Методи генетичного аналізу на Drosophila melanogaster Великий практикум

  • Размер: 1 Mегабайта
  • Количество слайдов: 13

Описание презентации Методи генетичного аналізу на Drosophila melanogaster Великий практикум по слайдам

  Методи генетичного аналізу на Drosophila melanogaster Великий практикум 3.  Соматичні мозаїки Методи генетичного аналізу на Drosophila melanogaster Великий практикум 3. Соматичні мозаїки

  Перші мозаїки у дрозофіли – гінандроморф и (Морган, 1914) Причини виникнення мозаїцизму: Мозаїк – Перші мозаїки у дрозофіли – гінандроморф и (Морган, 1914) Причини виникнення мозаїцизму: Мозаїк – органїзм, у якого клітини мають різний генотип Втрата хромосом и під час поділу Соматичний кросінговер Інсерційницй мутагенез

  1.  Визначити місце та характер активності гена:  • Чи функція гена внутрішньоклітинна, 1. Визначити місце та характер активності гена: • Чи функція гена внутрішньоклітинна, чи він діє на віддалені клітини? Використання соматичних мозаїків у генетичному аналізі: 2. Вивчення функції летальних генів, оскіки гомозиготи гинуть у ембріональному періоді, а мозаїки — життєздатні

  y + sn ♀ y sn + y + sn ♀ y sn +

  Молекулярні інструменти –трансформація у дрозофіли 1982  - Дж. Рубін та А. Спрадлінг, вектор Молекулярні інструменти –трансформація у дрозофіли 1982 — Дж. Рубін та А. Спрадлінг, вектор Р -елемент Ефективність трансформації близько 14%

  Як включити рекомбіназу FLP ? Система FRT – FLP – рекомбіназа дріжджів (фліпаза), що Як включити рекомбіназу FLP ? Система FRT – FLP – рекомбіназа дріжджів (фліпаза), що викликає сайтспецифічну рекомбінацію FRT – сайт мішень Перевага – рекомбінацію можна «вмикати» у подрібний час та у визначеному місті

  1. Хит-шоком (38 ˚ на 1 год).  FLP під хіт-шоковим промотором Клони розподілятимуться 1. Хит-шоком (38 ˚ на 1 год). FLP під хіт-шоковим промотором Клони розподілятимуться по тканинах випадково

  FRTFRTпромотор GFP- білок. Маркування GFP -білок зявиться, якщо спейсер  видалено Клони в імагінальному FRTFRTпромотор GFP- білок. Маркування GFP -білок зявиться, якщо спейсер видалено Клони в імагінальному диску крила

  2.  Бінарна GAL 4 – UAS система UAS - FLP промотор  + 2. Бінарна GAL 4 – UAS система UAS — FLP промотор + специфічний драйвер GAL 4 ( активатор транскрипції дріжджів) – тканиноспецифічні клони

  Маркування геном ww Маркування геном ww

  Функц і ональний knock - out  До 70 -80 м. РНК інактивується Функц і ональний knock — out До 70 -80% м. РНК інактивується

  w 1118 ;  P{GD 3277}v 5469 ( UAS - sws - RNAi) 11257 w 1118 ; P{GD 3277}v 5469 ( UAS — sws — RNAi) 11257 cn 1 P{PZ}Sema-2 a 03021/ Cy. O ; ry 506 cn[1] P{ry[+t 7. 2]=PZ}Sema-2 a[03021]/Cy. O; ry[506] 1369 -GAL 4 — око, глія, ламіна repo — GAL 4 — глія NH 2 Dys. Act. Gal 4/ Cy. O – інактивовані довгі ізоформи дистрофіну Модифікатор: Драйвер: