КУЛЬТУРА КЛІТИН ТА КЛОНУВАННЯ ПРОЛІФЕРАЦІЯ ДИФЕРЕНЦІЮВАННЯ МІЖКЛІТИННА КОМУНІКАЦІЯ

КУЛЬТУРА КЛІТИН ТА КЛОНУВАННЯ

ПРОЛІФЕРАЦІЯ ДИФЕРЕНЦІЮВАННЯ МІЖКЛІТИННА КОМУНІКАЦІЯ ТА ВЗАЄМОДІЯ КЛІТИН З МІКРООТОЧЕННЯМ МЕХАНІЗМИ АДАПТАЦІЇ СТАРІННЯ ТА ЗАГИБЕЛІ КЛІТИН Механізми біологічної рухливості та міграційної активності СЕКРЕТОРНА ФУНКЦІЯ МЕХАНІЗМИ ТРАНСФОРМАЦІЇ КЛІТИН

Моделювання фаз росту на клітинних лініях 1)Експоненційна фаза росту 2)Стаціонарна фаза 3)Культивуванняклітин в ріст-дефіцитному середовищі

Диференціювання Ендотелій Нейробластоми, Плазмацитоми, Тератокарциноми

Напрямки застосування культури клітин

Штучне запліднення та репродуктивна медицина

ТЕХНОЛОГІЇ КЛІТИННОЇ ТЕРАПІЇ, ПОВ’ЯЗАНІ ІЗ ЗАСТОСУВАННЯМ СТОВБУРОВИХ КЛІТИН (ЕМБРІОНАЛЬНИХ ТА “ДОРОСЛИХ” СТОВБУРОВИХ КЛІТИН)

Переваги: -можливість прижиттєвого спостереження -тривалість -економічна ефективність -діагностична значимість дослідження первинних механізмів впливу на конкретну клітинну популяцію -застосування в діагностиці та лікуванні найпоширеніших захворювань -стандартизація

Недоліки: штучність системи певна ступінь трансформації клітин вилучення окремої популяції клітин із тканинної ієрархії вилучення із-під регуляторних механізмів цілісного організму

ПОДОЛАННЯ НЕДОЛІКІВ: Співкультивування різних типів клітин Створення позаклітинних штучних матриксів Поєднання моделей культивування in vitro та in vivo

Співкультивування різних типів клітин К-середовище від макрофагів Безконтактне співкультивування

«КОНТАКТНЕ СПІВКУЛЬТИВУВАННЯ” (одна із клітинних ліній зафарбовувалась прижиттєвим барвником – КФДС) “БЕЗКОНТАКТНЕ СПІВКУЛЬТИВУВАННЯ” - спільне середовище культивування [Взаємодія ендотеліальних та пухлинних клітин за умов їхнього <<контактного>> та <<безконтактного>> співкультивування //ДАН України, 2009, №10, ст 167-171 Interactions of endothelial cells and lewis lung carcinoma cells with different angiogenic and Metastatik potential. Tumor hypoxia and malignant progression October 1-4, 2008]

Створення штучних матриксів Фідерний шар клітин - гібридомна технологія, декстеровська система, диференціювання клітин Позаклітинні матрикси - matrigel, фібрин, наноматрикси Конгламерат-утворюючі агенти -карбоксиметилцелюлоза, агароза

Технічні засоби для культивування клітин Прилади та пристрої для безпосереднього культивування клітин; Прилади та пристрої, що забезпечують роботу з клітинами;

Технічні засоби для культивування клітин Прилади та пристрої для прижиттєвого спостереження за клітинами Прилади та пристрої для кріоконсервації та збереження клітин

диплоїдні культури, які частіше за все отримуються із ембріональних тканин та зберігають до 50 пересівів диплоїдний набір хромосом; гетероплоїдні культури, які існують поза організмом до десятків років

перша і основна риса – це набуття або ж повернення до так званого “безсмертя”; клітини вийшли із-під контролю організму, і, в якійсь мірі стали схожими на одноклітинні організми, хоча безсмертя характерне не для окремої клітини, а для популяції клітин. В процесі культивування, при багатократних пассажах властивості клітинної лінії можуть мінятись, і, тому для підтримання постійності характеристик клітинних ліній потрібно періодично їх заморожувати(паспорт клітинної культури) інші критерії трансформації такі як залежність від мікрооточення, факторів середовища та онкогенність проявляються у різних клітинних ліній в неодинаковій степені і, тому розрізняють мало- та сильно трансформовані лінії, онкогенні та неонкогенні.

В результаті такого дослідження в модельній системі співкультивування вдалось зафіксувати: Пухлинні клітини, які in vitro мають різний ангіогенний потенціал in vivo мають відповідний проліферативний та метастатичний потенціал, що відображає ступінь прогресії пухлин. Ефективність протипухлинної ангіогенної терапії також залежить від характеристик пухлинних клітин in vitro, їх впливу на ендотеліоцити і моделюється при розробці схеми терапії in vivo

Дослідження цитотоксичних агентів, інгібіторів проліферації -Спосіб тестування біологічно активних сполук на придатність як лікарських засобів. Патент на корисну модель №35037 від 26.08.09 Дослідження продиференційовочних факторів, мітогенів EGF increase cytotoxic effect of 6-azacytosine xylofuranoside to cells of breast adenocarcinoma (MCF-7), N1-глікозиднi аналоги 6-азацитидину. II. Цитотоксична дія та вплив на транскрипцію in vitro. Клоногенні властивості, аутокринну секрецію Inderect influence of co-cultures MT4 on multicellular spheroids of breast adenocarcinoma (MCF7); Аутокринний механізм прогресії пухлинних клітин в 2-D та 3-D культурах

- вивчення біохімічних, молекулярно-біологічних, імунологічних, біофізичних аспектів функціонування окремих клітин та популяції клітин багатоклітинного організму в штучно створених умовах з дотриманнями всіх правил стерильної роботи; - - вивчення закономірностей диференціювання та проліферації клітин на постійних клітинних лініях та первинних культурах; - - дослідження функціонування стовбурових клітин; - - створення банків постійних клітинних ліній та унікальних культур методом кріоконсервації; - - клонування та відбір клітин за певними фенотиповими, генотиповими та функціональними ознаками;

- Контрольні питання: 1.Поняття культури клітин. 2.Що таке первинна культура, постійна клітинна лінія, клон? 3.Напрямки застосування методу культури клітин. 4.Ознаки трансформованості постійних клітинних ліній в культурі Доповіді (реферати): 1.Механізми контактного гальмування

ДЯКУЮ ЗА УВАГУ!