1% p сульфатная зола – не более 0, 1%. Количественное определение Метод нейтрализации. Титрант - 0, 1 моль/л раствор гидроксида натрия, конец титрования определяют потенциометрически. Применение При гипертонической болезни, сердечной недостаточности. Форма выпуска - таблетки Хранение В хорошо закрытых банках, в защищенном от света 15 месте.

Лекция «Антибиотики как лекарственные средства» 16

Антибиотики это синтезируемые – микроорганизмами вещества, или продукты их химической модификации (полусинтетические антибиотики), которые способны подавлять рост микроорганизмов, а также вирусов и клеток. Антибиотики характеризуются двумя основными признаками: Во-первых, избирательностью действия, т. е. каждый антибиотик проявляет свое биологическое действие лишь по отношению к определенным видам микроорганизмов. p p p Во-вторых, антибиотики проявляют высокую биологическую активность в низких концентрациях по 17 отношению к чувствительным к ним организмам.

КЛАССИФИКАЦИЯ АНТИБИОТИКОВ I. По происхождению: p 1. Природные антибиотики, т. е. продукты жизнедеятельности микроорганизмов. (пенициллины, тетрациклины, стрептомицин). p 2. Полусинтетические антибиотики, которые получают в результате различных химических модификаций молекул природных антибиотиков (полусинтетические пенициллины и тетрациклины, цефалоспорины). p 3. Синтетические антибиотики (левомицетин, синтомицин ) p II. По биологическому действию на возбудителя: p 1. Антибиотики, обладающие бактерицидным действием –вызывают гибель бактерий. p 2. Антибиотики, обладающие бактериостатическим действием –подавляют размножение бактерий. 18

КЛАССИФИКАЦИЯ АНТИБИОТИКОВ III. По спектру действия: p антибиотики, действующие только на грамположительные микробы, такие как стафилококки, стрептококки, пневмококки и др. (пенициллин, эритромицин и т. д. ). p -антибиотики, действующие как на грамположительные, так и на грамотрицательные организмы. (Стрептомицин, хлоромицин, тетрациклины, неомицин, канамицин и т. д. ). p - антибиотики противогрибкового действия. (антимицин, группа полиеновых антибиотиков, таких как нистатин, кандицидин, трихомицин и др. ) - -антибиотики, действующих как на микроорганизмы, так и на опухолевые клетки - актиномицины, митомицин, саркомицин, и др. 19

КЛАССИФИКАЦИЯ АНТИБИОТИКОВ IV. по химическому строению · а) -лактамиды ( -лактамы) (пенициллины, цефалоспорины, нециклические -лактамиды) · б) Аминогликозиды (стрептомицин; канамицин, гентамицин, амикацин). · в) Тетрациклины · г) Макролиды и азалиды (эритромицин, азитромицин). · д) Линкомицины. · е) Препараты группы левомицетина · ж) Полимиксины. 20

Стадии промышленного получения антибиотиков 1. выбор высоко производительных штаммов продуцента (до 45 тыс. ЕД/мл) 2. выбор питательных сред; 3. процесс биосинтеза; 4. выделение антибиотика из культуральной жидкости и его очистка. • • Для повышения продуктивности штаммов применяют мутагены, вызывающие стойкие наследственные изменения: 1 мутагены физической природы: ультрафиолетовое излучение, рентгеновское излучение, быстрые нейтроны • 2 химические вещества 21

Методы выделения антибиотиков 1. Адсорбция на молекулярных адсорбентах (угли, глины, пермутиты); 2. Экстракция различными органическими растворителями из раствора с тем или иным значением р. Н; 3. Ионный обмен на различных катионо- и анионообменниках (для аминогликозидов); 4. Прямое осаждение (для тетрациклинов). Очистка сырцов-антибиотиков производится хроматографическими методами или противоточной экстракцией. Очищенные антибиотики подвергают лиофильной сушке. 22

У АНТИБИОТИКОВ ОПРЕДЕЛЯЮТ: 1. Токсичность антибиотика 2. Терапевтические свойства антибиотика: Минимальное количество антибиотика, способствующее предохранению животного от смертельной дозы инфекции - минимальная терапевтическая доза. 3. Терапевтический индекс. Понятие «терапевтический 3. Терапевтический индекс» ввел в 1913 г. немецкий врач, . лауреат Нобелевской премиии (1908) Пауль Эрлих. Терапевтический индекс отношение Терапевтический индекс среднелетальной (вызывающей гибель 50 % экспериментальных животных) дозы препарата к среднетерапевтической (дающей 50%-й терапевтический эффект экспериментах на животных) = LD 50/ED 50. 23

p Терапевтический индекс определяет безопасность ЛС, и чем он выше, тем безопасность большую терапевтическую широту имеет препарат. p Если терапевтическая доза равна токсической (низкий токсической терапевтический индекс), то применение антибиотика в лечебной практике не разрешается p Терапевтический индекс для бензилпенициллина натриевой соли - близок к 100 24

ДЛЯ СТАНДАРТИЗАЦИИ АНТИБИОТИКОВ вводят: Единица антибиотической активности - минимальное Единица антибиотической активности количество антибиотика, способное подавить развитие или задержать рост стандартного штамма тестмикроорганизма в определенном объеме питательной среды. Величину биологической активности антибиотиков выражают в условных единицах действия (ЕД), в расчете на 1 мл раствора (ЕД/мл) или на 1 мг препарата (ЕД/мг). За 1 ЕД бензилпенициллина Na cоли принята специфическая активность 0, 5988 мкг химически чистой натриевой соли этого антибиотика, способное задерживать рост золотистого стафилококка штамм 209 в 50 мл бульона. (1 мг бензилпенициллина содержит 1667 ЕД). 1 ЕД чистого основания стрептомицина = 1 мкг 25

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИБИОТИКОВ • 1. Биологические методы: . • Диффузионный метод. Антибиотики диффундируют в агаровых метод средах с образованием зон лизиса, в которых используемые тесторганизмы не развиваются. Величина зоны для каждого антибиотика различна. Турбидиметрический метод. (нефелометрический) основан на метод измерении степени мутности культуральной среды при росте клеток тест-микроорганизмов в присутствии антибиотиков. • 2. Химические методы. • 3. Физико-химические методы. 26

Антибиотики - -ЛАКТАМИДЫ Антибиотики, молекулы которых содержат -лактамное кольцо: p - пенициллины, p - цефалоспорины. p Лактамы – это циклические амиды, содержащие в цикле группировку –CO-NR-, образующиеся при дегидратации аминокислот. Общая структура лактамного кольца: 27

ПЕНИЦИЛЛИНЫ p p 1. 2. p p В основе строения природных и синтетических пенициллинов лежит 6 -аминопенициллановая кислота (6 -АПК) – 6 -амино-2, 2 -диметил-7 -оксо-1 -тио 4 -азобициклогептан-3 -карбоновая кислота. В структуру 6 -АПК входят два конденсированных гетероцикла: азетидиновый (цикл В, лактамное кольцо) азетидиновый тиазолидиновый (цикл А, полностью гидрированный тиазол). Гетероциклы имеют общий атом азота: атом азота -лактам тиазолидин 28

Пенициллины Мишенью действия пенициллина являются пенициллинсвязывающие ферменты бактерий. Эти ферменты действуют на завершающем этапе синтеза пептидогликана - биополимера, являющегося основным компонентом клеточной стенки бактерий. Блокирование синтеза пептидогликана приводит к гибели бактерии. p 29

Развитие устойчивости (резистен ) к пенициллинам связано с ции тем, что микроорганизмы синтезируют фермент лактамазу, под действием которой происходит раскрытие лактамного цикла в производные, которые не обладают биологической активностью: Производное пенициллоиновой к-ты 30

p Под действием бактериальных амидаз происходит отщепление радикалов, разрушается амидная связь: p АМИДАЗА лактамаза 31

p Созданы специфические ингибиторы -лактамаз ( путем окислении атома серы тиазолидинового цикла у производных пенициллановой кислоты): клавулановая кислота, сульбактама натриевая соль и др. , способные необратимо ингибировать -лактамазы. p Проникает через стенки бактериальных клеток, инактивирует бета-лактамазы как внутри клетки, так и на ее поверхности. 32

Обладают слабой антимикробной активностью, но при сочетании их с антибиотиками повышается устойчивость и активность самих антибиотиков. p В результате созданы высокоэффективные комбинированные антибиотики: p уназин (ампициллин + сульбактамуназин натрий), p аугметин (амоксициллин + аугметин клавулановая кислота), и др. p 33

СУЛЬБАКТАМА НАТРИЕВАЯ СОЛЬ (ЕР) натриевая соль 1, 1 -диоксида пенициллановой кислоты натрия (2 S, 5 R)-3, 3 -диметил-7 -оксо-4 -тиа-1 азабицикло[3, 2, 0]гептан-2 -карбоксилата 4, 4 -диоксид C 8 H 10 NNa. O 5 S Mr 255, 2 Синонимы: Sulbactam Sodium, сульбактам-натрий. Описание: белое кристаллическое вещество. Описание Растворимость: Растворимость · Легко растворимое в воде, растворах кислот, · Мало растворимое в этаноле, ацетоне, этилацетате 34 · Практически нерастворимое в эфире и хлороформе

p p p p p Определение подлинности. ИК-спектрофотометрия в сравнении со спектром ИК-спектрофотометрия раствора стандартного образца сульбактама-натрия. Реакция на ион натрия ЧИСТОТА: Раствор субстанции должен быть бесцветный и прозрачный. Значение р. Н 5% водного раствора от 4, 5 до 7, 2; если субстанция стерильна, то от 5, 2 до 7, 2. Удельное вращение 1% водного раствора от +219° до +233°. Остаточные растворители и родственные примеси (≤ 1%): методом жидкостной хроматографии Тяжелые металлы Воды не более 1, 0 %. Бактериальные эндотоксины: менее 0, 17 МЕ/мг. 35

36

p p p p Примеси: 6 -АПК, 6 -бромопенициллановая кислота, 6, 6 -дибромопенициллановая кислота, (2 S)-2 -амино-3 -метил-3 -сульфинбутановая кислота, 6 -бромопенициллановой кислоты сульфон. Количественное определение проводят методом жидкостной хроматографии. 37

КЛАВУЛАНОВАЯ КИСЛОТА: POTASSIUM CLAVULANATE, DILUTED (ЕР) Kalii clavulanas dilutus 3 -(2 -Гидроксиэтилиден)-7 -оксо-4 -окса-1 -азабицикло[3. 2. 0]гептан-2 карбоновая кислота С 8 H 9 NO 5 Mr 237, 3 Смесь калия клавуланата и микроцеллюлозы 38

Подлинность p p p 1. Метод жидкостной хроматографии (сравнение со стандартным растворм) 2. Реакции на калий 3. Реакции на целлюлозу (полисахарид [С 6 Н 7 О 2(OH)3]n): при добавлении раствора (20 г хлорида цинка и 6, 5 г калия йодида в 10, 5 мл воды + 0. 5 г йода): сине-фиолетовое окрашивание 39

p p p Чистота p. H (1% раствора): 4. 8 - 8. 0. УФ-области : max. Абсорбция 0, 5% раствора в 0, 1 М фосфатном буфере= 0. 40 при λ=278 нм. Родственные примеси, количественное определение: Жидкостная хроматография 40

p Ø Ø Ø Классификация пенициллинов 1. Природные пенициллины Бензилпенициллин: калиевая и натриевая соли Феноксиметилпенициллин (кислотоустойчивые, но кислотоустойчивые, инактивируемые пенициллиназой), бициллин III, бициллин V). V 2. Полусинтетические пенициллины: а) пенициллиназоустойчивые с преимущественной пенициллиназоустойчивые активностью в отношении грамположительных микроорганизмов (в том числе микроорганизмов, образующих пенициллиназу множественно устойчивых стафилококков): оксациллин; p 41

p Ø Ø Ø б) широкого спектра действия: активные в отношении большинства грамотрицательных (кроме синегнойной палочки) и грамотрицательных грамположительных (за исключением грамположительных пенициллиназообразующих стафилококков) микроорганизмов: ампициллин, амоксициллин ; амоксициллин активные в отношении синегнойной палочки и в отношении синегнойной палочки других грамотрицательных бактерий: карбенициллин; комбинированные антибиотики: ампиокс (ампициллинкомбинированные антибиотики ампиокс оксациллин, 2: 1); 42

Природные пенициллины: 1. Benzylpenicillinum-natrium – бензилпенициллина натриевая соль • 2. Benzylpenicillinum-kalium – бензилпенициллина калиевая соль • • 3. Benzylpenicillinum-nоvocainum – бензилпенициллина новокаиновая соль первичная аминогруппа 43 сложноэфирная

p Бензилпенициллин - одноосновная кислота. p В виде свободной кислоты препарат плохо растворим в воде и нестоек, поэтому в медицинской практике применяется в виде хорошо растворимых солей натрия, калия, а также эфиров. p Действует на микроорганизмы, расположенные как внутри, так и вне клеток. Концентрация пенициллинов в клетке составляет 60% от его концентрации в крови, в связи с чем 5 — 10% микробов, находящихся в клетках, выживают. p Действует на грамположительные кокки и палочки, актиномицеты, грамотрицательные кокки (менингококк и гонококк). 44

p Препарат быстро всасывается и быстро выводится из организма при внутримышечном введении. При приеме внутрь разрушается пенициллиназами кишечной флоры и не устойчив в кислой среде, поэтому может применяться только парентерально p Средняя терапевтическая концентрация в крови сохраняется 3 -4 ч, поэтому препарат необходимо вводить не менее 6 раз в сутки. Однократная доза для парентерального введения бензилпенициллина 1 млн ЕД, суточная — 6 млн ЕД. 45

Benzathini Benzylpenicillinum – бензатина бензилпенициллин (Бициллин – 1) (C 16 H 18 N 2 O 4 S)2 · C 16 H 20 N 2 Mr 909, 0 • Феноксиметилпенициллин (Phenoximetylpenicillinum) Синонимы: Fenacillin, Fenoxypen, V-penicillin C 16 H 18 N 2 O 5 S Mr 350, 4 46

p p Бициллин-1: депо-пенициллин, обладающий наибольшей продолжительностью действия. Бактерицидный антибиотик. Бензатин бензилпенициллин очень медленно гидролизуется, высвобождая бензилпенициллин, который постепенно всасывается и поддерживает терапевтическую концентрацию в крови длительное время. Показания к его применению: лечение сифилиса и профилактика ревматизма. При профилактики рецидивов ревматической атаки и ревматического эндокардита у взрослых: 1 -2 инъекции 1, 2 млн. ед. внутримышечно или 2, 4 млн. ед. каждые 4 недели. 47

p Бициллин -3: смесь равных частей: Ø бензатин бензилпенициллина, бензилпенициллина натриевой (или калиевой) соли бензилпенициллина новокаиновой соли p Показания к применению: острый тонзиллит, Ø Ø скарлатина, раневые инфекции, рожистое воспаление; ревматизм (профилактика и лечение), и др. p В дозе 600000 ЕД вводят один раз в 6 дней. 48

p Бициллин-5: содержит: Ø Ø бензатин бензилпенициллин 1. 2 млн. ЕД, бензилпенициллина новокаиновая соль 300 тыс. ЕД. особенно показан для продолжительной (круглогодичной) профилактики рецидивов ревматизма Вводят взрослым по 1 500 000 ЕД (содержимое одного флакона) 1 раз в 4 нед внутримышечно 49

p Аллергические реакции: крапивница, реакции: ангионевротический отек, анафилактический шок, лихорадка, и др. Со стороны пищеварительной системы: стоматит, системы глоссит. Со стороны свертывающей системы крови: анемия, крови тромбоцитопения, лейкопения, гипокоагуляция. Прочие: при длительном применении - суперинфекция, Прочие: микозы. 50

ПОЛУЧЕНИЕ ПОЛУСИНТЕТИЧЕСКИХ ПЕНИЦИЛЛИНОВ 1. Первая стадия: кислоты (6 -АПК). биосинтез 6 -аминопенициллановой 6 -АПК 2. Вторая стадия: ацилирование амина в молекуле 6 -АПК. ПРИРОДНЫЕ ПЕНИЦИЛЛИНЫ • 6 -АПК полусинтетические пенициллины 51

Ампициллин (Ampicilinum) p R= 52

p p p Ампициллин относится к аминопенициллинам Кислотоустойчив, имеет широкий спектр действия, главным образом за счет грамотрицательной флоры. Ампициллин разрушается стафилококковой пенициллиназой. По интенсивности действия на грамположительную флору менее активен, чем пенициллин, но превосходит оксациллин, тетрациклин и левомицетин. Назначают парентерально по 0, 5 -1, 0 г каждые 4 -6 ч. Суточная доза 3 -4 г. Высокие дозы антибиотика переносятся хорошо, без развития токсических реакций в течение 1 -1, 5 мес и более. 53

. Оксациллина натриевая соль (Oxacillinum-natrium) p R= 54

Оксациллин (натриевая соль) относится к полусинтетическим пенициллинам изоксазолиловой группы. p Препарат хорошо всасывается приеме внутрь, его биодоступность меняется в зависимости от приема пищи, поэтому оксациллин лучше принимать натощак. p Растворы для парентерального введения сохраняют активность в течение 9 дней и более. p 55

. Амоксициллина тригидрат (Amoxycillini trihydras) p R= 56

p p p Амоксициллин — полусинтетический пенициллин, близкий пенициллин по антибактериальному спектру действия к ампициллину. Хорошо всасывается приеме внутрь, его биодоступность достигает 95% и не зависит от приема пищи. Накапливается в пазухах носа, среднем ухе. Доза = 0, 25 -0, 5 г 3 раза в день для приема внутрь и 0, 25 -1 г каждые 8 ч для введения в вену. Используют для лечения острого отита и синуита, бронхопневмонии, инфекции мочевых путей. Более активен, чем ампициллин, при салмонелезе и шигеллиозе. 57

Ампиокс является сочетанием: Натриевых солей ампициллина и оксациллина в отношении для парентерального введения 2 : 1 Ампициллина тригидрата и оксациллина натриевой соли в соотношении 1 : 1 в виде капсул. p Ø Ø Имеет преимущества перед каждым из входящих в его состав компонентов: более широкий спектр действия, большую бактерицидность, замедленное развитие устойчивости флоры к препарату или же отсутствие такой устойчивости. Это объясняют связыванием оксациллином пенициллиназы, обычно препятствующей проявлению активности ампициллина в отношении пенициллиназообразующих грамотрицательных возбудителей. p 58

p Ø Ø Ø p p p Назначают Ампиокс : при тяжело протекающих инфекциях при неустановленной антибиотикограмме при невыделенном возбудителе. Неэффективен в отношении синегнойной палочки. Ампиокс хорошо всасывается приеме внутрь, хорошо всасывается стабилен в кислой среде. Ампиокс назначают внутрь в разовой дозе 0, 5 -1, 0 г, назначают внутрь суточной — 2 -4 г с интервалом 6 -8 ч (при внутримышечном введении интервал 4 -6 ч). Длительность приема от 5 -7 дней до 2 нед и более. Длительность приема 59

Карбенициллина динатриевая соль (Carbenicillinum-dinatricum) p R= 60

p p Карбенициллин (натриевая соль) обладает широким спектром антибактериальной активности в отношении грамположительных и грамотрицательных возбудителей. Активен против синегнойной палочки и бактероидов. Штаммы кишечной палочки, устойчивые к ампициллину, чувствительны к карбенициллину. Карбенициллин кислотостабилен, однако приеме внутрь плохо всасывается из желудочно-кишечного тракта, поэтому его вводят парентерально. Суточная доза при внутримышечном введении составляет 4 -8 г, при введении в вену — до 20 - 30 г. 61

Свойства природных пенициллинов • Белые мелкокристаллические порошки без запаха, горького вкуса. • Натриевая и калиевая соли бензилпенициллина, хорошо растворимы в воде. • Природные пенициллины разрушаются под действием кислот, щелочей и в присутствии фермента пенициллиназы. В водных растворах препараты легко инактивируются, особенно при повышенной температуре, поэтому их нельзя стерилизовать, их готовят асептически. Бензилпенициллина новокаин, бензатин бензилпенициллин и феноксиметилпенициллин – мало растворимы в воде. Феноксиметилпенициллин применяется парентерально. 62

Определение подлинности препаратов пенициллина • I. По физико-химическим показателям. 1. По удельному вращению. • Удельное вращение 2% водного раствора бензилпенициллина натриевой соли составляет от +285º до +310º, • калиевой соли – от +270º до 300º; • бензилпенициллина новокаиновой соли (1% р-р в смеси 3 ч. ацетона и 2 ч. воды) от +165º до +180º; • феноксиметилпенициллина (раствор в бутаноле) от +186º до +200º. • 2. УФ-спектрофотометрия Бензилпенициллин и его соли имеют в УФ-области спектра два выраженных максимума – при 257 и 263 нм. • (6 -АПК не имеет max, пенициллины • имеют max за счет аромат радикала). 63

p 3. ИК-спектры пенициллинов идентифицируют по совпадению с полосами поглощения соответствующих стандартных образцов. p 4. Методом ТСХ. p II. С помощью химических реакций. 64

Определение подлинности p 1. Гидроксамовая реакция. С солями трехвалентного железа (Fe. Cl 3) образуются гидроксаматы железа красного цвета, с солями меди – зеленого цвета: 65

ГИДРОКСАМОВАЯ РЕАКЦИЯ: Стадия щелочного гидролиз идет при нагревании и р. Н=10 -11; а образование гидроксаматовпри кислых – р. Н 66

Определение подлинности • 2. Соли бензилпенициллина испытывают на ион калия или натрия : • · на К-ион по образованию белого осадка при реакции с винной кислотой и по окрашиванию пламени горелки в фиолетовый цвет; • на Na-ион по окрашиванию пламени горелки в желтый цвет или по образованию желтого осадка при реакции с цинк-уранилацетатом. • 67

Новокаиновую соль бензилпенициллина подвергают испытанию на первичные ароматические амины. 68

• 2). На азотистое основание. • В молекуле новокаина содержится не только первичная ароматическая группа, но и более сильная алифатическая диэтиламиногруппа: • новокаин дает осадки с общеалколоидными (осадительными) реактивами. Так, с реактивом Майера (раствор иодида ртути в иодиде калия: K 2[Hg. I 4]) образуется белый осадок. 69

• Реакция на дибензилэтилендиамин в бензатине бензилпенициллина. Из щелочного раствора препарата извлекают в эфир дибензилэтилендиамин. 70

• После выпаривания эфира остаток растворяют в этаноле и прибавляют раствор пикриновой кислоты. Образуется желтый осадок пикрата дибензилэтилендиамина. 71

Образование пенилловой и пеницилленовой кислот под действием кислот на пенициллины. Пенилловая кислота образуется при р. Н=2, 0, а пеницилленовая - при р. Н=5, 0. 72

При взаимодействии растворимых солей пенициллинов (натриевых, калиевых) с 25% хлороводородной кислотой выделяется белый осадок кислотной формы пенициллина, (пенилловой к-ты) который растворяется при добавлении избытка реактива. Пенилловая к-та является амфолитом и за счет основных свойств атомов азота образует с хлороводородной к-той растворимую соль –гидрохлорид. 73

p p 4. Реакция с хромотроповой кислотой. Это - дифференцирующая реакция для пенициллинов. , При взаимодействие кислот с пенициллинами образуется пенициллоиновая кислота, далее - пенальдиновая кислота (продукт распада пенициллоиновой кислоты). Образуются ауриновые красители. В зависимости от заместителя R в молекуле пенициллина меняется окраска красителя. Через 3 минуты: p Соли щелочных металлов бензилпенициллина дают коричневую окраску, p новокаиновая соль бензилпенициллина – краснокоричневую, p феноксиметилпенициллин – сине-фиолетовую. p Оксациллин - пурпуную, p Ампициллин – пурпурно-фиолетовую 74

75

Реакция с реактивом Марки наиболее характерной является для феноксиметилпенициллина (красное окрашивание при комнатной температуре и углубление окраски при нагревании). Реакция протекает за счет феноксиуксусной к-ты, которая образуется из феноксиметилпенициллина при действии концентрированной серной кислоты. 76

ЧИСТОТАпрепаратов пенициллина p p p p 1 Испытание на прозрачность и цвет. Растворы натриевых и калиевых солей бензилпенициллина должны быть бесцветными и прозрачными в течение 24 час при t≤ 10 o. C 2. Для качественной характеристики препаратов пенициллина определяют р. Н среды потенциометрически. · Препараты бензилпенициллина имеют р. Н = 5, 57, 5; · Феноксиметилпенициллина имеют р. Н = 2, 4 -4, 0; · Оксациллина натриевая соль р. Н = 4, 5 -7, 5; · Ампициллина натриевая соль р. Н = 8, 0 -9, 5; · Карбенициллина динатриевая соль р. Н = 6, 0 -8, 0; 77

3. Препараты пенициллинов подвергают испытаниям на: Ø токсичность: Содержание бактериальных токсичность эндотоксинов менее 0, 13 МЕ/мл. Ø пирогенность, Ø стерильность Ø термостабильность (натриевую и калиевую соли термостабильность бензилпенициллина): при нагревании ЛП в течение 1, 5 час. до 170 о. С сумма пенициллинов снижается не более чем на 10%. p 4. Определяют йодсорбирующие примеси. Сами примеси пенициллины йодом не окисляются. Окисляться будут только возможные продукты расщепления (йодсорбирующие примеси). Для этого, к раствору препарата добавляют р-р йода с калием йодида, избыток йода оттитровывают натрия тиосульфатом. p 5. Регламентируется содержание воды. (путем высушивания в сушильном шкафу, или титрованием по методу Фишера). 78

p p p 6. В каждом из препаратов регламентируют количество посторонних пенициллинов. Так, содержание пенициллинов бензилпенициллина в калиевой и натриевой солях должно быть не менее 90, 0%, а сумма пенициллинов – не менее 96%. Т. е в препаратах допускается содержание 6, 0% других пенициллинов. Возможно наличие 6 -АПК, пеницилловой и пенициллоиновой кислот, фенилуксусной кислоты. Специфическая примесь в субстанции бензилпенициллина натриевой соли – 2 -этилгексановая кислота – ее допускается не более 0, 5 %; в феноксиметилпенициллине - 4 гидроксифеноксиметилпенициллин – не более 4, 0 %; в бензилпенициллина новокаиновой соли – аминобензойная кислота; в бензатина бензилпенициллине – бензинпенициллоиновой кислоты бензатид и монобензилэтилендиамид. 79

p 7. По величине абсорбции растворов пенициллинов определяют примеси. p в УФ-области светопоглощающие 8. Методом ГЖХ в пенициллинах определяют содержание остаточных растворителей (ацетона, пропанола и т. д. ). Такие испытания предусматривают ФС на бензатинбензилпенициллин, амоксициллин, ампициллин и оксациллина натриевую соль. 80