Внеклеточные НК. Циркулирующие ДНК и РНК. Роль

Внеклеточные НК. Циркулирующие ДНК и РНК. Роль в развитие злокачественных новообразований Выполнила: Бузенкова А. В. гр. 4203, МБФ

Понятие циркулирующих НК Циркулирующие (внеклеточные) нуклеиновые кислоты представлены ДНК и м. РНК и микро. РНК свободно циркулирующими в крови и других биологических жидкостях. Внеклеточные НК могут появляться в кровотоке в результате: гибели ядросодержащих клеточных элементов; созревания эритроцитов и тромбоцитов; активной секреции НК во внеклеточное пространство; продукции опухолевыми клетками (маркёры опухолевого роста). !!! Также выделяют: фетальное ДНК в крови женщин (уже на 1 -ом месяце беременности); нуклеиновые кислоты возбудителей при различных инфекционных заболеваниях.

Циркулирующие НК. Взаимосвязь со злокачественными новообразованиями Циркулирующие нуклеиновые кислоты Секреция опухолевыми клетками Высвобождени е клеточного содержимого в ходе некроза НЕКРОЗ характерен для опухолевой ткани из-за присущей ей гипоксии, ведет к высвобождению клеточного содержимого, фрагментации молекул и их фагоцитозу

Циркулирующие НК. Роль в развитие злокачественных новообразований. ГИПОТЕЗА ГЕНОМЕТАСТАЗИИ Основана на горизонтальном переносе информации циркулирующими НК от опухолевых клеток к здоровым. ДНК, выделяющаяся из клеток опухоли в кровь, переносится к другим клеткам, возможно, стволовым, которые трансформируются во «вторичную» опухоль

Экспериментальные доказательства Экспериментальным подтверждением этого предположения являются исследования D. C. Garcia-Olmo с соавт. В культуру клеток NIH/3 T 3 вносили образцы плазмы крови больных колоректальным раком, содержащей мутантный K-ras, и образцы плазмы здоровых людей. В стандартные чашки с культурой клеток добавляли плазму больных, во-первых, на- прямую, а вовторых, через мембрану с пора- ми 0, 4 мкм для того, чтобы исключить контакт с циркулирующими опухолевыми клетками хозяина. В большинстве экспериментов обнаружен перенос генетического материала человека в культуру NIH/3 T 3 клеток.

Циркулирующие НК. Взаимосвязь со злокачественными новообразованиями!!! Закономерность, имеющая практическое значение в диагностике: Нормальные клетки, как правило, гибнут путём апоптоза. В следствие чего, в кровоток высвобождаются дискретные фрагменты ДНК и РНК мононуклеосомного размера (около 150 пар оснований). Клетки опухолей, в следствие гипоксии, гибнут путём некроза. Образующиеся и высвобождающиеся при этом НК гетерогенны и имеют размеры в интервале от 200 до 400 пар оснований.

Циркулирующие НК. Маркёры опухолевого роста Тестирование плазмы (или сыворотки) крови онкологических больных на предмет присутствия в ней «опухолевых» нуклеиновых кислот была названа «жидкостной биопсией» и служит нескольким целям: 1. Выявление молекулярно-генетического типа опухоли на ранних стадиях, даже в условиях малой популяции клона опухолевых клеток (обуславливающих лекарственную устойчивость). 2. Обычная биопсия, позволяющая получить лишь одиночные фрагменты ДНК, не способна (в отличие от жидкостной) дать полное представление о клональной гетерогенности и мутационном профиле опухолевых клеток. 3. Малоинвазивный подход, может повторяться многократно (до и после удаления опухолевого очага). 4. Онкоспецифичность и универсальность. Все опухолевые клетки имеют какие-либо генетические или эпигенетические дефекты.

Циркулирующие НК. Маркёры опухолевого роста Соответственно генетическим и эпигенетическим нарушениям, лежащим в основе канцерогенеза, обнаруживаемые в крови маркеры подразделяют на несколько типов: мутации онкогенов и генов-супрессоров (кластерные, сосредоточенные в пределах 1– 3 кодонов, как в случае онкогенов RAS, или рассеянные по длине гена, как в случае генов-супрессоров ТР 53 и APC); феномен потери гетерозиготности (LOH, loss of heterozygocity – исчезновение одной аллели какого-либо гетерозиготного локуса), что обычно служит указанием на делецию гена-супрессора !!! Кроме того, показателями онкологической патологии могут служить: 1. увеличение концентрации и степени полимерности ц. ДНК; 2. появление в крови специфических вирусных последовательностей; 3. накопление специфических м. РНК и микро. РНК. аберрантное метилирование так называемых Cp. G-островков в промоторах генов-супрессоров.

Спасибо за внимание!!!

Внеклеточные НК. Циркулирующие ДНК и РНК. Роль в развитие злокачественных новообразований Выполнила: Бузенкова А. В. гр. 4203, МБФ