Санитарная микробиология
Санитарная микробиология - раздел медицинской микробиологии, изучающий микроорганизмы, содержащиеся в окружающей среде, способные оказывать неблагоприятное воздействие на состояние здоровья человека. Она разрабатывает: • микробиологические показатели гигиенического нормирования, • методы контроля за эффективностью обеззараживания объектов окружающей среды, • выявляет в объектах окружающей среды патогенные, условнопатогенные и санитарно-показательные микроорганизмы. • Обнаружение патогенных микроорганизмов позволяет дать оценку эпидемиологической ситуации и принять соответствующие меры по борьбе и профилактике инфекционных заболеваний.
Объекты санитарномикробиологического исследования Вода Воздух Почва Объекты окружающей среды в ЛПУ Отходы Пищевые продукты
Методы исследования в санитарной микробиологии Прямое обнаружение патогенных микроорганизмов во внешней среде Косвенная индикация вероятность наличия патогенных микроорганизмов во внешней среде Методы: • выявление с помощью бактериофагов; • прямой посев исследуемого материала в питательные среды; • предварительная концентрация патогенных микроорганизмов Трудности: пропусканием исследуемого объекта (жидкой консистенции) -находятся в окружающей среде непостоянно; через мембранные фильтры или посевом в среды накопления; -низкая концентрация; -неравномерное распространение в загрязненных объектах ; -многие патогены не способны к размножению в условиях окружающей среды. • обнаружение патогенных микроорганизмов методом • определение общего микробного числа (ОМЧ) – количественный показатель, характеризующий содержание жизнеспособных клеток микроорганизмов различных физиологических групп в 1 г или 1 мл образца; Трудности: • определение по количеству общего азота. Не дает полного представления о санитарном состоянии объекта.
Тестировать на все возможные инфекции – дорого, долго и утомительно
Санитарно-показательные микроорганизмы (СПМО) постоянные обитатели поверхностей и полостей человеческого организма, которые постоянно и в больших количествах содержатся в его выделениях они сохраняют жизнеспособность во внешней среде в течение сроков, близких к срокам выживания патогенных микробов, выделяемых теми же путями, но интенсивно не размножаются во внешней среде. их обнаружение в объектах внешней среды свидетельствует о загрязнении этих объектов выделениями человека.
Группы СПМО • 1. Индикаторы фекального загрязненияпредставители микрофлоры кишечника человека и животных. • 2. Индикаторы воздушно-капельного загрязнения – комменсалы верхних дыхательных путей. • 3. Индикаторы процессов самоочищенияобитатели внешней среды.
БГКП (бактерии группы кишечной палочки) • Группа микроорганизмов, свидетельствующая о фекальном загрязнении окружающей среды • Эта группа объединяет более 100 видов микроорганизмов, обитающих в кишечнике человека, животных и птиц, куда входят представители родов Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia. Они обладают высокой устойчивостью к неблагоприятным условиям и могут долго сохраняться в воде, почве, на предметах быта. Наиболее интенсивно развиваются при температуре 37°С, но длительно сохраняют жизнеспособность при комнатной температуре.
Индикаторы фекального загрязнения: ОКФБ • ОКФБ (общие колиформные бактерии)это санитарно-бактериологическое и экологическое понятие. Указывают на средней давности фекальное загрязнение • Включает представителей семейства Enterobacteriaceae, родов: Escherichia, Citerobacter, Enterobacter, Serracia, Klebsiella, Proteus и др.
Характеристика ОКФБ • Гр(-) короткие палочки, • Спор не образуют, • Сбраживающие глюкозу и лактозу с образованием кислоты и газа при 37 о. С в течение 24 -48 часов, • Не обладают оксидазной активностью Контроль ОКФБ
Индикаторы фекального загрязнения: ТТКФБ • ТТКФБ (термотолерантные колиформные бактерии). Свидетельствуют о свежем фекальном загрязнении. • Обладают всеми признаками ОКФБ, но способны ферментировать лактозу до кислоты и газа при 44 о. С в течение 24 ч.
Индикаторы фекального загрязнения: сульфитредуцирующие клостридии • Сульфитредуцирующие клостридии – это спорообразующие анаэробные палочки, восстанавливающие сульфит натрия при культивировании на железосульфитном агаре при 44 о. С в течение 18 часов. • Обнаружение спор в почве, воде открытых водоемах свидетельствует о давнем фекальном загрязнении • Обнаружение спор на оборудовании пищеперерабатывающих предприятий или в питьевой воде – недостаточности дезинфекции
Показатели загрязнения компостом и навозом: термофилы • Это спорообразующие Гр(+) бациллы, актиномицеты, активно размножающиеся в компостных кучах, навозе при температуре 55 -60 о. С.
Показатели фекального загрязнения объекта Тип загрязнения Санитарно-показательные микроорганизмы БГКП энтерококки клостридии термофилы Свежее фекальное загрязнение +++ +++ -/+ Давнее фекальное загрязнение - - ++ -/+ Ø О массивности свежего фекального загрязнения судят по количеству БГКП и энтерококков; Ø О давности фекального загрязнения судят по соотношению БГКП, энтерококков и клостридий; Ø О характере загрязнения судят по соотношению фекальных бактерий и термофилов.
В санитарной микробиологии приняты термины титра и индекса • Титром называют минимальный объем воды или почвы, в котором содержится одна жизнеспособная клетка санитарнопоказательного микроорганизма • Индексом называют количество клеток санитарно-показательных микроорганизмов в 1 л (для воды) или в 1 кг (для почвы).
Микрофлора почвы 1010 бактерий на 1 г почвы
Микроорганизмы, способные вызвать заболевания через загрязненную почву
Оценка санитарного состояния почвы по основным микробиологическим показателям Характеристика почвы Коли-титр Перфрингенс-титр Количество термофильных бактерий в 1 г почвы Чистая 1, 0 и выше 0, 01 и выше 102 -103 Загрязненная 0, 9 -0, 01 0, 009 -0, 0001 От 103 до 105 Сильно загрязненная 0, 009 и ниже 0, 00009 и ниже От 105 до 4 х106
Патогенная микрофлора почвы Случаев в год, Россия Листериоз 30 -100 (0, 02 -0, 067/100 000) Сальмонеллез 36/100 000 E. coli O 157: H 7 ? Случаев в год, США и ЕС 0, 26 -1, 8/100 000 35/100 0, 6 -0, 9/100 000 Выживаемость микроорганизма в среде Listeria Salmonella E. coli O 157: H 7 2 месяца 6 -28 месяцев 50 -56 дней
Микрофлора воды • Автохтонная флора (водная) – это микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. Микробное население отражает состав микрофлоры почвы, с которой вода соприкасается: – Аэробы: Micrococcus roseus, Sarcina lutea, Bacteroides aqualitis, Pseudomonas fluorescens; – Анаэробы: Bacillus cereus, Bacillus micoides. • Аллохтонная флора – это микроорганизмы, попавшие извне при загрязнении водоемов, в том числе и патогенная.
Биологическая контаминация водоемов • Городские отходы и сточные воды • Морской и речной флот • Животноводческие и птицеводческие комплексы • Человеческий фактор Методы дезинфекции животноводческих стоков и помета с ферм http: //bizplan-uz. ru/industries/milk/17794/ Старое машинное масло стало причиной загрязнения реки в Новосибирске. Фото: http: //www. baltinfo. ru
Сапробность (чистота воды) • Полисапробные зоны: сильное загрязнение, гниение; много органики, анаэробы, грибы, актиномицеты (до 1 млн/мл воды) • Мезосапробные зоны: умеренное загрязнение, окисление; окисление азотсодержащих соединений; Nitrobacter, Nitrosomonas, Clostridium, Mycobacterium, Flavobacterium • Олигосапробные зоны: окончание процессов самоочищения; высокая минерализация; до 1000 бактерий/мл воды
Индикаторы процессов самоочищения – обитатели внешней среды ь ь ь Протеолиты Аммонификаторы и нитрификаторы Аэромонады и бделловибрионы Споровые микроорганизмы Грибы и актиномицеты Целлюлозобактерии
Род Bdellovibrio Включает мелкие подвижные Гр(–) клетки. Типовой вид - В. bacteriovorus. • • Хемоорганотрофы, аэробы. Не сбраживают углеводы. Обладают протеолитической и оксидазной активностью. Оптимум роста около 30°С. Прикрепление паразитической бактерии Bdellovibrio к клетке хозяина — Pseudomonas (по Штольлу, 1963). Различают 2 стадии развития: Паразитическая стадия – клетки имеют вид изогнутых неподвижных палочек размерами 0, 3 - 0, 4 x 0, 8 -2 мкм. Свободные формы полиморфны - монотрихиальные изогнутые палочки таких же или больших размеров. Паразитируют в периплазме E. coli, протея, вибрионов, псевдомонад, сераций и других Гр-) бактерий. Для паразитических видов характерен сложный и варьирующий цикл развития: а) обитание в абиогенной среде; б) прикрепление к клеточной стенке бактерий и проникновение в периплазму хозяина, сопровождающееся утратой жгутика; в) размножение в периплазме, протекающее по типу изоморфного деления, фрагментации длинной Sобразной или спиралевидной структуры, или множественного деления с образованием сферопластов; г) выход из бактерии типичных жгутиковых форм, сопровождающийся разрушением бактерии-хозяина.
Род Bdellovibrio ü Играют важное значение в очищении почвы и воды от бактерий - паразитов человека и животных. ü За секунду Bdellovibrio проплывает расстояние, равное 50 длинам своего тела. Если бы человек двигался с пропорциональной скоростью, быстрота его движения достигала бы 300 км/ч. ü Bdellovibrio составляют 0, 02 -0, 04% от общего числа бактерий. ü В опытах Ю. Г. Талаевой и 3. С. Веркловой (1973) Bdellovibrio bacteriovorus уничтожали находящиеся в воде S. sonnei в течение 1923 дней. ü Холерные вибрионы полностью лизировались Bdellovibrio в стерильной речной воде уже через 5 -6 суток (Ф. X. Ибрагимов с соавт. , 1976). ü Сами Bdellovibrio сохраняют жизнеспособность свыше 200 дней.
Род Aeromonas ü Изогнутые палочковидные, кокковидные или нитевидные аспорогенные монотрихиальные Гр(-) бактерии из семейства Vibrionaceae. ü Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы. ü Растут при 20 -30°С, р. Н 7, 0, на простых питательных средах. ü Некоторые виды способны расти на минеральных средах с источником углерода в виде глюкозы и аргинина. Добавление в среды 7, 5% натрия хлорида замедляет рост. Не чувствительны к тетрациклинам, аминогликозидам, полимиксину.
Род Aeromonas ü Обитают в пресноводных водоемах, сточных водах. Вызывают болезни рыб и лягушек. ü Выделены от больных с диареями, бактериемией, развивающимися на фоне резко сниженной резистентности. ü В 1969 г. предложено использовать их в качестве СПМО. Они в больших количествах содержатся в сточных водах и обладают большой энергией размножения. ü Служат показателем нагрузки сточных вод на водоем и имеют такое же значение, как ОМЧ. ü При большой концентрации аэромонад в воде может наступить пищевое отравление.
Методы изучения микробного числа воды Среда Эндо Хромогенная среда для выявления бактерий семейства Enterobacteriaceae
Микрофлора воды: методы выявления фагов • Бактериофаги косвенно свидетельствуют о наличии в среде бактерий к которым они тропны
Показатели чистоты питьевой воды (Сан. Пи. Н 2. 1. 4. 1074 -01) • Общее микробное число – общее количество микроорганизмов в 1 мл воды (не более 50) • Коли-титр – наименьший объем воды в котором обнаруживается 1 кишечная палочка (не менее 300 мл), • Коли-индекс – общее количество кишечной палочки в 1 литре воды (не более 3). • ОКФБ – 0/100 мл; колифаги – 0/1 мл; лямблии – 0/50 мл
Нормативы показателей качества воды питьевой природной Контролируемые Единица Значение Метод показатели измерения показателя испытания Общие колиформные ед/дм 3 не допускается ГОСТ 18963 микроорганизмы E. coli и термотолерантные микроорганизмы ИСО 9308 -1, 2 1990 Колифаги КОЕ/дм 3 не допускаются МР 0119/1213 МУ 2285 -81 Фекальные стрептококки ед/дм 3 не допускаются ИСО 7899 -1, 2; 1984 Энтеровирусы Сульфатредуцирующие ед/10 дм 3 не допускаются МУ 2285 -81 ед/100 см 3 не допускаются ИСО 6461 -1; 1989 клостридии ИСО 6461 -2; 1986 Сальмонеллы ед/10 см 3 не допускаются МУ 2285 -81 ИСО ПМС 6340 Патогенные микроорганизмы (шигеллы, холерные вибрионы) ед/10 дм 3 не допускаются Энтерококки ед/дм 3 не допускаются МУ 2285 -81
Микрофлора воздуха Для определения микробного числа воздуха используют методы: • Седиментационный – 2 чашки Петри оставляют на открытом воздухе в течение 60 мин. Культивируют: менее 250 колоний – чистый воздух, 250 -500 – средняя степень загрязнения, более 500 – загрязненный. • Аспирационный – более точный метод оценки с помощью аппарата Кротова.
Микрофлора воздуха • S. aureus • Споры плесневых грибов СПМО • Legionella • Аллергены • Str. haemolyticus, Pseudomonas aeruginosa
Микрофлора воздуха в ЛПУ Место отбора проб Микробное число S. aureus (в 250 л) Операционная до начала Не более 500 работы Не допускается Операционная во время работы Не более 1000 Не допускается Родильная комната Не более 1000 Не допускается Палаты для недоношенных детей Не более 750 Не допускается
Показатели общей обсемененности объектов окружающей среды Санитарное состояние поверхности считается: • отличным, если ОМЧ на 1 см 2 не превышает 100, • хорошим - при микробном числе от 100 до 1000, • удовлетворительным - более 1000, • плохим - более 10000.
Микрофлора пищевых продуктов СПМО : • • • Кишечная палочка, колиформные бактерии Энтерококк Золотистый стафилококк Протеи Клостридии Сальмонеллы Шигеллы Бруцеллы и т. д.
Санитарно-бактериологический контроль смывов с одежды, рук, инвентаря, оборудования Отбор проб для санитарно-микробиологического исследования предметов обихода и оборудования проводится с помощью следующих методов: • смывов (тампонами или салфетками); • отпечатков (контактный метод); • агаровой заливки.
Все санитарно-микробиологические исследования проводятся в соответствии с действующими нормативно-методическими документами : ь Сан. Пи. Н – санитарными правилами и нормами ь ГОСТ – государственными отраслевыми стандартами ь МУ – методическими указаниями ь МУК – методическими указаниями по методам контроля
Список источников: • • • • Сан. Пи. Н 2. 1188 -03. Плавательные бассейны. Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды. Контроль качества. Сан. Пи. Н 2. 1. 4. 1074 -01. Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества: санитарно-эпидемиологические правила и нормативы. Сан. Пи. Н 2. 1. 4. 1116 -02. Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной в емкости. Контроль качества. Сан. Пи. Н 2. 1. 4. 1175 -02. Гигиенические требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. Сан. Пи. Н 2. 1. 5. 980 -00. Водоотведение населенных мест, санитарная охрана водных объектов. Гигиенические требования к охране поверхностных вод. МУ 2. 1. 4. 1057 -01. Организация внутреннего контроля качества санитарно-микробиологических исследований воды. МУК 4. 2. 2884 -11. Методы микробиологического контроля объектов окружающей среды и пищевых продуктов с использованием петрифильмов. Соколов Д. М. , Соколов М. С. Микробиологический контроль с использованием петрифильмов // Молочная промышленность. 2012. № 2. С. 36– 37. МУК 4. 2. 1018 -01. Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды. Guidelines for drinking-water quality [electronic resource]: Recommendations. World Health Organization. 2006. Vol. 1. ГОСТ Р 52426 -2005 (ISO 9308 -1: 2000). Вода питьевая. Обнаружение и количественный учет Escherichia coli и колиформных бактерий. Часть 1. Метод мембранной фильтрации. МР № 24 ФЦ 513. Определение колиформных бактерий и E. coli c использованием хромогенных и флюорогенных индикаторных сред производства Мerck (Германия). http: //www. kemsma. ru/do/microbiology/lekcia. pdf
Скачать презентацию Санитарная микробиология Санитарная микробиология — раздел медицинской
Санитарная мб.pptx