Микробиология Преподатель кафедры Биотехнологии и микробиологии ЕНУ им

Микробиология Преподатель кафедры Биотехнологии и микробиологии ЕНУ им. Л. Н. Гумилева Турсунбаев Нариман 11. 08. 2014

ТЕМЫ 1. Грамположительные и грамотрицательные бактерии 2. Виды питательных сред 3. Стерилизация и обеззараживание

Строение бактерий

ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ азот (8— 15% сухого остатка), углерод (45— 55% сухого остатка), кислород (30% сухого остатка), водород (6— 8% сухого остатка). Вода (75— 85%) Вода - структурный элемент цитоплазмы. Свободная вода является растворителем для кристаллических веществ, источником водородных ионов и участником химических реакций. Минеральные вещества бактерий

Белок. на его долю приходится 50— 80% сухого вещества бактериальной клетки Он распределен в цитоплазме, нуклеоиде, цитоплазматической мембране и других клеточных структурах. К белкам принадлежат ферменты, многие токсины. Нуклеопротеиды — соединение белка с нуклеиновыми кислотами ДНК и РНК. Нуклеиновые кислоты: ДНК определяет генетические свойства, РНК — биосинтез белка. Углеводы — 12— 18% сухого вещества. Это основной источник энергии и углерода. Многие структурные компоненты клетки состоят из углеводов (оболочка, капсула, слизистый слой). Липиды — составляют ~ 10% сухого остатка. — это запасные вещества, повышающие устойчивость бактерий во внешней среде. Связываясь с белками и углеводами, липиды составляют сложный комплекс, определяющий токсические свойства микроорганизмов.

Систематика бактерии Фенотипические критерии систематики -морфологические признаки -культуралтные признаки -физиологические признаки -биохимические признаки Генетические критерии систематики -относительное содержание ГЦ-пар в ДНК -метод молекулярной гибридизации НК -метод генетического анализа -рестрикционное картирование -метод ДНК-зондов -секвенирование ДНК Серологические критерии систематики Современная классификация бактерии

Морфология бактерий По форме: шаровидные (кокки) палочковидные (бациллы) спиральные (спириллы) изогнутые (вибрионы) По характеру движения: подвижные (при помощи жгутиков) неподвижные По цвету: бесцветные окрашенные (пурпурные, зелёные, сине-зелёные)

Морфология клеток собственно бактерий Бактерии можно разделить на две группы на основании окрашивания по Граму: • Грамположительные, которые остаются окрашенными генцианвиолетом после отмывки спиртом • Обесцвечивающиеся грамотрицательные. • Клеточная стенка грамположительных бактерий значительно толще чем у грамотрицательных. 9

Клеточная стенка грамположительных бактерий

Клеточная стенка грамотрицательных бактерий

Клеточная стенка грам + и - бактерий

Сферические или шаровидные формы (кокки) • Микрококки – отдельно расположенные клетки в виде пакетов

Питательные среды. • • Питательные среды – это субстраты, предназначенные для: накопления выделения изучения сохранения микроорганизмов

Требования к питательным средам. 1. Питательность (содержание всех веществ, необходимых для жизнедеятельности микроорганизмов). 2. Оптимальный ( 7, 2 -7, 4 -7, 6 ) (исключения: р. Н холерный вибрион (р. Н 8 -8, 6), дрожжи и плесень при р. Н 5, 0 -5, 5). 3. Изотоничность % (концентрация солей 0, 5 должна обеспечивать (осмотические услови 4. Стерильность и прозрачность. 5. Влажность не менее 20%

О влажности питательной среды (не менее 2 %), необходимой для жизнедеятельности микроорганизмов судят по наличию конденсата на ней. конденсат

КЛАССИФИКАЦИЯ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД натуральные и синтетические. жидкие, плотные и полужидкие. простые и сложные. основные и специальные. по назначению: элективные (избирательные) среды накопления консервирующие среды дифференциально-диагностические среды

Элективные (избирательные) для определенного вида микроорганизмов основаны на принципе подавления роста других микроорганизмов. • Желточно-солевой агар (ЖСА) стафилококков для • Кровяной агар (КА) для стрептококков • Сабуро для грибов • • • Пептонная вода (ПВ) р. Н 8 -8, 6 для холерного вибриона Эндо, Плоскирева, Левина для энтеробактерий Левенштейна-Йенсена для возбудителя туберкулеза Клаубергадля дифтерийной палочки Висмут сульфит агар (ВСА) сальмонелл для и др.

Дифференциально-диагностические (для дифференциации видов микроорганизмов п ферментативной активности). • Гисса по сахаролитической активности • Ресселяпо сахаролитической активности • Олькеницкого сахаролитической и по протеолитической активности • Клиглерапо сахаролитической и протеолитической активности • и др.

Среды накопления (жидкие элективные среды) • Солевой бульон для стафилококка • Желчный бульон для сальмонелл • Селенитовый бульон для энтеробактерий • Сахарный бульон стрептококков для

ТРЕБОВАНИЯ, ПРЕДЪЯВЛЯЕМЫЕ К ПИТАТЕЛЬНЫМ СРЕДАМ Питательные среды должны: Содержать необходимые для питания микроба питательные вещества. Иметь реакцию р. Н, оптимальную для выращиваемого вида микроба. Иметь достаточную влажность, так как микробы питаются по законам диффузии и осмоса. Обладать изотоничностью. Быть стерильными, обеспечивая тем самым возможность выращивания чистых культур микробов.

Стерилизация и обеззараживание ФИЗИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ТЕМПЕРАТУРА ВЫСУШИВАНИЕ ЛУЧИСТАЯ ЭНЕРГИЯ УЛЬТРАЗВУК ДАВЛЕНИЕ

ТЕМПЕРАТУРА Высокая температура вызывает коагуляцию структурных белков и ферментов микроорганизмов. Большинство вегетативных форм гибнет при температуре 60°С в течение 30 мин, а при 80 -100°С – через 1 мин. Споры бактерий устойчивы к температуре 100°С, гибнут при 130°С и более при длительной экспозиции. Для сохранения жизнеспособности относительно благоприятны низкие температуры. Бактерии выживают при температуре ниже – 100°С; споры бактерий и вирусы годами сохраняются в жидком азоте (до – 250°С).

ЛУЧИСТАЯ ЭНЕРГИЯ Солнечный свет губительно действует на микроорганизмы. Наибольший бактерицидный эффект оказывает коротковолновые УФ-лучи. Они инактивируют ферменты клетки и разрушают ДНК. Энергию излучения используют для дезинфекции, а также для стерилизации термолабильных материалов.

УЛЬТРАЗВУК Ультразвук вызывает поражение клетки. Под действием ультразвука внутри клетки возникает очень высокое давление. Это приводит к разрыву клеточной стенки и гибели клетки. Ультразвук используют для стерилизации и хранения стерильных материалов.

ВЫСОКОЕ ДАВЛЕНИЕ. К атмосферному давлению бактерии, а особенно споры, очень устойчивы. Сочетанное действие повышенных температур и повышенного давления используется в паровых стерилизаторах для стерилизации паром под давлением.

ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. В малых концентрациях химическое вещество может являться питанием для бактерий, а в больших — оказывать на них губительное действие. Способность ряда химических веществ подавлять жизнедеятельность микроорганизмов зависит от концентрации химических веществ и времени контакта с микробом.

спасибо за внимание!!!