Возбудитель дифтерии Corynebacterium diphtheriae СПбГУ 2015 План лекции
Возбудитель дифтерии Corynebacterium diphtheriae СПбГУ 2015
План лекции 1. Дифтерия. Очаги поражения. 2. Контакт с токсигенными и атоксигенными штаммами C. diphtheriae 3. Причины возникновения эпидемии дифтерии 4. Необходимость вакцинации и ревакцинации 5. Общая характеристика рода Corynebacterium 6. Таксономия, морфология C. diphtheriae 7. Биохимические свойства, АГ структура 8. Основной фактор патогенности 9. Лабораторная диагностика 10. Чувствительность к АМП
Дифтерия (от греч. diphtheria – кожа, пленка) Дифтерия – антропонозное инфекционное заболевание, характеризующееся синдромом общей интоксикации с преимущественным поражением сердечно-сосудистой и кортико-адреналовой систем, периферических нервов, а также развитием фибринозного воспаления во входных воротах инфекции.
История Возбудитель дифтерии был открыт в 1883 г. Э. Клебсом в срезах дифтерийных пленок. В 1884 г. Ф. Леффлер выделил его в чистой культуре. В 1888 г. Э. Ру и А. Йерсен получили дифтерийный токсин 1895 г. Э. Беринг и Э. Ру независимо друг от друга получили противодифтерийную сыворотку, которую впервые для лечения дифтерии применил в 1897 г. П. Эрлих В России Г.Н. Габричевский применил противодифтерийную сыворотку с лечебной целью и организовал ее производство
Таксономия рода Corynebacterium Семейство – Corynebacteriaceae Род – Corynebacterium C. diphtheriae - типовой вид C. ulcerans – мастит КРС, люди C. pseudotuberculosis – абсцессы Ж и Ч C. striatum – нормальная микрофлора ротовой полости человека, глотка, зубные бляшки, мастит КРС C. minutissimum – комменсалы C. xerosis – нормальная микрофлора слезного канала человека, эндокардит, пневмонии, конъюнктивит C. pseudodiphtheriticum (палочка Хофманна) – непатогенный вид
Общая характеристика рода Corynebacterium Гр+ палочки, неподвижные, бесспоровые факультативные анаэробы, каталаза+ особое химическое строение клеточной стенки: короткие цепи (22-36 атомов С) миколовых кислот и мезо-диаминопимелиновая кислота
Морфология C. diphtheriae Гр(+) полиморфные палочки (ветвистые, раздутые), длина 1 - 8 мкм. Нет капсулы, спор и жгутиков Характерное расположение клеток в мазках в виде китайских иероглифов (X, V, Y)
Характеристика C. diphtheriae
Волютиновые зерна в клетках C. diphtheriae Окраска метиленовым синим
Биохимические свойства C. diphtheriae редукция нитратов, цистеиназная активность (+) (проба Пизу), уреазная активность (-) (проба Закса), ферментация углеводов: (глюкоза (+), сахароза (-), крахмал (+).
АГ структура C. diphtheriae На основании строения О-АГ и К-АГ различают 11 сероваров Склонность к спонтанной агглютинации
Культуральные свойства C. diphtheriae Факультативные анаэробы - O/F тест +/+. Не выносят низкой температуры – транспортировать нужно с подогревом!!! Опт. температура 37ºС, рН 7,4-8,0. Нуждается в 150-180 мг% аминного азота. Требуется добавка нативного белка около 10-15% дефибринированной крови. В ЖПС при 60ºС гибель за 10 мин, долго сохраняется в высушенном состоянии (слюна, пыль), Выдерживает 98ºС 1 час, Дез. средства 3-5% - гибель 20-30 мин.
Питательные среды для C. diphtheriae 1. Кровяно-теллуритовый агар (K2TeO3 – соль теллурита калия 0,02-0,04% ) 2.Хинозольная среда Бучина 3. Цистин-теллуритовый агар Тинсдаля
Колонии C. diphtheriae на кровяно-теллуритовом агаре
C. diphtheriae на цистин-теллуритовом агаре Тинсдаля
Биотипы (biotype) = биовары C.diphtheriae на шоколадно-теллуритовом агаре gravis mitis
Биотипы C. diphtheriae на кровяно-теллуритовом агаре gravis -крупные, серые, сухие, крошащиеся, шероховатые с радиальной исчерченностью колонии. Через 24 час клетки в препаратах – короткие, полиморфные палочки, с небольшим количеством волютина. Ферментируют крахмал. Вызывают заболевание в крайне тяжелой форме. mitis- черные, круглые, выпуклые колонии. В препаратах длинные изогнутые палочки с большим количеством волютина. Не ферментируют крахмал. Вызывают заболевание в легкой форме.
Дифтерийный экзотоксин Генетическая информация (ген tox+) о продуцировании экзотоксина клетками C. diphtheriae закодирована в геноме умеренного бактериофага Всего у C. diphtheriae - 11 умеренных фагов, Из них 5 фагов содержат ген tox+ «молчащие» гены
Умеренный бактериофаг C. diphtheriae
Основной фактор патогенности C. diphtheriae Дифтерийный экзотоксин (цитотоксическое действие на клетки сердца, почек, нервной системы) Белок ~ 61 кДа препятствует включению метионина в пептидную цепочку Нарушение белоксинтезирующих функций клеток
Дифтерийный экзотоксин
Пути передачи инфекции Воздушно-капельный Контактный (предметы быта) На месте внедрения возбудителя – воспалительный процесс
Токсигенные и атоксигенные штаммы C. diphtheriae Токсигенные C. diphtheriae вызывают дифтерию Атоксигенные C. diphtheriae вызывают назофарингит и эндокардит
Очаги поражения при дифтерии В зависимости от локализации различают дифтерию: зева носа гортани глаза уха половых органов кожи ран
При контакте человека с клетками C. diphtheriae может возникнуть 3 состояния: Носительство Субтоксическая форма заболевания (легкая) Токсическая форма заболевания (тяжелая)
Клинические проявления дифтерии Дифтерийные пленки Дифтерия гортани
Дифтерия кожи
Ребенок больной дифтерией
Механизм образования фибриновых пленок при дифтерии Токсигенные штаммы бактерий выделяют экзотоксин и ферменты (нейроменидазу), провоцируя формирование очага воспаления. Местное действие дифтерийного токсина выражается в коагуляционном некрозе эпителия, развитии гиперемии сосудов и стаза крови в капиллярах, повышении проницаемости сосудистых стенок. Экссудат, содержащий фибриноген, лейкоциты, макрофаги и эритроциты, выходит за пределы сосудистого русла. На поверхности слизистой оболочки в результате контакта с тромбопластином (ФСК III) некротизированной ткани фибриноген превращается в фибрин. Образовавшийся фибрин и некротизированный эпителий представляют собой плотное, довольно толстое образование — дифтерийную пленку. Постепенно отделяемое становится грязноватым, едким и вызывает воспаление кожи краев раны. Там могут появиться трещины кожи, которые способствуют присоединению вторичной инфекции.
Лабораторная диагностика материал для исследования: пленки, слизь с миндалин, зева, носа, кожи, глаз, уха, ран, вагины, с границы здоровой и пораженной ткани. Высев на среды: кровяно-теллуритовый агар хинозольную среду Бучина цистин-теллуритовую среду Тинсдаля. Выбирают колонии (темно-серые и черные 1,5-2 мм, выпуклые, круглые или шероховатые). На среде Бучина колонии синего или фиолетового цвета. экспресс-метод выявления дифтерийного токсина (реакция преципитации, ИФА, РНГА)
Результаты лабораторного исследования По морфологии клеток морфологии колоний пробе на цистиназу (+), уреазу (-). результатам ИФА и РНГА можно дать ответ на принадлежность выделенной культуры к виду C. diphtheriae.
Чувствительность к АМ препаратам Пенициллин Эритромицин Хлорамфеникол Гентамицин Стрептомицин Тетрациклин
Лечение: Введение противодифтерийной антитоксической сыворотки, не дожидаясь результатов микробиологического анализа 1. Нейтрализация токсина путем введения противодифтерийной антитоксической сыворотки (донорской или лошадиной) 2. Антибиотикотерапия: пенициллины, цефалоспорины, хинолоны и др.
Проба Шика (Schick test) проводится для оценки состояния антитоксического иммунитета предложена австрийским педиатром B. Schick (1877–1967) – кожная проба, применяемая для оценки восприимчивости человека к дифтерии; основана на оценке выраженности местной реакции (покраснение, отек), развивающейся через 3–4 суток после внутрикожного введения разведенного активного дифтерийного токсина. Пробу используют главным образом для выявления детей, подлежащих прививкам против дифтерии. При наличии антител против дифтерийного токсина видимых изменений не будет При отсутствии антитоксического имммунитета наблюдается воспалительная реакция
Причины возникновения эпидемии дифтерии (пик 1994 г. в РФ - 29,9 /100 тыс. населения в СПб – 52,7/100 тыс. населения) Временное благополучие в результате активной вакцинации в конце 50-х гг. Утрата прослойки иммунизированных со специфическим антитоксическим иммунитетом Сомнительное качество вакцины и нарушение технологии проведения прививок Распространение заболевания в результате бесконтрольной миграции населения
Необходимость вакцинации и ревакцинации Среди не вакцинированных: Субтоксическая форма заболевания - 41% Токсическая форма заболевания - 74% ПРИВИВАТЬ НАДО!!!
Специфическая профилактика Действующее начало всех вакцин – дифтерийный анатоксин (дифтерийный гистотоксин, утративший токсичность,н о сохранивший антигенные свойства в результате обработки формалином при 37-400С в течение 3 недель: •АД – адсорбированный дифтерийный анатоксин •АДС – адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин •АДС-М анатоксин-вакцина для профилактики дифтерии и столбняка с уменьшенным содержанием антигенов •АД-М анатоксин-вакцина для профилактики дифтерии с уменьшенным содержанием антигенов •Имовакс Д.Т. Адюльт (Imovax D.T.Adult®) вакцина для профилактики дифтерии и столбняка, аналог АДС-М (Aventis Pasteur, Франция) •ДТ Вакс вакцина для профилактики дифтерии и столбняка, аналог АДС(Aventis Pasteur, Франция)
104-difteriya.ppt
- Количество слайдов: 38