Возбудители брюшного тифа и паратифов Семейство Enterobacteriaceae Род Salmonella Большинство сероваров рода Salmonella относятся к виду S. enterica Возбудитель брюшного тифа Salmonella typhi (Salmonella enterica серовар Typhi). Возбудители паратифов серовары: Salmonella paratyphi A, S. paratyphi B, S. paratyphi C
Salmonella typhi (Salmonella enterica serovar Typhi) • Salmonella – грамотрицательные неспорообразующие палочки с закругленными концами, подвижны (перитрихи).
q Факультативные анаэробы q На среде Эндо – бесцветные лактозонегативные колонии q Селективные среды- среда Плоскирева, сальмонеллашигелла агар и др. q Основные признаки принадлежности роду Salmonella: Ø Ферментация глюкозы с образованием кислоты и газа (кроме S. typhi) Ø Не ферментируют лактозу Ø Продуцируют сероводород (кроме S. paratyphi A) Ø Подвижны и др. Рост на среде Эндо Рост на висмут-сульфит агаре (черный цвет колоний – результат продукции сероводорода
Антигенная структура. Классификация по Кауфману-Уайту • О-антиген – термостабильный ЛПС наружной мембраны; по его специфичности выделяют серогруппы • Н-антиген – термолабильный жгутиковый белок флагеллин, может существовать в двух фазах; по его специфичности выделяют серовары • Vi-антиген - капсульныи полисахарид, защищающий сальмонеллы от фагоцитоза и комплемента.
Антигенная структура. Классификация по Кауфману-Уайту Идентифик Группа ация абсорбиров анной Оантисыворо ткой Наименование Соматиче ский (О) Антиген Жгутико вый (H) антиген Фаза 1 Жгутиков ый (H) антиген Фаза 2 О 2 A S. paratyphi A 1, 2, 12 a - О 4 B S. paratyphi B 1, 4, 5, 12 b 1, 2 О 7 C 1 S. Paratyphi C 6, 7, Vi C 1, 5 О 9 D S. typhi S. enteritidis S. dublin S. panama 9, 12, Vi 1, 9, 12 d g, m g, p iv 1, 5
Vi-антиген q. Наиболее важными в идентификации возбудителя брюшного тифа и паратифа С являются идентификация Vi-антигена. Однако содержание этого антигена в культурах S. Typhi и S. Paratyphi C может варьировать. q. Соответственно количеству его в культурах, в частности S. Typhi, последние можно подразделить на три группы: ØV-форма - содержит Vi-антиген в большом количестве и является О-инагглютинабельной; ØW-форма - не имеет Vi-антигена и является О-агглютинабельной; ØVW-форма - промежуточная, она содержит Vi-антиген и тем не менее является О-агглютинабельной. q. Большинство штаммов S. Typhi содержит Vi-антиген, особенно развит он в свежевыделенных штаммах и культурах, выращиваемых при 37 град. С.
Факторы патогенности • Фимбрии и белки наружной мембраны – факторы адгезии; • Белки системы секреции 3 типа (ТТSS) • Эндотоксин (ЛПС); • Антифагоцитарный фактор - Vi антиген • Тифоидный токсин А 2 В 5
Тифоидный токсин A 2 B 5 Субъединицы В Субъединицы А Plt. A (pertussis-like toxin A) АДФ-рибозил трансфераза, гомолог субъединицы А коклюшного токсина Cdt. B CDT (cytolethal distending toxin, цитотоксичный расширяющий токсин) ДНКаза Plt. В (pertussis-like toxin В) Является гомологом одного из компонентов Bсубъединицы токсина коклюша, участвует в проникновении токсина в клетку
Plt. A, Plt. B, и Cdt. B кодируются генами в составе одного оперона. S. Typhi продуцирует токсин только в клетках млекопитающих. Клиническая симптоматика проявляется только у человека. Узкий тропизм обеспечивает взаимодействие гликан-связывающего домена Plt. B субъединицы со специфическими гликанами: у клеток человека конечное положение в углеводной цепочке гликопротеинов занимает N-ацетилнейраминовая кислота, что во многом определяет свойства данного гликопротеина, тогда как у приматов и других млекопитающих - N-гликолилнейраминовая кислота. • Механизм действия идентичен соответствующим экзотоксинам: Plt. A катализирует присоединение АДФ-рибозы к субъединицам G-белков, что приводит к их конформационной перестройке, и как следствие - активации аденилатциклазы и нарушению водно-солевого обмена; Cdt. B инициирует повреждение ДНК, нарушение клеточного цикла и апоптоз. • Обе субъединицы с различными биохимическими активностями работают только в комплексе - Cdt. B/Plt. A/Plt. B –единый тифоидный токсин • •
I Интернализация S. Typhi II Сальмонелла продуцирует токсин, только находясь в вакуоли внутри клетки III Комплекс Cdt. B/Plt. A/Plt. B распознается клеточными механизмами (? ) и упаковывается в переносчик-транспортер IV Комплекс секретируется во внеклеточное пространство, где распознает(ся) рецепторами неинфицированных клеток (в том числе иммунокомпетентных) и индуцирует повреждение ДНК V Инфицированные клетки не экспрессируют рецептор для токсина и выступают убежищем для бактерий
Патогенез брюшного тифа • После попадания в ЖКТ часть сальмонелл погибает в кислом содержимом желудка; часть попадает в тонкий кишечник • После адгезии сальмонелла захватывается Мклеткой и транспортируется в подслизистую в лимфоидные клетки (Пейеровы бляшки) • Благодаря антифагоцитарным факторам сальмонелла размножается в лимфоцитах и попадает в лимфоток, далее в кровоток; = Инкубационный период • В крови часть сальмонелл будет разрушена (факторы естественной резистентности) и высвободится эндотоксин = Начало заболевания
• После интернализации сальмонелла образует внутриклеточную нишу – модифицированную фагосому (сальмонеллу содержащая вакуоль, Salmonella containing vacuole (SCV).
СИСТЕМА ТТSS И ГИБЕЛЬ КЛЕТОК
• Nuclear responses induced by Salmonella effectors. Some of the effects of Salmonella T 3 SS effectors on host signal transduction pathways, leading to induction or inhibition of host immune responses, are depicted.
Патогенез брюшного тифа • Оставшиеся сальмонеллы проникают в органы ретикуло-эндотелиальной системы, где клеточный иммунный ответ приведет к развитию гранулем; • В печени сальмонеллы по желчным протокам достигают желчного пузыря, где активно размножаются (и могут сохраняться годами); • С порциями желчи сальмонеллы вновь попадают в тонкий кишечник, но взаимодействуют уже с сенсибилизированной слизистой; • Результатом станет гибель энтероцитов и изъязвление слизистой; • В течение примерно 3 недель язвы зарубцовываются, и наступает выздоровление; • Возможные осложнения – перфорация кишечника, кишечное кровотечение, метастатические абсцессы.
Механизм развития воспалительной диареи при сальмонеллезе
Циркуляция сальмонелл в организме человека. 1 - тонкий кишечник; 2 - групповые лимфатические фолликулы; 3 - кровеносные сосуды; 4 - желчный пузырь
Сальмонеллы проникают через слизистый слой
Клинические симптомы v инкубационный период – 7 -14 дней v Постепенный подъем температуры до 40 °, гастроэнтерит, папулезно-пятнистая сыпь, брадикардия, головная боль; v Спутанное сознание; v Гепатоспленомегалия
Эпидемиология • Источник инфекции – больной или бактерионоситель (антропоноз в отличие от остальных сальмонеллезов) • Путь передачи – фекально-оральный • Основную роль играет фекальное загрязнение источников водоснабжения • Случаи заболевания брюшным тифом наблюдаются в течение всего года, но пик заболеваемости приходится на конец весны - лето
Лабораторная диагностика Неделя заболевания Материал Метод исследования 1 -я неделя кровь Бактериологический (гемокультура) 2 -я неделя А) моча Бактериологический (копрокультура, уринокультура) Конец 2 -ой недели Б) сыворотка Серологические методы 3 -я неделя Бактериологический (копрокультура, уринокультура) А) Испражнения, моча Б) сыворотка Серологические методы
Показания к проведению бактериологической диагностики Показанием к проведению бактериологического исследования биологического материала на наличие возбудителей брюшного тифа и паратифов A, B и C является необходимость обследования: 4. 1) больных с подозрением на тифопаратифозное заболевание, а также с лихорадкой неясной этиологии, продолжающейся 5 и более дней; 4. 2) лиц, общавшихся с больными брюшным тифом и паратифами A, B, C; 4. 3) работников отдельных профессий, производств и организаций при поступлении на работу и по эпидемиологическим показаниям; 4. 4) лиц перед поступлением в стационары и специализированные санатории по клиническим и эпидемиологическим показаниям; 4. 5) лиц при оформлении на стационарное лечение в больницы (отделения) психоневрологического (психосоматического) профиля, дома престарелых, интернаты для лиц с хроническими психическими заболеваниями и поражениями ЦНС, в другие типы закрытых учреждений с круглосуточным пребыванием; 4. 6) больных брюшным тифом и паратифами после исчезновения клинических симптомов перенесенного заболевания перед выпиской из стационара; 4. 7) лиц, переболевших брюшным тифом и паратифами, во время диспансерного наблюдения; 4. 8) хронических бактерионосителей, выявленных среди работников отдельных профессий, производств и организаций, при повторном поступлении на работу на указанные предприятия и объекты; 4. 9) секционного материала при подозрении на заболевание брюшным тифом и паратифами.
Материалом для бактериологического исследования с целью диагностики брюшного тифа и паратифов являются: Ø кровь; Ø испражнения; Ø моча; Ø желчь (дуоденальное содержимое). Возбудители могут быть также выделены из: Ø розеол; Ø костного мозга; Ø грудного молока. Материалом для бактериологического исследования с целью выявления бактерионосителей согласно СП 3. 1. 1. 2137 -06 являются: Ø испражнения; Ø моча; Ø желчь (дуоденальное содержимое).
Бактериологический метод Предварительный этап. Посев 5 мл крови в желчный бульон 1 этап: Пересев с жидкой среды на среды Эндо, Плоскирева и др. 2 этап: v Макро- и микроскопическое изучение колоний; v отбор подозрительной колонии в реакции агглютинации на стекле с адсорбированной поливалентной сальмонеллезной сывороткой(содержит антитела к Оантигенам 2, 4 и др. маркеры серогрупп); v пересев колоний, давших положительную реакцию, на среды Ресселя или Клиглера.
Среда Клиглера
3 этап: Идентификация по совокупности свойств: q 1) культуральных, q 2) морфологических, q 3) тинкториальных; q 4) биохимических по результатам роста на дифференциально-диагностических средах системы API-20 E; q 5) серологическая (антигенная) идентификация в реакциях агглютинации на стекле: Ø с адсорбированной сальмонеллезной поливалентной О-сывороткой; Ø с адсорбированными сальмонеллезными монорецепторными О-сыворотками для определения серогруппы; Ø с адсорбированными сальмонеллезными Н -сыворотками для определения серотипа; q 6) Определение чувствительности к типовым сальмонеллезным фагам – фаготипирование; q 7) Определение чувствительности к антибиотикам методом бумажных дисков
Бактериологический метод. Результаты р. агглютинации на стекле с сальмонеллезными О-сыворотками (a) О 9 (b) О 2 (c) О 4 (d) О 7 Вывод: Выделенная культура принадлежит роду Salmonella серогруппа D
Фаготипирование Фаготип Vi/D • Определение фаготипов проводят с помощью специфических сальмонеллезных бактериофагов, которых к настоящему времени известно более 100. • Установлено, что одни фаги лизируют сальмонеллы, содержащие О-антиген, другие (Vi-фаги) — только штаммы, содержащие Viантиген. • Фаготипы сальмонелл стабильны. • Метод фаготипирования сальмонелл используется в целях эпидемиологического анализа для выявления источника инфекции.
Н-Ат О-АТ q Первыми появляются антитела против О-антигена (О -антитела=Ig. M), они достаточно быстро исчезают, и на смену появляются антитела против Н-антигена (Н -антитела=Ig. G), которые сохраняются после выздоровления и обеспечивают иммунитет q Обнаружение антител против Vi-антигена означает бактерионосительство РНГА
Серологические методы Реакция Видаля q Развернутая реакция агглютинации q Ставится с 4 диагностикумами q Диагностический титр 1: 200 Компоненты Номера пробирок 1 Полученное разведение сыворотки 2 3 1: 100 1: 200 1: 400 4 1: 800 5 6 кс 1: 1600 1: 100 7 кд - О-диагностикум S. typhi 2 2 2 - 2 H-диагностикум S. typhi Диагностикум S. Paratyphi A Диагностикум S. Paratyphi В Положительная реакция Видаля только с Н-диагностикумом указывает либо на ранее перенесенное заболевание (анамнестическая реакция), либо появляется в результате вакцинации (прививочная реакция).
Серологические методы q. РНГА (определенные О- и Н-антигены сорбированы на поверхности эритроцитов=эритроцитарные диагностикумы) – более чувствительный, быстрый и специфичный метод обнаружения антител. q Диагностический титр – 1: 640
q Для ускоренного выявления возбудителей сальмонеллезов, включая брюшной тиф и паратифы, рекомендована реакция иммунофлюоресценции. q При необходимости может быть использован и непрямой метод РИФ. q С помощью РИФ возможна идентификация возбудителя только до уровня серологической группы.
Лечение Патогенетическое: v Антибиотикотерапия (ампициллин, цефалоспорины третьего поколения (цефотаксим и/или цефтазидим); Триметоприм- сульфаметоксазол (ко-тримоксазол) , фторхинолоны (ципрофлоксацин) v Лечебные фаги (сальмонеллезный бактериофаг) v Препараты для коррекции микрофлоры кишечника
Специфическая профилактика брюшного тифа ВОЗ рекомендованы две вакцины: Живая пероральная вакцина – содержит живые Salmonella typhi штамм Ty 21 a (сальмонеллы также доставляются в Пейеровы бляшки, но самоуничтожаются после 4 -5 деления) Инактивированная брюшнотифозная химическая вакцина для в/мышечного введения (содержит О-антиген и Viантиген) Специфической профилактики паратифов нет. Вакцина брюшнотифозная Ви - полисахаридная жидкая (ВИАНВАК) представляет собой раствор капсульного полисахарида, извлеченного из супернатанта культуры Salmonella typhi, очищенного ферментативными и физико - химическими методами; консервант — фенол Введение вакцины приводит к быстрому интенсивному нарастанию в крови вакциниро ванных специфических Ви - антител, обеспечивающих через 1 -2 недели невосприимчивость к инфекции, которая сохраняется в течение трех лет.
Скачать презентацию Возбудители брюшного тифа и паратифов Семейство Enterobacteriaceae Род
typhus.ppt