Практическое занятие на тему «Иммуноферментный анализ (ИФА)» Иммуноферментный

Практическое занятие на тему «Иммуноферментный анализ (ИФА)»

Иммуноферментный анализ (ИФА) - лабораторное исследование основанное на высокой избирательности и специфичности иммунологических реакций “антиген-антитело”. Наибольшее распространение получил твердофазный гетерогенный иммунный анализ - ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). ИФА применяют для двух целей - для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций,но значительно чаще метод ИФА применяется для определения наличия антител классов ( IgA IgM IgG) к антигенам различных возбудителей болезней.

Диагностические тест-системы для ИФА Аллергология Антиоксиданты, ауто-оксиданты Апоптоз Аутоиммунные заболевания Белки теплового шока (стресс-белки) Биогенные амины, катехоламины Ветеринария Витамины Гипофиз, гормоны коры надпочечников, нейропептиды Диагностика анемий Диагностика диабета Диагностика заболеваний легких Другие реагенты для ИФА Заболевания почек Иммунология, белки острой фазы воспаления Инфекционная диагностика Кардиомаркеры Клеточная биология Лекарственные вещества Маркеры гастрита, гормоны желудочно-кишечного тракта Маркеры метаболического синдрома Маркеры офтальмологических заболеваний Матриксные металлопротеиназы Метаболизм костной ткани Молекулы межклеточной адгезии Нейробиология Онкомаркеры Определение маркеров в слюне Паразитология Простогландины, лейкотриены Репродуктивная функция Система комплимента Тиреоидная функция Факторы роста Цитокины, хемокины

Задача Определение АГ куриного белка (гамма глобина) в вакцинных препаратах (оценка качества очистки препарата)

Сезон вакцинации против гриппа 2014-2015 гг открыт Как и прежде, самым высокоэффективным средством предупреждения гриппа является вакцинопрофилактика. В данном сезоне будут представлены следующие вакцины от гриппа: «Ваксигрип» («Санофи Пастер», Франция) В соответствии с рекомендациями экспертов ВОЗ и ЕМА относительно состава вакцин для профилактики гриппа, предназначенных для применения в Северном полушарии на сезон 2014-15 гг. утвержден следующий состав вакцин: А/Калифорния |7|2009 (H1N1)- подобный вирус; А/Техас 50|2012 (H3N2) – подобный вирус; B/Mассачусетс 02/2012 — подобный вирус

Вирус гриппа Вакцина для профилактики гриппа, лекарственный препарат из группы биологических препаратов, обеспечивающий формирование краткосрочного иммунитета к вирусу гриппа, считается одним из самых эффективных средств профилактики гриппа.

Наиболее частым виновником проявления аллергии является белок куриных яиц. Аллергия на куриный белок проявляется реакциями немедленного типа: покраснение, зуд кожных покровов, экзема, спазм бронхов.

Актуальность очистка от куриного белка аллергические проявления защита от инфекции, вызванной вирусами гриппа

Пробирки Препарат N серии Куриный белок (50нг) Буфер Первые АТ Конъюгат Субстрат (ТМБ) Стоп реагент

Стоп реагент

Планшет для эксперимента Сотрудник 1 Сотрудник 2 Оп Оп К+ К+ К- К- Оп Оп К+ К+ К- К- 50 (1мкг/мл) 50 (1мкг/мл)

Калибровка 50 50 25 25 25 10 10 10 0 0 0 (1мкг/мл) (0,5мкг/мл) (0,2мкг/мл) (0мкг/мл) нг/лунка

1а этап (внесение проб и контролей, сорбция)

1б этап (отмывка от несвязавшихся компонентов)

2 этап (внесение первых АТ –кроличьих к АГ)

3 этап (внесение вторых АТ - козьи)

4 этап (внесение субстрата – тетраметилбензидина - ТМБ) 17. Добавление стоп-реагента (по 50 мкл) 18. Анализ результатов на приборе («ИФА-ридер»)

Построение калибровочной прямой

Анализ полученных результатов очистка от куриного белка аллергические проявления защита от инфекции, вызванной вирусами гриппа Белок более 0,2 мкг/мл – отозвать партию Белок менее 0,2 мкг/мл – реализовать продукцию

БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ