알레르기 진단을 위한 Uni CAP 검사 소개 이원의료재단

알레르기 진단을 위한 Uni. CAP 검사 소개 이원의료재단 학술부

- Uppsala, Sweden 1972: Phadebas® Ig. E Test 세계 최초 알레르기 in vitro test 1974: Phadebas RAST® 세계 최초 specific Ig. E test 1995: Uni. CAP® 100 완전 자동화된 specific Ig. E test 소개 l 전세계 50개국 4000개 이상의 검사실에서 사용. 10개 중 7 개의 알레르기 검사는 Uni. CAP으로 검사가 이루어 짐. l FDA 규정에 부합한 ISO 9001 인증 획득, GMP 기준 적합 인 증 l WHO가 인정한 유일한 specific Ig. E 정량 검사법

Uni. CAP® 100 / Pharmacia CAP System™ FEIA ü 시약 분주에서 정보처리까지 전과정 자 동화 ü 3시간 이내 결과 자동 프린트 • 처리시간: 2시간 45분 / run • 처리속도: 48 tests / run • Sample volume: 40 µl/test • Method: 4가지 서로 다른 test를 동시 가능 - Quantitative Ig. E blood test

검사 항목 <Immunoglobulin E> 1. Uni. CAP Specific Ig. E는 특정 항원에 대한 알레르기 감작 반응의 결과로 혈액에 생성되며 항원에 노출될수록 증가. 사람의 혈청에 존재하는 특이 항원에 관한 Ig. E 항체 profile을 조사함으로써 환자의 알레 르기를 일으키는 원인물질 규명 - 진단 : 최선의 치료를 위해 환자의 알레르기를 유발하는 항원 수치 측정 - 예측 : 증상의 유무와 관계없이 Ig. E 수치로 알레르기 발병 예측 가능 - 모니터링 : 현재 적절한 치료를 받고 있는지 환자 상태 모니터링 2. Uni. CAP Total Ig. E : 사람의 혈청 내에 존재하는 총 Ig. E 농도 측정 - 인체에 순환하는 총 Ig. E 농도는 대개 알레르기와 연관되어 있음 - 환자의 아토피 상태에 대한 개요 제공

Solid phase: Immuno. CAP™ Immuno. CAP Solid phase 1 150 Tube passive coating 5 50 Paper disc activated Cellulose foam activated • 3 -dimensional cellulose polymer • Covalent coupling through CNBr-activation L. Sevéus & A. Sandell, 1992

Calibration 17000 15300 Response (RU) 13600 WHO Reference Uni. CAP® § WHO Standard CAP은 Human serum Ig. E의 75/502 11900 WHO Standard에 대하여 보정된 표준화 10200 된 8500 정량적 결과 제공 6800 5100 § Ig. E 측정 단위 1 U = 2. 42 ng 3400 1700 0 0. 35 0. 7 3. 5 17. 5 50 100 Ig. E (k. U/L) U. Bohman, 1998

Quantitation gives additional information Increased concentration of Ig. E antibodies = Increased probability of clinical symptoms k. UA/L 0. 35 0. 7 3. 5 17. 5 50. 0 100 >100 Increasing concentration of specific Ig. E antibodies 7

Immuno. CAP의 측정 원리 - 환자의 혈액 내 Ig. E와 Immuno. CAP의 allergen이 반응 Immuno. CAP의 cellulose foam에 Allergen 성분이 코팅 혈청중의 Ig. E가 Allergen과 결합, Conjugate 첨가 시 Enzyme Anti-Ig. E가 Ig. E와 결합 Fluorogenic Substrate와 Enzyme이 반응하여 형광물질 형성, 형광 Response값 측정 후 Standard curve로 농도를 계산 U. Bohman, 1998

Reproducibility of Uni. CAP® results during one year Evaluation of Uni. CAP 100 for in vitro Allergy Diagnosis 12 10 k. UA/L 8 6 4 2 d 1 0 1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 d 2 45 e 1 49 53 e 5 57 Assay run number Result plots of Ig. E antibodies to d 1, d 2, e 1 and e 5 obtained during one year comprising 60 Uni. CAP 100 assay runs. 9 Reference: Liappis N et al. , Clin Lab 1999; 45: 229 -235

Retesting sera from 1987 with Uni. CAP 100 in 1995 R =0. 96 PW Ewan k. U Uni. CAP A /L 1995 y = 0. 32 + 1. 12 x 100 10 1 . 1 1 10 Pharmacia CAP System k. UA/L 100 1987 Correlation of concentrations of allergen-specific Ig. E measured in Pharmacia CAP System in 1987 and in Uni. CAP in 1995 by retesting of the same serum samples after storage at -20 °C Paganelli R et al. Specific Ig. E antibodies in the diagnosis of atopic disease. Clinical evaluation of a new in vitro test system, Uni. CAP®, in six European clinics. Allergy 1998; 53: 763 -768

The conventional way to present clinical validity Sensitivity Specificity Dr’s conclusion Positive Negative Total 89% 91% Uni. CAP® Specific Positive Negative 1121 144 360 3545 1481 3689 Ig. E Total 1265 3905 5170 The clinical performance of Uni. CAP Specific Ig. E was documented in clinical trials in six countries, Italy, Spain, Germany, The Netherlands, Sweden and Great Britain, on 894 patients with unspected allergy. Clinical sensitivity and sensitivity were calculated as agreement between the test result and a specialist diagnosis based on the established diagnostic routines of the clinic. 11 Paganelli R et al. , Allergy 1998; 53: 763 -8

Probability for clinical symptoms Doctor’s conclusion of allergy vs. Ig. E antibody value 100 90 80 Probability 70 60 50 Mite Cat Dog 40 30 20 10 0 0. 35 0. 7 3. 5 17. 5 Ig. E antibody concentration (k. UA/L) 12 Adapted from Paganelli R et al. , Allergy 1998; 53: 763 -8 by Ahlstedt S, Clin Exp Allergy 2002; 32: 11 -16 50 100

Levels of Ig. E antibodies - as suggested decision levels for challenge 95% Probability of positive reaction 50. 0 Egg 40. 0 Milk 20. 0 k. UA/L 20. 0 15. 0 6. 0 5. 0 1. 0 0. 6 0. 35 Neg Fish 32. 0 30. 0 10. 0 Peanut 1. 0 0. 6 Egg Milk Fish 90% Probability of negative reaction Children with severe atopic dermatitis, mean age 5. 2 years, median tot Ig. E 3000 k. U/L 13 Reference: Calculated from Sampson and Ho, J Allergy Clin Immunol 1997; 100: 444 -51

User List 1. 17. 마산삼성병원 33. 김해연합소아과 2. 서울대학병원 18. 훈과윤소아과 34. 영남대병원 3. 신촌세브란스병원 19. 부천성가병원 35. 분당서울대병원 4. 중대용산병원 20. 동아대병원 36. 대전을지병원 5. 인천길병원 21. 광주보훈병원 37. 단국대천안병원 6. 경북대병원 22. 메리놀병원 38. 일신기독병원 7. 성분도병원 23. 소화아동병원 39. 우리들내과 8. 서울아산병원 24. 전북대병원 40. 노원을지병원 9. 강남성심병원 25. 전남대병원 41. 경희의료원 10. 인하대병원 26. 일산백병원 42. 상계백병원 11. 강남성모병원 27. 강릉동인병원 43. 엠디그린소아과 12. 강남차병원 28. 고대안암병원 44. 고대안산병원 13. 충북대병원 29. 대구파티마병원 45. 일산의료보험공단 14. 충남대병원 30. 서울순천향대병원 46. 구미순천향병원 15. 이대목동병원 31. 부천순천향대병원 47. 광주기독병원 16. 14 삼성서울병원 아주대병원 32. 원주기독병원 48. 삼성제일병원…