Занятие 2 Тема 2. МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ. СТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ

Занятие 2 Тема 2. МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ. СТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ

СТРУКТУРА БАКТЕРИЙ

Бактериальная клетка состоит из • оболочки или клеточной стенки, • цитоплазматической мембраны • цитоплазмы • нуклеоида • Включений • У отдельных видов бактерий жгутики (органы движения), • пили (реснички, фимбрии), • капсулы, • споры.

Основные формы и размеры бактерий ФОРМЫ 1. Цилиндрическая (варианты – палочковидная, нитевидная, извитая) 2. Сферическая (круглая, кокки) РАЗМЕРЫ БАКТЕРИЙ ИЗМЕРЯЮТСЯ В МИКРОМЕТРАХ (1 мкм = 10 -3 мм). СТРУКТУРЫ БАКТЕРИИ ИЗМЕРЯЮТСЯ В НАНОМЕТРАХ (НМ= 10 -6 мм)

УЛЬТРАСТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ (продолжение)

Характеристика оболочки бактерий Свойства Гр(+) Гр(-) Толщина 20 -60 нм 10 -20 нм Липиды 1 -1. 6% 2 -22, 6% Пептидогликан 40 -90% 5 -10% Тейхоевые кислоты ++ —

СТРУКТУРА Грам(+) и Грам (-) бактерий

СХЕМА СТРОЕНИЯ ОБОЛОЧЕК БАКТЕРИЙ

Функции клеточной стенки (оболочки) бактерий • Формообразующая • Защита от внешних воздействий • Защита от внутреннего давления клетки • Обеспечение диффузии веществ

СВОЙСТВА КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ (ОБОЛОЧКИ) БАКТЕРИЙ • Ригидность • Растяжимость • Эластичность • Полупроницаемость • Многослойность • Волокнистая структура

Этапы приготовления мазка: Препараты готовят на предметных стеклах, !. Обезжиривание стекла. 2. Бактериальную петлю стерилизуют в пламени горелки. Берут микробную массу, равномерно эмульгируя ее в капле воды в виде кружка диаметром около 1 см. 3. Высушенный мазок в целях умерщвления микробных клеток и прикрепления их к стеклу 4. фиксируют мазок. 5. Окраска препарата простым способом : на мазок при помощи пипетки наносят 2 -3 капли растворов водного фуксина (1 -2 мин. ), метиленового синего (3 -5 мин. ) или иного красителя. По окончании окрашивания мазок промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют Сложные методы окраски Метод Грама и др.

Техника окраски по Граму. • карболовый генциан-виолет – 1 — 2 мин. (на полоски фильтровальной бумаги, пропитанные раствором генциан-виолета и высушенные, наносят несколько капель воды); • краску сливают, не промывая водой, наносят раствор Люголя на 1 мин. • раствор Люголя сливают, обрабатывают препарат спиртом в течение 30 сек. , слегка покачивая мазок немедленно промывают мазок водой; • докрашивают препарат водным фуксином в течение 1 — 2 мин; • мазок промывают, высушивают, микроскопируют. Зарисовывают

Escherichia coli Грам —

Staphylococcus aureus Грам +

Строение цитоплазматической мембраны бактерий 1. 3 слоя (2 слоя липидов, один слой белка); 2. незамкнутые постоянные и временные (мезозомы) структуры

Функции цитоплазматической мембраны бактерий 1. Т ранспортная (селективная проницаемость и транспорт веществ в бактерию) 2. Энергетическая (перенос электронов и окислительные реакции у анаэробов) – аналог митохондрий 3. Пластическая (биосинтез белка, биополимеров оболочки, цитоплазматической мембраны, цитоплазмы) 4. Информационная (биосинтез ДНК)

Цитоплазма бактерий Коллоидная система, содержащая: • аналог ядра ( нуклеоид — ДНК) • РНК • различные биополимеры • рибосомы • включения органических и минеральных веществ • вакуоли

ХАРАКТЕРИСТИКА НУКЛЕОИДА БАКТЕРИЙ 1. Кольцевидная структура 2. Отсутствие классических хромосом 3. Отсутствие ядрышка 4. Отсутствие оболочек 5. Неподвижность

Электронограмма бактерии

Изучение нуклеоида • Электронная микроскопия • Окраска по методу Романовского-Гимзы. Краситель Романовского-Гимзы состоит из азура (продукта окисления метиленового синего) и эозина. • При микроскопии после окраски ядра клеток красно-фиолетового цвета, цитоплазма – голубого. • Метод Романовского-Гимзы используется для окраски спирохет, простейших, риккетсий.

Капсула • состоит из полисахаридов, . • У некоторых патогенных бактерий (пневмококк, сибиреязвенная палочка) капсула образуется исключительно в организме животного или человека, • тогда как у других видов бактерий (например, клебсиеллы) капсулообразование наблюдается при культивировании на питательных средах. • Капсула защищает бактерию от действия неблагоприятных воздействий факторов иммунитета. . • Метод выявления метод Гинса-Бурри

включения • включения органической и минеральной природы (включения волютина, фосфатов, серы, липидов и т. д. ), • выполняющие функции резервных веществ. • Зерна волютина являются запасными питательными веществами (полифосфаты) • для бактерий (дифтерийная палочка)могут быть дифференциально-диагностическим признаком. • Для выявления зерен волютина применяют метод окраски по Нейссеру.

Возбудитель дифтерии • Corynebacterium diphtheridae дифтерийная палочка зерна волютина Окраска по Нейссеру.

кислотоустойчивые бактерии • Бактерии, содержащие большое количество липидов, например, микобактерии туберкулеза ( Mycobacteriumtuberculosis ), имеют устойчивость к кислотам

кислотоустойчивые бактерии • Окраска кислотоустойчивых бактерий (возбудитель туберкулеза – Mycobacteriumtuberculosis ). Окраска по Цилю-Нильсену • Для их окраски применяют концентрированные спиртовые растворы красителей, содержащие протравы (фенол), проводя окрашивание при подогревании. • На голубоватом фоне препарата видны микобактерии, окрашенные в рубиново-красный цвет.

Mycobacterium tuberculosis

Споры. • Некоторые виды палочковидных бактерий в неблагоприятных условиях образуют споры. • Спорообразующие палочковидные бактерии называют бациллами или клостридиями, а неспорообразующие — бактериями. • Из патогенных бактерий спорообразующими являются сибиреязвен ная палочка, возбудители столбняка, газовой гангрены, ботулизма.

Функция спор • Спорообразование обеспечивает сохранение вида в неблагоприятных условиях

Устойчивость спор • От вегетативной формы спора отличается меньшим содержанием воды и плотной, многослойной оболочкой, содержащей липиды, • наличием особого вещества – дипиколината кальция , • Это обеспечивает высокую устойчивость спор к действию неблагоприятных факторов, в том числе, высыханию, повышенной или пониженной температуре и проч. в течение длительного промежутка времени.

Спора, образующаяся внутри цитоплазмы бактериальной клетки • может иметь круглую или овальную форму • , располагаясь в центре (центрально ), на конце (терминально ) или ближе к одному из концов ( субтерминально) • Форма, величина и расположение споры являются характерной особенностью вида бактерий.

Центральное, субтерминальное и терминальное расположение спор

Окраска спор • Окраска спор Bacillus cereus. • Окраска модифицированным методом Ауески. Выполняется окраска по методу Циля-Нильсена, однако обесцвечивание проводится 0, 5% HCl. . • Вегетативные клетки бактерий окрашиваются в голубой цвет, споры — в ярко-малиновый