达科为科研仪器部培训 广州办：曹忠健 2015 -05 -12 2015/05/12
• 转染仪：Lonza Amaxa Nucleofector™ • 计数仪：Nexcelom Cellometer 2015/05/12
Nucleofection®细胞核转染技术 一、Nucleofector 细胞核转染技术基本 作原理 Amaxa公司的Nucleofector细胞核转染技术是 ▪ 非病毒介导的转染， ▪ 仪器采用独特的电转参数（包括电流、电压、电击时间长短等） 以内存的优化转染程序名体现， ▪ 同时该技术的核心专利是细胞类型特异性的细胞核转染液，即针 对不同的原代细胞和传代细胞有各自特异的细胞类型特异性转染 液，为外源基因进入细胞核提供友好界面。结合优化转染程序和 细胞类型特异性转染液进行的转染能确保目的基因转入细胞核的 效率。 ▪ 该技术直接將外源基因送到細胞核內，因此转染效率不再依赖细 胞分裂，可以高效转染分裂增殖较慢甚至于不分裂的细胞。 2015/05/12
二、Nucleofector 细胞核转染技术的组成 1. Nucleofector Solution转染液 Nucleofector核转染试剂盒成分： a，细胞特异性细胞核转染液； b，电转杯； c，专用细胞转移tips； d，专利的pmax. GFP报告质粒 2. Nucleofector Device转染仪 2018/3/19
Nucleofector™ • • 4 D-Nucleofector™ System Nucleofector™ 2 b Device 96 -well Shuttle™ System HT Nucleofector™ System 2015/05/12
2018/3/19
网络查询 Lonza最主要的两个数据库： • Cell & Transfection Database • Nucleofection™ Protocols http: //www. lonza. com/products-services/bio-research. aspx 2015/05/12
• Cell & Transfection Database 2015/05/12
举例： 293，右图 1. 介绍了细胞的来源和相关 信息 2. 转染信息里介绍了两款仪 器各自所需的protocol和 program Nucleofector™ 是指2 B 4 D-Nucleofector™ X Unit属 于4 D高级平台 2015/05/12
2018/3/19
根据仪器的款式找出它对应的protocol， 每一个protocol都有提供该细胞相对应试剂盒 的货号，按照货号大家都可以在达科为生物 商城上查到相关信息。 2015/05/12
Nexcelom Cellometer 2003 2005 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2003 CP 2, disposable Hemacytometer 2005 Auto T 4, automated cell counter offering trypan blue viability 2008 Vision, dual fluorescence imaging 2009 Auto X 4, single fluorescence, user-changeable optics modules 2010 Vision HSL, high sensitivity, dual fluorescence, user-changeable optics modules 2011 Auto 2000, dual fluorescence, on-board computer & touch screen 2011 Vision CBA, FCS Express 4 software, high sensitivity, dual fluorescence, user-changeable optics modules 2013 Auto 1000, All-in-one, touch-screen instrument for accurate, automated trypan blue viability 2013 Mini, most affordable option for accurate, automated cell counting and trypan blue viability 2013 X 1/X 2, 10 X lens and affordable single/dual fluorescence imaging, FCS Express 4 software 2013 K 2, , FCS Express 4 software, affordable dual fluorescence imaging 2015/05/12
Nexcelom Cellometer 细胞计数仪 三大类： 1. 明场细胞计数仪 2. 双荧光细胞活力分析仪 3. 细胞成像分析系统 2015/05/12
明场细胞计数仪 • Mini 外形小巧轻便、节省空间、性价 比高 • Auto T 4 强大的软件功能，能自动排 除细胞碎片、区分成团的细胞 • Auto 1000 一体化设计，内置 10寸触 摸屏显示系统，直观易于操作 2015/05/12
明场客户群 • 干净的细胞 • 细胞系: cancer cells, endothelial cells, etc. • 原代细胞(ie. isolated T cells) 2015/05/12
双荧光细胞活力分析仪 Auto 2000 （明星产品） • 利用AO、PI染色能对背景复杂的原代进行精确的浓度计数 与活力分析 • 淋巴细胞、PBMC、干细胞等都可以做精确分析 • 双荧光细胞精确计算有核细胞转染效率及存活率， 20µl样 品，30秒能完成一个实验 2015/05/12
应用领域 • 免疫学及疫苗研发 PBMCs, Splenocytes • 细胞治疗及再生医学 Stem Cells • 器官移植 Nucleated Cells • 转化医学(临床研究，动物及人体实验) Primary Cells, PBMCs • 肿瘤研究 Tumor Cell Suspensions, Cell Lines 2015/05/12 NEXCELOM CONFIDENTIAL
细胞成像分析系统 • Auto X 4, X 1 & X 2 专为酵 母细胞、血小板、藻类及 其他的小细胞计数和活性 检测 • K 2 肝脏细胞、干细胞、 脾脏细胞、悬浮肿瘤细胞 等原代细胞的计数、活力 分析及其他的细胞功能分 析 2015/05/12
• Vision CBA 适用于基于细胞的分析：凋亡、 细胞周期、转染、细胞自噬、ABC转运蛋白 分析 2015/05/12
类流式分析 The Vision CBA 分析系统不仅得到细胞图像，而 且配合 FCS Express 4 流式软件对细胞进行分析 • • Apoptosis Cell Cycle GFP, RFP, YFP Transfection Immunophenotyping Transporter Assays Mitochondrial Potential Autophagy Aggresome Detection …and More 2015/05/12
Vision CBA 特殊应用 肝原代细胞，脂肪细胞，干细胞等其它原代细胞分析 • Cellometer Vision 受 10大制药企业xinlai 并用于对肝原代细胞的毒理学研究 • Cellometer Vision 可精确计数脂肪细胞 等大型细胞 2015/05/12
Celigo® Imaging Cytometry 全视野细胞筛选分析仪 独特关系成像技术，通过明场和三个独立的荧光通道，对常规细胞培养 板进行全孔以及整板细胞成像分析，无需消化，任意时间点，多时间位 点分析细胞。快速生成整板细胞图像和统计数据。数据简单，结果一目 了然！ 2015/05/12
2015/05/12
Скачать презентацию 达科为科研仪器部培训 广州办 曹忠健 2015 -05 -12 2015 05 12
3f969d84971813e358d217db522ecd04.ppt