88 ИНГИБИТОРЫ ТРАНСКРИПЦИИ Актиномицин D 89 ИНГИБИТОРЫ

88 ИНГИБИТОРЫ ТРАНСКРИПЦИИ Актиномицин D

89 ИНГИБИТОРЫ ТРАНСЛЯЦИИ Стрептомицин как большинство других аминогликозидов, связывается только с S 12 -белком 30 S-субчастицы бактериальных рибосом Пуромицин блокирует синтез полипептидов на рибосомах как у про -, так и у эукариот, имитируя действие аминоацил-т. РНК Эритромицин блокирует перемещение рибосомы после завершения элонгации или пептидилтрансферазную реакцию Хлорамфеникол и циклогексимид. Хлорамфеникол действует на рибосомы бактерий, митохондрий и хлоропластов, а циклогексимид только на рибосомы эукариот, находящиеся в цитоплазме. Оба соединения влияют на пептидилтрансферазную активность больших субчастиц рибосом.

89. 5 РЕГУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ 1. Синтез первичного РНК транскрипта (транскрипция) 2. Посттранскрипционная модификация м. РНК 3. Деградация м. РНК 4. Синтез белка (трансляция) 5. Посттрансляционная модификация белка 6. Транспорт белка 7. Деградация белка

90 РЕГУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ Согласованная регуляция экспрессии прокариотических генов Оперон - группа координировано экспрессирующихся генов Область, кодирующая регуляторный белок Оператор - регуляторный сегмент гена Промотор Полицистронный (или полигенный) транскрипт

91 Согласованная регуляция экспрессии прокариотических генов Негативная регуляция инициации транскрипции, или репрессия, осуществляется белками репрессорами, которые связываются с операторами Позитивная регуляция инициации транскрипции может осуществляться специфических белков-активаторов с нуклеотидными последовательностями, расположенными в области промотора

92 Согласованная регуляция экспрессии прокариотических генов Положение на генетической карте E. coli генов, кодирующих рибосомные белки.

93 Регуляция экспрессии лактозного оперона E. coli

94 Регуляция экспрессии лактозного оперона E. coli Негативная регуляция (индуктор) G

95 Регуляция экспрессии лактозного оперона E. coli Позитивная регуляция СAP - белок -активатор катаболизма (catabolite activator protein)

96 Регуляция экспрессии триптофанового оперона E. coli PR - фосфорибозил PRPP - фосфорибозилпирофосфат Cd. RP - карбоксифениламинодезоксирбулозофосфат In. GP - индолилглицеро- фосфат Репрессия триптофанового оперона Связывание комплекса trpрепрессор-Trp с оператором препятствует присоединению РНК-полимеразы к промотору

97 Аттенуация экспрессии триптофанового оперона

98 Аттенуация экспрессии триптофанового оперона

98. 5 Много Trp Мало Trp

99 Некоторые опероны, лидерные последовательности которых содержат многократно повторенные кодоны для аминокислот, регулирующих работу данного оперона

100 Временная регуляция генной экспрессии в жизненном цикле бактериофага l Кольцевая форма генома бактериофага l У бактериофага l, есть два альтернативных способа существования - литический и лизогенный. Форма вирусного генома интегрированная в хромосому клетки-хозяина называется профагом. Порядок экспресии генов при литическом пути

Литический или лизогенный путь развития? 101 Активируется белками c. II и с. III Операторные последовательности сайты связывания репрессора c. I и Cro антирепрессора Cro Связываясь с операторными сайтами c. I подавляет экспрессию с промоторов PL и PR, что делает предпочтительным лизогенный путь Лизогения поддерживается Переключение на литический путь зависит от антирепрессорных и активаторных свойств Cro Сrо, и с. I связываются со всеми субоператорными сегментами, но относительное сродство их к этим сегментам различно OL 1 PL OL 2 благодаря транскрипции небольших количеств c. I-м. РНК с промотора PRM Cro OL 3>OL 2>OLl OR 3>OR 2, OR 1 c. I наиболее прочно с ORl и OL 1 OL 3 Участок связывания РНК-полимеразы O R 3 PRM O R 2 O R 1 PR

104. 5 Регуляция экспрессии на посттранскрипционном уровне РНК ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ Dicer - эндонуклеаза специфичная к дц. РНК. Относится к семейству РНКаз III si. RNA (small interfering RNAs) малые интерферирующие РНК – короткие (21 -23 -nt) дц. РНК, которые характеризуются 2 нуклеотидными 3’-концевыми выступами. RISC (RNAi silencing complex) рибонуклеиновый комплекс. Включает не идентифицирванную нуклеазу Slicer.

Трансляционная регуляция экспрессии некоторых генных продуктов Бактериофаги Е. coli - MS 2, R 17 и Qb 102 ген А транслируется один раз - в момент синтеза 5'-конца РНК для рибосом доступен только инициаторный кодон AUG гена СР, соответствующие участки генов A, lys и rep находятся в двухцепочечных участках молекулы компонент зрелой вирусной частицы, необходим для адсорбции и проникновения образует вируса в клетку вирусный капсид По мере увеличения концентрации СР происходит его связывание с последовательностью, перекрывающей последовательность инициации трансляции гена rep. Это предотвращает синтез репликазы, но не препятствует образованию белков оболочки. Для трансляции Lys -кодирующей последовательности рибосома “неестественно” транслоцируется обеспечивают лизис инфицированных клеток и высвобождение вирусного потомства При трансляции СРкодирующей последовательности рибосомы разворачивают РНК и экспонируют инициаторный кодон AUG гена rep амплифицирует фаговую РНК для того, чтобы обеспечить высокий уровень трансляции фаговых генов и снабдить геномами фаговое потомство При нормальной инфекции СР присутствует в клетке в больших количествах, Rep и Lys - в значительно меньших, а А представлен только несколькими молекулами

103 Синтез белков аппарата трансляции Контроль по типу обратной связи, при котором продукт регулирует экспрессию собственного гена, называется аутогенной регуляцией

104 Синтез белков аппарата трансляции Свободная р. РНК регулирует синтез рибосомных белков