Алгоритмы этиологической лабораторной диагностики вирусных гепатитов Мавзютов А. Р. Кафедра фундаментальной и прикладной микробиологии БГМУ Кафедра лабораторной диагностики ИПО БГМУ Исследовательский центр «ЛАБОРАТОРИЯ» Тел. /факс 237 -86 -71 17. 02. 2018 1
Распространенность хронического гепатита В распространенность HBs. Ag • 350 миллионов хронических носителей § 88% населения Земли проживает в районах со средним и высоким уровнем инфицированности 17. 02. 2018 8% - высокая 2 -7%- средняя <2% - низкая 10
Вирусные гепатиты в мире (по данным ВОЗ) w 9 -е место среди причин смертности w От активных форм умирает свыше 2 млн. человек 100 тыс. – от молниеносной формы 500 тыс. – в течение 6 мес. 700 тыс. – от цирроза печени 300 тыс. - от карциномы печени 17. 02. 2018 12
Здоровая печень 17. 02. 2018 13
Цирроз печени 17. 02. 2018 14
Повреждение гепатоцитов ведет к патологической продукции цитокинов 17. 02. 2018 15
Цитокины стимулируют патологическое образование соединительной ткани 17. 02. 2018 16
Вирусные гепатиты в 2002 году По достижении пенсионного возраста по Новосибирской обл. инфицировано w 70% средних медицинских работников w 50% врачей 17. 02. 2018 17
ПОСТАНОВЛЕНИЕ N 280 10 мая 2007 О ФЕДЕРАЛЬНОЙ ЦЕЛЕВОЙ ПРОГРАММЕ "ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ И БОРЬБА С СОЦИАЛЬНО ЗНАЧИМЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ (2007 -2011 ГОДЫ)" w Заболеваемость n n n острым вирусным гепатитом B - 8, 6 на 100 тыс. населения острым вирусным гепатитом C - 4, 5 на 100 тыс. населения хроническими вирусными гепатитами B и C 51, 4 на 100 тыс. населения. 17. 02. 2018 18
Федеральный закон"О санитарно эпидемиологическом благополучии населения" N 52 -ФЗ от 30. 03. 99 w "Соблюдение санитарных правил является обязательным для граждан, индивидуальных предпринимателей и юридических лиц" (статья 39). w "За нарушение санитарного законодательства устанавливается дисциплинарная, административная и уголовная ответственность" (статья 55). 17. 02. 2018 19
Основной нормативный акт w 3. 1. Профилактика инфекционных заболеваний. Профилактика вирусных гепатитов. Общие требования к эпидемиологическому надзору за вирусными гепатитами. Санитарно эпидемиологические правила. СП 3. 1. 958 -99. С 1 июля 2000 г. 17. 02. 2018 20
Санитарно - эпидемиологические правила. СП 3. 1. 958 -99. С 1 июля 2000 г. w 4. 1. Первичные мероприятия, направленные на локализацию и ликвидацию очага, осуществляет врач лечебно - профилактического учреждения (ЛПУ) или другой медицинский работник, выявивший больного. 17. 02. 2018 21
Санитарно - эпидемиологические правила. СП 3. 1. 958 -99. С 1 июля 2000 г. w 4. 2. Выявление больных вирусными гепатитами осуществляют медицинские работники учреждений здравоохранения независимо от форм собственности и ведомственной принадлежности 17. 02. 2018 22
Санитарно - эпидемиологические правила. СП 3. 1. 958 -99. С 1 июля 2000 г. w при амбулаторном приеме, посещении больного на дому, устройстве на работу и периодических медицинских осмотрах определенных групп населения, наблюдении за детьми в коллективах, w при обследовании контактных …, а также лабораторном обследовании лиц из групп высокого риска … 17. 02. 2018 23
Санитарно - эпидемиологические правила. СП 3. 1. 958 -99. С 1 июля 2000 г. w 4. 3. Этиологическая расшифровка осуществляется в течение 5 дней. w Более поздние сроки допускаются при наличии микст - инфекции, хронических форм гепатита B (ГB) и гепатита C (ГC), сочетании ВГ с другими заболеваниями. 17. 02. 2018 24
Санитарно - эпидемиологические правила. СП 3. 1. 958 -99. С 1 июля 2000 г. w 4. 8. Медицинский работник, выявивший больного ВГ, подает экстренное извещение установленной формы в территориальный ЦГСЭН. w Каждый случай ВГ вносится в журнал регистрации инфекционных заболеваний. 17. 02. 2018 25
Вирусные гепатиты w w w w Гепатит А (HAV) Гепатит В (HBV) Гепатит С (HCV) Гепатит D (HDV) Гепатит E (HEV) Гепатит G (HGV) Гепатит TT (TTV) Гепатит SEN 17. 02. 2018 26
ДНК-вирус w Гепатит В (HBV) w Гепатит TT (TTV) w Гепатит SEN 17. 02. 2018 РНК-вирус w w w Гепатит А (HAV) Гепатит С (HCV) Гепатит D (HDV) Гепатит E (HEV) Гепатит G (HGV) 27
Кровь w w w Гепатит В (HBV) Гепатит С (HCV) Гепатит D (HDV) Гепатит G (HGV) Гепатит TT (TTV) Гепатит SEN 17. 02. 2018 Вода, пища w Гепатит А (HAV) w Гепатит E (HEV) 28
Клиника HBV+HDV HAV, HEV HCV и др. ТЯЖЕЛОЕ ТЕЧЕНИЕ СРЕДНЕТЯЖЕЛОЕ ТЕЧЕНИЕ ЛЕГКОЕ ТЕЧЕНИЕ 17. 02. 2018 29
Последствия HBV+HDV HСV HBV ЛЕТАЛЬНЫЙ ИСХОД ЦИРРОЗ РАК ПЕЧЕНИ 17. 02. 2018 30
Каноническая модель прогрессирования вирусного гепатита В А. В. Рудакова 1, Ю. В. Лобзин 1, П. Ф. Хвещук 2 17. 02. 2018 31
Терминология w Гепатит – воспалительная патология печени вне зависимости от этиологии w Вирусный гепатит – воспалительная патология печени вирусной природы, связанная с репродукцией вируса 17. 02. 2018 32
Терминология w Рецидив вирусного гепатита – воспалительная патология печени, обусловленная репродукцией вируса, сопровождающаяся цитолизом гепатоцитов и вирусимией w Ремиссия вирусного гепатита – состояние инфицированного вирусом человека, вне репродукции вируса и воспалительной патологии в печени 17. 02. 2018 33
Лабораторная диагностика w Гепатит? w Гепатит вирусный активный? АСТ Ig. G HBs. A g 17. 02. 2018 ДН К Ig. M АЛТ РНК Бил иру бин УЗИ 34
I этап. Гепатит? w Эпидемиологический анамнез w Клиника – астеновегетативный и мезенхимально-воспалительный синдромы w Биохимические исследования w Морфологическое и функциональное исследование печени (УЗИ, сканирование и др. ) 17. 02. 2018 35
Билирубин при желтушных формах вирусного гепатита Показатели Общий билирубин 1, 7 - 17, 1 При гепатита х Рост Прямой билирубин до 3, 4 Рост 1, 7 - 12, 7 Рост - + + - Непрямой билирубин Билирубин мочи и уробилин Стеркобилин кала 17. 02. 2018 Норма (мкмоль/л) 36
I этап. Биохимические исследования w аланинаминотрансфераза (Ал. АТ) w аспартатаминотрансфераза (Ас. АТ) w лактатдегидрогеназа (ЛДГ) w ‑глютамилтранспептидаза (ГГТ) w щелочная фосфатаза (ЩФ) w диспротеинемии (тимоловая проба) и др 17. 02. 2018 37
Сравнение биохимических показателей больных гепатитом С и лиц контрольной группы общий белок 100 80 60 40 20 0 бетта-ЛП тимоловая проба ВГС (РНК-) ГГТ Аст 17. 02. 2018 общий билирубин Группа сравнения Ал. Т 38
Активность ферментов крови Фермент Ал. АТ При гепатитах любой этиологии увеличение Ас. АТ увеличение ЩФ увеличение Фруктозо 1 фосфатальдолаза Сорбитол дегидрогеназа увеличение нет нет + увеличение + 17. 02. 2018 Гепатоспецифичность 39
Фазы течения заболевания (ГС) Core Аг т ан С- Г и-В Ig. M АТ Ал К РН ВГ 17. 02. 2018 Латентная фаза 10 -12 лет 6 мес С Острая фаза Фаза реактивации 40
II этап. Вирусный гепатит А? w Сыворотка крови w Иммуноферментный метод (ИФА) w anti-HAV Ig. G 17. 02. 2018 41
II этап. Вирусный гепатит В? w Сыворотка крови w ИФА w HBs. Ag (c подтверждением) w anti-HBcor Ig. G w anti-HBe Ig. G 17. 02. 2018 + + 42
HBs. Ag не обнаруживается: w В серонегативный период заболевания (до 6 месяцев с момента инфицирования) w В период ремиссии (фаза интеграции) w При одновременном инфицировании дельта-вирусом (гепатит D) 17. 02. 2018 43
S ген, HBs. Ag мутации • Тест-системы, не учитывающие наличие мутаций HBs. Ag, могут давать ложноотрицательные результаты Y Y Y ? Y a-HBs связывание 17. 02. 2018 44
HBs. Ag не обнаруживается: w В связи с существованием вариантов HBs. Ag, неизвестных в настоящее время (Известно свыше 12 субтипов этого антигена и приблизительно столько же генотипов вируса) w HBs. Ag не обладает абсолютной специфичностью 17. 02. 2018 45
Формирование суперкапсида (выпочковывание) 17. 02. 2018 46
II этап. Вирусный гепатит C? w Сыворотка крови w ИФА w anti-HCV Ig. G (cкрининг + подтверждение) 17. 02. 2018 47
II этап. Вирусный гепатит D, E, G? w Сыворотка крови w ИФА w anti-HDV суммарные w anti-HEV суммарные w anti-HGV суммарные 17. 02. 2018 48
II этап. Вирусный гепатит TT, SEN? w Плазма крови w Полимеразная цепная реакция (ПЦР) w ДНК вируса гепатита TT w ДНК вируса гепатита SEN 17. 02. 2018 49
III этап. Активный гепатит А? w Вирусная РНК в плазме крови и/или испражнениях (ПЦР) или w Ag HAV в испражнениях (ИФА) или w anti-HAV Ig. M в сыворотке крови (ИФА) 17. 02. 2018 50
III этап. Активный гепатит B? w Вирусная ДНК в плазме крови (ПЦР) или w HBs. Ag (c подтверждением) в сыворотке крови или (ИФА) или w HBe. Ag в сыворотке крови l anti-HBcor Ig. M в сыворотке крови (ИФА) или l 17. 02. 2018 anti-HBe Ig. M в сыворотке крови (ИФА) 51
III этап. Активный гепатит C? w Вирусная РНК в плазме крови (ПЦР) или w anti-HCV Ig. G к неструктурным белкам вируса (NS 3, NS 4, NS 5) в сыворотке крови (ИФА) или l anti-HCV Ig. M в сыворотке крови (ИФА) 17. 02. 2018 52
w Скрининговые тест-системы w Подтверждающие тесты: иммуноблот ИФА w Диагностикумы, выявляющие активную репликацию вируса: ИФА (анти-ВГС-Ig. M) ПЦР (РНК-ВГС) core-Ag w Экспресс-метод 17. 02. 2018 55
«ВГС-АГ/АТ-ИФА-БЕСТ» (2010 г) w Двустадийный иммуноферментный тест в микропланшетном формате; w Антитела (АТ) к ВГС определяются с помощью непрямого ИФА; w Антиген (АГ) вируса - методом «сэндвич» ; w Обе методики объединены в единый протокол и выполняются в одной лунке микропланшета; w Образцы для исследования не требуют предварительной подготовки; w Правильность внесения образцов и реагентов оценивается с помощью цветовой кодировки (спектрофотометрическая верификация); w Продолжительность анализа - 2 часа 25 минут. 17. 02. 2018 56
III этап. Активный гепатит D? w Вирусная РНК в плазме крови (ПЦР) или w Ag HDV в сыворотке крови (ИФА) 17. 02. 2018 57
III этап. Активный гепатит E? w Вирусная РНК в плазме крови 17. 02. 2018 (ПЦР) 58
III этап. Активный гепатит G, TT, SEN? w РНК вируса гепатита G в плазме крови (ПЦР) w ДНК вируса гепатита TT в плазме крови (ПЦР) w ДНК вируса гепатита SEN в плазме крови (ПЦР) 17. 02. 2018 59
Ускоренное обследование (ИФА+ПЦР) Гепатит А Гепатит B Гепатит C Гепатит D 17. 02. 2018 Инфицированность? (ИФА) Anti-HAV Ig. G HBs. Ag Anti-HBe Ig. G Anti-HBcor Ig. G Anti-HCV Ig. G Anti-HDV Ig. G Активность? (ПЦР) РНК ДНК РНК 60
Ускоренное обследование (ИФА+ПЦР) Гепатит E Гепатит G Гепатит TT Гепатит SEN 17. 02. 2018 Инфицированность? (ИФА) суммарные Anti-HEV суммарные Anti-HGV Активность? (ПЦР) РНК ДНК 61
Ускоренное обследование (ИФА) Инфицированность? Активность? HAV Ag(в кале) Гепатит А Anti-HAV Ig. G Гепатит B Anti-HBcor Ig. G + Anti-HBe Ig. G Гепатит C Anti-HCV Ig. G 17. 02. 2018 Anti-HAV Ig. M HBs. Ag или HBe. Ag или Anti-HBcor Ig. M Anti-HCV Ig. G к неструктурным белкам или Anti-HCV Ig. M 62
Ускоренное обследование (ИФА) Гепатит D Гепатит E Гепатит G Инфицированность? Активность? Суммарные Anti. HDV Ag HDV Суммарные Anti. HEV Суммарные Anti. HGV Гепатит TT Гепатит SEN 17. 02. 2018 63
Скачать презентацию Алгоритмы этиологической лабораторной диагностики вирусных гепатитов Мавзютов А
гепатиты с биохимией и эпид1-2.ppt