Калибровочный график.ppt
- Количество слайдов: 4
1 этап. Приготовление серии калибровочных растворов • Флакон с основным стандартным раствором глюкозы С = 25 ммоль/л • 5 пробирок со стандартными растворами различной концентрации
1. 1. Расчет калибровочных точек Объемы для получения разведений № [С] глюкозы в стандартном раствора Проверка расчета разведений V стандартн. раствора, мкл V дилюента мкл Общий V полученного раствора Содержание Глю в пробе 20 мкл (которая пойдет в анализ) [С] Глю в приготовленном стандартном растворе 1 5 ммоль/л 100 400 500 0, 0001 ммоль 5 ммоль/л 2 10 ммоль/л 100 150 250 0, 0002 ммоль 10 ммоль/л 3 15 ммоль/л 100 67 167 0, 000299 ммоль 14, 97 ммоль/л 4 20 ммоль/л 100 25 125 0, 0004 20 ммоль/л 5 25 ммоль/л 100 - - Проверка расчета разведения на примере 1 -й точки КК - [C] 5 ммоль/л: 1. 25 ммоль - 1000 мл X 1 - 0, 1 мл X 1 = 0, 0025 ммоль в 0, 1 мл 2. 0, 0025 ммоль - 0, 5 мл X 2 - 0, 02 мл X 2 = 0, 0001 в пробе 3. 0, 0001 ммоль - 0, 02 мл X 3 - 1000 мл X 3 = 5 ммоль в стандартном растворе
2 этап. Приготовление калибровочных точек для построения КК С стан V дилюента V пробы V реактива Бланк - - 20 мкл воды 2000 мкл (2 мл) 5 ммоль/л 100 400 20 мкл 2000 мкл (2 мл) 10 ммоль/л 100 150 20 мкл 2000 мкл (2 мл) 15 ммоль/л 100 67 20 мкл 2000 мкл (2 мл) 20 ммоль/л 100 25 20 мкл 2000 мкл (2 мл) 25 ммоль/л 100 - 20 мкл 2000 мкл (2 мл) E 1 E 2 E 3 Eсредняя
Итого 15 пробирок для 5 стандартных растворов по 3 параллели + 1 пробирка для холостой пробы Калибровочный фактор F= Сст/Eст
Калибровочный график.ppt