МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ДИФТЕРИИ Подготовила: студентка группы 3-6

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ДИФТЕРИИ Подготовила: студентка группы 3-6 Денисова Ольга

ПОНЯТИЕ Дифтерия — инфекционное заболевание, вызываемое бактерией Corynebacterium diphtheriae

МОРФОЛОГИЯ Палочки с булавовидным утолщением на концах; Неподвижны; Спор и капсул не образуют; Грам «+» Факультативный аэроб.

КУЛЬТИВИРОВАНИЕ кровяно- телуриновый агар, при t= 37 градусов, рН= 7,6-7,8; Среда Бучина Бульон Мартела

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ Источник инфекции- больной человек, бактерионоситель; Пути передачи- воздушно капельный

ВХОДНЫЕ ВОРОТА И КЛИНИКА Входные ворота- слизистые оболочки верхних дыхательных путей; Клиника- субфебрильная температура, слабость, боль в горле, увеличение небных миндалин, увеличение шейных лимфатических узлов.

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ Слизь из зева и носа, кровь

ЗАБОР МАТЕРИАЛА Забор материала производят сухим тампоном, на границе здоровой и пораженной ткани. Слизь из зева и носа забирают отдельными тампонами. Так же забор производят увлажненным тампономс 5% глицериновой смесью. Доставка материала в лабораторию не позднее 2-х часов.

Бактериологический метод 1 ДЕНЬ Посев на среду кровяно- телуриновый агар. Материал засевают тампоном на пол чашки, сначала сделав площадку, а затем до половины чашки. На пол чашки материал из носа, а на пол чашки- из зева.( от одного больного). Ставим в термостат: 37 градусов, 48 часов. Но просматриваем через 24 часа.

2 ДЕНЬ Просмотр чашек, если появился рост колоний, то начинаем исследование.

3 ДЕНЬ Просмотр чашек, колонии: серые с черным центром, суховатые, при скалывании крошатся, слегка выпуклые. Делаем мазки и окрашиваем по Нейссеру. В мазке- палочки расположенные под углом друг к другу в виде V, где тело- желтое, темно-синее окрашивание по краям- зерна волютина.

В тот же день засеваем на сывороточный агар (выделение чистой культуры). Так же постановка проб: Заксе ( расщипление мочевины)- мочевина у дифтерии «-»; Пизу- «+» р- ия. почернение по уколу, на среде дымчатое облако; На токсигенность

ПРОБА НА ТОКСИГЕННОСТЬ Полоску фильтровальной бумаги (стерильной) опустить на дно стерильной чашки Петри, при помощи пинцета; Пипеткой взять 0,2 мл противодифтертийной сыворотки и смочить ей полоску; Приоткрыть чашку со средой на токсигеннось, и положить на нее бумажку при помощи пинцета;

4. Дать впитаться сыворотке. Поставить в термлстат на 20 минут приоткрыв чашку; 5. Произвести посев культуры по трафарету( засеваем с 2-х сторон на расстоянии 0,8 см от полоски, чередуя контрольную- испытуемую культуру). Термостат 37 градусов, 48 часов. Просмотр через 24 часа.

6. Через 48 ч. На среде появлятся белые усы, т.е. встречается Ag c Am, или антитоксин с токсином. Токсин идет от бляшек с культурой, а антитоксин с бумажки. Эти «усы» должны сходиться, но не перекрещиваться.

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА Глюкоза- «+», сахароза- «-» (определение родового признака) Крахмал (определение биовара: «+»- гравис, «-»- митис).

4 ДЕНЬ Выдача ответа. Например: Пизу «+», Заксе «-», глюкоза «+», сахароза «-», крахмал «+», токсигенность «+». Выделена коринебактерия дифтерии- гравис, токсигенный штамм.

БУДЬТЕ ЗДОРОВЫ!!!