Тема лекции: ДИФТЕРИЯ План лекции Исторические сведения Биологические
Тема лекции: ДИФТЕРИЯ
План лекции Исторические сведения Биологические свойства C. diphtheriae Эпидемиология и патогенез дифтерии Микробиологическая диагностика Лечение и профилактика 2
ДИФТЕРИЯ - Острое инфекционное заболевание,которое проявляется глубокой интоксикацией организма дифтерийным токсином и характерным фибринозным воспалением в месте локализации возбудителя 2
Историческая справка I век нашей эры – самое раннее описание дифтерии (Аретей Каппадокийский) «Египетская болезнь», «сирийская язва», «петля палача», «гаротильо» — так в разные времена и у разных народов называлась дифтерия. В XIX веке дифтерия была выделена в самостоятельную нозологическую форму под названием «дифтерит» (П. Бретонно и А. Труссо) а затем «дифтерия» (греч. diphtherion - плёнка, перепонка). . 3
1883 – 1884гг – Э. Клебс и Ф.Леффлер выделили и получили чистую культуру возбудителя
1884г. – получение дифтерийного токсина (Ру) 1890г. – обнаружение антитоксинов в крови больных (Орловский) 1913г. – кожная проба Шика с токсином для выявления лиц, восприимчивых к дифтерии 6
В 1890 г. Эмиль фон Беринг создал противодифтерийную антитоксическую сыворотку. В 1901 был награжден Нобелевской премией
В 1923 г. Рамон получил дифтерийный анатоксин
Одна из последних крупных эпидемий дифтерии наблюдалась во время второй мировой войны. Всего в Европе заболело в годы войны около трех миллионов человек, из них 150 тысяч погибли. В Украине подъем заболеваемости регистрировалось в 90-е годы с пиком в 1995г (26,9 на 100 тыс. населения) 9
ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ В УКРАИНЕ 10
Отдел Firmicutes Cемейство Corynebacteriaсеае Род Corynebacterium Вид: C. diphtheriae (биовары: gravis, mitis, intermedius,belfanti)
МОРФОЛОГИЯ: Крупные (1—8 × 0,3—0,8 мкм) прямые, слегка изогнутые полиморфные палочковидные бактерии с булавовидными утолщениями на концах с зернами волютина (зерна Бабеша-Эрнста); Основные диагностические методы окраски: по Леффлеру (метиленовым синим) и по Нейссеру Характерное расположение в мазках – под углом друг к другу, или латинские буквы: V, X, L, или китайские иероглифы 4
C. diphtheriae окр. по Нейссеру окр. по Граму окр. По Леффлеру
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ: Аэробы ( биовар gravis) или факультативные анаэробы Растут при Т= 37 С; рН = 7,4-7,6 Культивируются на средах, содержащих кровь или сыворотку: Элективные среды: Среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка) C. diphtheriae дают колонии бледно-желтого цвета, выпуклые с блестящей поверхностью. На среде Леффлера (сывороточный агар) образуют выпуклые кремовые колонии напоминающие “шагреневую кожу”. 6
Дифференциально-диагностические среды: Среда Тинсдаля-Садыковой (сывороточно-теллуритовый агар) Среда Клауберга (Кровяно-теллуритовый агар) Gravis – колонии крупные, R-формы, серого цвета – «цветок маргаритки», без гемолиза; Mitis – колонии мелкие, S – формы, гладкие, черные, окруженные зоной гемолиза; Intermedius - колонии R- и S- формы, черного цвета. Мартеновский бульон: Gravis – образуется пленка и зернистый осадок; Mitis – равномерное помутнение. 15
Колонии на сывороточно-теллуритовом агаре
Колонии C. diphtheria на кровяно-теллуритовом агаре Gravis: Mitis: Intermedius:
Биохимические свойства C. diphtheriae расщепляет цистин с образованием H2S; Расщепляет глюкозу и мальтозу до кислоты Восстанавливает нитраты в нитриты (кроме биовара belfanti) Не образует индол Не разлагает мочевину Биовар gravis – расщепляет крахмал 18
Факторы вирулентности Экзотоксин Гиалуронидаза Нейраминидаза Фибринолизин ДНКаза Цистиназа
ЭКЗОТОКСИН- Это термолабильный иммуногенный белок, растворимый в солевых растворах, состоящий из двух фрагментов: фрагмент А – определяет специфичность действия в организме:ингибирует синтез белка, вызывая структурные изменения миокарда и нервных клеток фрагмент В – взаимодействует с клеточными рецепторами клеток-мишеней [адгезия].
ТОКСИНООБРАЗОВАНИЕ Способность к токсинообразованию имеют лишь лизогенные штаммы Corynebacterium diphtheriae, инфицированные бактериофагом, несущим tox-ген (β-фаг), кодирующий структуру токсина (фаговая конверсия). Нетоксигенные штаммы заболевания не вызывают.
Электронная микрофотография бактериофага коринебактерии, несущего tox-ген
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ Источник инфекции: больной и носитель токсигенных штаммов С. diphtheriae. Пути передачи: воздушно-капельный, воздушно-пылевой, контактно-бытовой, алиментарный. Устойчивость во внешней среде: -в дифтерийной пленке, в капельках слюны сохраняются до 15 дней; -на поверхности предметов и в пыли - до 2 мес; -в воде и молоке выживают в течение 20 дней; -быстро инактивируются дезинфектантами: в 1% растворе сулемы - через 1 мин, 5% растворе фенола, 50-60° этилового спирта - через 1 мин; 11
Патогенез дифтерии 12
К Л И Н И Ч Е С К А Я К Л А С С И Ф И К А Ц И Я 13
Ведущие симптомы дифтерии: - Грязно-серые, не снимающиеся налеты на слизистой оболочке миндалин, носа, ротоглотки, гортани; - Температура 38-40°С, отек шеи: «бычья шея»; - Снижение АД; - Боль в животе (чаще острая, внезапная); - Рвота, запоры - Осиплость голоса, афония - Тахикардия (не соответствующая температуре); - Одышка; - Полиневриты, параличи мягкого неба, дыхательных мышц; - Кома; 17
Дифтерия глотки Распространенная дифтерия ротоглотки: серовато-белые отторгающиеся налеты на гиперемированных с цианотичным оттенком небных миндалинах, дужках и язычке. 14
Дифтерия. Выраженный отек шеи. Ребенок не может закрыть рот. Язык приподнят. Ринит. Субфебрильная температура. Ребенок погиб от миокардита. Антитоксина не было. Лаос. 15
Дифтерия глотки Кожная форма дифтерии 16
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ДИФТЕРИИ Материалом для исследования служат дифтеритические пленки, слизь из носоглотки, а также отделяемое из подозрительных поражений глаз, кожных покровов, половых органов. Бактериоскопический метод: - окраска по Граму - окраска по Нейссеру и (или) Леффлеру – выявляет характерные зерна Бабеша-Эрнста - РИФ 18
Бактериологический метод: Материал засевают на элективные (Ру, Леффлера) и теллуритовые питательные среды ( Тинсдаля-Садыковой, Клауберга, Маклеода). Определение токсигенности: - реакция преципитации в геле (Илека и Оухтерлони) - ПЦР для обнаружения гена в бактериальной хромосоме - ИФА с использованием антитоксинов и пероксидазы
Идентификация: - посев на среды Гисса; - проба на цистиназу (Пизу) - РА на стекле Серологическая диагностика: РПГА, ИФА
Схема реакции преципитации в агаре
Проба на токсигенность культур
Лечение дифтерии Введение антитоксической противодифтерийной сыворотки в дозах от 20 000 до 100 000 МЕ Антибактериальная терапия: аминогликозиды, цефалоспорины Симптоматическая терапия
Специфическая профилактика адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС-вакцина), адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин (АДС-анатоксин), адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин с уменьшенным содержанием антигенов (АДС-М-анатоксин), адсорбированный дифтерийный анатоксин с уменьшенным содержанием антигена (АД-М-анатоксин). 20
Вакцинация (АКДС) – в 3 месяца. Ревакцинация (АДС): - в 1,5-2 года, - в 9-16 лет, - далее через каждые 10 лет 37
Из носоглотки ребенка 5-лет выделен микроорганизм, который по морфологическим и биохимическим признакам идентичен С.diphtheriae, но не образует экзотоксин. В результате какого процесса этот микроорганизм может стать токсигенным? А. Культивирование на теллуритовой среде. В. Фаговая конверсия. С. Пассаж через организм чувствительных животных. D. Хромосомная мутация . Е. Выращивание в присутствии антитоксической сыворотки. 38
126-difteriya.ppt
- Количество слайдов: 40