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UNIVERSITA' degli STUDI di PERUGIA/TERNI Corso di Laurea in Medicina e Chirurgia Corso integrato UNIVERSITA' degli STUDI di PERUGIA/TERNI Corso di Laurea in Medicina e Chirurgia Corso integrato Medicina di Laboratorio Microbiologia Clinica Vaginite e Vaginosi

VAGINITE La vaginite è una condizione infiammatoria a carico della vagina, a volte estesa VAGINITE La vaginite è una condizione infiammatoria a carico della vagina, a volte estesa anche alla vulva, caratterizzata principalmente da prurito, bruciore e perdite maleodoranti Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Am Fam Physician. 2011; 83(7): 807 -815.

VAGINITE: quadri più frequenti Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Candidiasi Trichomoniasi Vaginite aerobia Vaginite VAGINITE: quadri più frequenti Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Candidiasi Trichomoniasi Vaginite aerobia Vaginite mista Altri Am Fam Physician. 2011; 83(7): 807 -815.

VAGINITE: quadri meno frequenti Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Vaginosi citolitica • Sovracrescita lattobacillare VAGINITE: quadri meno frequenti Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Vaginosi citolitica • Sovracrescita lattobacillare • Nuclei cellulari isolati • Frammenti di cellule epiteliali • Scarsità di leucociti, • Assenza di lieviti/ife Hu Z et al. J Low Genit Tract Dis. 2015 Apr; 19(2): 152 -5. Vaginite in età prepubere Patogeni Streptococcus pyogenes Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae Non patogeni/patogeni condizionali Escherichia coli Enterococcus faecalis Pseudomonas aeruginosa Bumbulienė Ž et al. J Postgrad Med J. 2014; 90(1059): 8 -12. Sindrome genito-urinaria della menopausa (vaginite atrofica) Prurito e bruciore vulvare, disuria, urgenza minzionale eritema, IVU ricorrenti Kim HK et al. J Menopausal Med. 2015 Aug; 21(2): 65 -71. Vaginite da Herpes simplex Prurito e bruciore vulvare, ragadi, eritema, perdite A volte confusa con candidiasi vaginale Ashley RL et al. Clin Microbiol Rev. 1999 Jan; 12(1): 1 -8.

VAGINOSI Condizione patologica a causa ignota, caratterizzata da deplezione della normale popolazione lattobacillare e VAGINOSI Condizione patologica a causa ignota, caratterizzata da deplezione della normale popolazione lattobacillare e sostituzione da parte di popolazione batterica mista, costituita principalmente da anaerobi (Mobiluncus spp. , Bacteroides spp. , ) e Gardnerella vaginalis Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Am Fam Physician. 2011; 83(7): 807 -815.

VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U. S. A. Baron EJ et VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U. S. A. Baron EJ et al. IDSA-ASM Guidelines, Clin Infect Dis. 2013 Aug; 57(4): e 22 -e 121.

VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U. S. A. Misurazione del p. VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U. S. A. Misurazione del p. H • 3, 8 -4, 5: Normale/candidiasi • > 4, 5: Vaginosi, trichomoniasi, vaginite aerobia Baron EJ et al. IDSA-ASM Guidelines, Clin Infect Dis. 2013 Aug; 57(4): e 22 -e 121.

VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U. S. A. Esame microscopico a VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U. S. A. Esame microscopico a fresco Misurazione del p. H • 3, 8 -4, 5: Normale/candidiasi • > 4, 5: Vaginosi, trichomoniasi, vaginite aerobia + KOH 10% • Verifica idoneità prelievo (cellule epiteliali) • Ricerca leucociti • Ricerca Trichomonas vaginalis (forme mobili) • Whiff test • Ricerca lieviti/ife/pseudoife Negativo Coltura Baron EJ et al. IDSA-ASM Guidelines, Clin Infect Dis. 2013 Aug; 57(4): e 22 -e 121.

VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U. S. A. Esame microscopico dopo VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida U. S. A. Esame microscopico dopo colorazione di Gram • Nugent score Esame microscopico a fresco Misurazione del p. H • 3, 8 -4, 5: Normale/candidiasi • > 4, 5: Vaginosi, trichomoniasi, vaginite aerobia + KOH 10% • Verifica idoneità prelievo (cellule epiteliali) • Ricerca leucociti • Ricerca Trichomonas vaginalis (forme mobili) • Whiff test • Ricerca lieviti/ife/pseudoife Negativo Coltura Baron EJ et al. IDSA-ASM Guidelines, Clin Infect Dis. 2013 Aug; 57(4): e 22 -e 121.

VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI Raccolta dati anamnestici per verificare VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI Raccolta dati anamnestici per verificare l'appropriatezza del prelievo La paziente: non deve avere avuto rapporti sessuali nelle 24 ore precedenti l’esame non deve essere in periodo mestruale non deve avere eseguito irrigazioni vaginali nelle 24 ore precedenti l’esame deve aver cessato qualsiasi terapia antimicotica o antibiotica, locale o generale, da almeno 7 giorni Indagini microbiologiche Primo livello Candida spp. , Trichomonas vaginalis, vaginosi batterica Secondo livello HSV Altri microorganismi (anamnesi e clinica suggestive di altre cause) Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI 1. Misurazione del p. H VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI 1. Misurazione del p. H dalle pareti laterali mediante carta indicatrice/p. Hmetro Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI 1. Misurazione del p. H VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI 1. Misurazione del p. H dalle pareti laterali mediante carta indicatrice/p. Hmetro 1. inserimento speculum bivalve sterile 2. Prelievo dal fornice posteriore – – Tampone per esame microscopico a fresco (Trichomonas vaginalis) – Tampone per esame microscopico dopo colorazione di Gram (Nugent score) – Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009 Tampone per whiff test con KOH 10% (vaginosi) ricerca lieviti/ife/pseudoife Tampone per eventuale coltura

VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI 1. Misurazione del p. H VAGINITE e VAGINOSI: approccio diagnostico secondo linee guida AMCLI 1. Misurazione del p. H dalle pareti laterali mediante carta indicatrice/p. Hmetro 1. inserimento speculum bivalve sterile 2. Prelievo dal fornice posteriore – 4. In caso di lesioni vulvari sospette per HSV 4. 5. IF Prelievo liquido da vescicole Prelievo da ulcere mediante scraping NAATs Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009 Coltura Tampone per whiff test con KOH 10% (vaginosi) ricerca lieviti/ife/pseudoife – Tampone per esame microscopico a fresco (Trichomonas vaginalis) – Tampone per esame microscopico dopo colorazione di Gram (Nugent score) – Tampone per eventuale coltura

CANDIDA Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia CANDIDA Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia

VAGINITE da Candida spp. • Infiammazione vulvovaginale associata al riscontro di lieviti, ife e VAGINITE da Candida spp. • Infiammazione vulvovaginale associata al riscontro di lieviti, ife e pseudoife all’indagine microscopica • Clinicamente caratterizzata soprattutto da intenso prurito, ma anche bruciore, dispareunia, disuria, edema ed eritema della mucosa, leucorrea e p. H ≤ 4, 5 • Segni e sintomi non patognomonici Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

VAGINITE da Candida spp: approccio diagnostico secondo linee guida europee Cuenca-Estrella M et al. VAGINITE da Candida spp: approccio diagnostico secondo linee guida europee Cuenca-Estrella M et al. Clin Microbiol Infect. 2012 Dec; 18 Suppl 7: 9 -18.

VAGINITE da Candida spp: approccio diagnostico secondo linee guida tedesche Mendling W et al. VAGINITE da Candida spp: approccio diagnostico secondo linee guida tedesche Mendling W et al. Mycoses. 2015 Mar; 58 Suppl 1: 1 -15.

VAGINITE da Candida spp. : esame microscopico a fresco vs Gram Gold standard: coltura VAGINITE da Candida spp. : esame microscopico a fresco vs Gram Gold standard: coltura Lieviti ed ife a 400 x Lieviti ed ife a 1000 x Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Abbott J. Ann Emerg Med. 1995 May; 25(5): 587 -91.

VAGINITE da Candida spp. : interpretazione clinica dei test molecolari? VAGINITE da Candida spp. : interpretazione clinica dei test molecolari?

VAGINITE da Candida spp. : epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Marzo 2013 - Gennaio VAGINITE da Candida spp. : epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Marzo 2013 - Gennaio 2014 Prevalenza pazienti positive per miceti mediante coltura: 126/663 (19%) Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Leli et al. 2015; Unpublished data

VAGINITE da Candida spp. : epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Marzo 2013 - Gennaio VAGINITE da Candida spp. : epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Marzo 2013 - Gennaio 2014 Positività tampone vaginale per miceti in relazione alla presenza di sintomi di vaginite Sintomi di vaginite Presenti Tampone vaginale per miceti Negativo 78 (61, 9%) 48 (38, 1%) 126 234 (43, 6%) 303 (56, 4%) 537 312 Positivo Assenti 351 663 Differenza significativa: P<0, 0001 Leli et al. 2015; Unpublished data

VAGINITE da Candida spp. : epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Marzo 2013 - Gennaio VAGINITE da Candida spp. : epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Marzo 2013 - Gennaio 2014 Prevalenza specie tra pazienti positive per miceti mediante coltura Leli et al. 2015; Unpublished data

VAGINITE da Candida spp. : epidemiologia altri centri italiani • Studio italiano multicentrico prospettico VAGINITE da Candida spp. : epidemiologia altri centri italiani • Studio italiano multicentrico prospettico • 8 centri, ambulatori di Ginecologia & Ostetricia • 925 pazienti con segni/sintomi di vulvovaginiti Corsello S et al. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2003 Sep 10; 110(1): 66 -72.

TRICHOMONAS VAGINALIS Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia TRICHOMONAS VAGINALIS Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia

VAGINITE da Trichomonas vaginalis Causa di vaginiti gravi con perdite schiumose giallo-verdastre e maleodoranti, VAGINITE da Trichomonas vaginalis Causa di vaginiti gravi con perdite schiumose giallo-verdastre e maleodoranti, accompagnate a volte da prurito vulvare, dispareunia, disuria Segni e sintomi non patognomonici Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Percorso Diagnostico AMCLI-GLIST 2009

VAGINITE da T. vaginalis: approccio diagnostico secondo linee guida est Europa • Consigliati – VAGINITE da T. vaginalis: approccio diagnostico secondo linee guida est Europa • Consigliati – Esame microscopico a fresco – Metodi immunocromatografici (sensibilità e specificità superiori all’esame microscopico) – NAATs – Coltura (gold standard) • Sconsigliati – Esame microscopico dopo Gram/Giemsa/Blu di metilene (bassa sensibilità) – Pap-Test (bassa sensibilità e specificità) – Test sierologici non sono consigliati (bassa sensibilità e specificità) Domeika M et al. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2010 Oct; 24(10): 1125 -34.

VAGINITE da Trichomonas vaginalis: accuratezza diagnostica esame microscopico a fresco VAGINITE da Trichomonas vaginalis: accuratezza diagnostica esame microscopico a fresco

VAGINITE da Trichomonas vaginalis: point-of-care test vs esame microscopico a fresco Popolazione: 330 pazienti VAGINITE da Trichomonas vaginalis: point-of-care test vs esame microscopico a fresco Popolazione: 330 pazienti sintomatiche Gold standard: coltura (In. Pouch) Huppert JS et al. Clin Infect Dis. 2007 Jul 15; 45(2): 194 -8.

VAGINITE da Trichomonas vaginalis: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia - Gennaio-Settembre 2015 Prevalenza pazienti VAGINITE da Trichomonas vaginalis: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia - Gennaio-Settembre 2015 Prevalenza pazienti positive per Trichomonas vaginalis mediante Real-Time PCR: 20/1569 (1, 3%) Leli et al. 2015; Unpublished data

VAGINITE da Trichomonas vaginalis: accuratezza diagnostica PCR Meta-analisi di 35 studi Gold standard: coltura VAGINITE da Trichomonas vaginalis: accuratezza diagnostica PCR Meta-analisi di 35 studi Gold standard: coltura (In. Pouch) Patel SR et al. Infect Dis Obstet Gynecol. 2000; 8(5 -6): 248 -57.

VAGINOSI Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia VAGINOSI Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia

Mendling W et al. Geburtshilfe Frauenheilkd. 2014 Jan; 74(1): 51 -54. Mendling W et al. Geburtshilfe Frauenheilkd. 2014 Jan; 74(1): 51 -54.

VAGINOSI: Nugent score Score: 0 Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Score: 5 Microbiologia, Azienda VAGINOSI: Nugent score Score: 0 Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Score: 5 Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Score: 8 Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Nugent RP et al. J Clin Microbiol. 1991 Feb; 29(2): 297 -301.

VAGINOSI: Nugent score Score: 0 Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Score: 5 Microbiologia, Azienda VAGINOSI: Nugent score Score: 0 Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Score: 5 Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Score: 8 Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Nugent RP et al. J Clin Microbiol. 1991 Feb; 29(2): 297 -301.

VAGINOSI: accuratezza diagnostica dei criteri di Amsel Popolazione: 120 pazienti con sintomatologia compatibile con VAGINOSI: accuratezza diagnostica dei criteri di Amsel Popolazione: 120 pazienti con sintomatologia compatibile con vaginosi Gold standard: Nugent score Esame microscopico a fresco, 400 x, Clue cells Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Mohammadzadeh F et al. Glob J Health Sci. 2014 Oct 29; 7(3): 8 -14.

VAGINOSI: significato clinico dei test molecolari? In-house real-time PCR test: accuratezza diagnostica Popolazione: 151 VAGINOSI: significato clinico dei test molecolari? In-house real-time PCR test: accuratezza diagnostica Popolazione: 151 pazienti Gold standard: Nugent score Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Kusters JG et al. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2015 Sep; 34(9): 1779 -85.

VAGINOSI: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Gennaio-Settembre 2015 Prevalenza pazienti positive per vaginosi Identificata VAGINOSI: epidemiologia Azienda Ospedaliera di Perugia Gennaio-Settembre 2015 Prevalenza pazienti positive per vaginosi Identificata mediante Gram: 148/1569 (9, 4%) Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia

VAGINITE AEROBIA Condizione infiammatoria caratterizzata da deplezione lattobacillare, intenso richiamo leucocitario e presenza di VAGINITE AEROBIA Condizione infiammatoria caratterizzata da deplezione lattobacillare, intenso richiamo leucocitario e presenza di “leucociti tossici”, p. H ≥ 6, presenza di cocchi Gram positivi, presenza di cellule parabasali Manifestazioni cliniche: prurito, dispareunia, perdite Segni e sintomi non patognomonici Microbiologia, Azienda Ospedaliera di Perugia Donders GG et al. BJOG. 2002 109(1): 34 -43.

VAGINITE AEROBIA: epidemiologia internazionale 76/516 (14, 7%) pazienti sintomatiche Fan AP et al. Zhonghua VAGINITE AEROBIA: epidemiologia internazionale 76/516 (14, 7%) pazienti sintomatiche Fan AP et al. Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. 2010 Dec; 45(12): 904 -908. 7, 9% (50/631) pazienti sintomatiche/controllo dopo trattamento Donders GG et al. BJOG. 2002 109(1): 34 -43. 7/245 (2, 9%) pazienti in gravidanza Gondo F et al. Gynecol Obstet Invest. 2011; 71(3): 158 -62.