ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ М. Р. Карпова
Принципы работы иммунобиологических препаратов n n n Всякий возбудитель инфекционного заболевания – комплекс АГ; на возбудитель организм реагирует специфическими иммунными реакциями; вакцины (АГ) → активный иммунный ответ → профилактика; иммуноглобулины и лечебные сыворотки (АТ) → пассивный иммунный ответ → лечение и экстренная профилактика; диагностические препараты (АГ или АТ) → диагностика.
Вакцины – препараты, вызывающие активный искусственный иммунитет n В качестве действующего начала в вакцинах используют: живые аттенуированные (ослабленные) состав возбудители (живые вакцины); инактивированные цельные возбудители (убитые вакцины); отдельные АГ (протективные) выделенные из возбудителей (субъединичные или химические вакцины) или полученные генно-инженерным способом (рекомбинантные вакцины); обезвреженные токсины, продуцируемые микробной клеткой – анатоксины; АГ
Получение живых вакцин n n n культивирование вакцинного штамма в производственных условиях (бактерийные штаммы культивируют на питательных средах, вирусные — на куриных эмбрионах или в культурах клеток); очистка вакцинного штамма от балластных веществ (питательной среды, культуры клеток и т. д. ; стандартизация (определение активности, доведение до рабочей концентрации, расфасовка в ампулы); лиофилизация со стабилизатором (альбумин, сахароза с желатиной); контроль: концентрации живых бактерий или вирусов вакцинного штамма, остаточной влажности, безвредности, аллергенности, иммуногенности и др.
Убитые вакцины n В результате инактивации возбудители полностью теряют жизнеспособность, но сохраняют антигенные и иммуногенные свойства. Для инактивации возбудителя используют: физические (нагревание, ультрафиолетовое облучение, ионизирующая радиация); химические (формалин, спирт, фенол) методы.
Получение убитых вакцин: n культивирование вакцинного штамма; инактивация (чаще 0, 4 % формальдегидом при 37— 40 ОС в течение 4 нед); очистка от балластных компонентов; n добавление адъюванта; n стандартизация; лиофилизация; контроль: остаточной вирулентности, содержание бактерий или вирусов вакцинного штамма, остаточной влажности, стерильности, безвредности, аллергенности, иммуногенности и др. n n
Адъюванты n n n Адъюванты (adjuvant — помощник) – вещества, повышающие иммуногенность. Механизмы действия адъювантов: создание «депо» АГ в месте введения вакцин; воспалительная реакция, активирующая иммунокомпетентные клетки; активация процесса захвата АГ и его переработки фагоцитами. Al(OH)3.
Анатоксины n n Анатоксины – обезвреженные формалином токсины (утрачивается токсичность, но сохраняются антигенность и иммуногенность). Получение анатоксина: культивирование токсигенного штамма (микроорганизм выделяет в среду экзотоксин); фильтрование через бактериальные фильтры; обезвреживание 0, 4 % формалином при 37— 40 ОС в течение 4 нед. ; очистка и стандартизация; добавление адъюванта. контроль: остаточной токсичности, концентрации, стерильности, безвредности, аллергенности, иммуногенности и др.
Рекомбинантные вакцины n Принцип создания: ген или гены, кодирующие протективные АГ возбудителя «встраиваются» в геном вирусов, бактерий или эукариотов. При этом, наряду с АГ хозяина нарабатывается и необходимый для получения вакцины протективный АГ. Вакцина против гепатита В состоит из HBs. АГ, полученного генно-инженерным путем (в геном дрожжевой клетки был встроен ген HBs -АГ и клетка получила способность его продуцировать).
Принцип получения вакцины против гепатита В Культивирование рекомбинантного штамма дрожжей (со встроенным геном HBs-АГ); n выделение HBs-АГ; n очистка; n добавление адъюванта; n стандартизация; n контроль. n
Классификация вакцин Группа вакцин Бактериальные вакцины Вирусные вакцины Живые (аттенуированные) БЦЖ, чумная, сибиреязвенная, туляремийная, бруцеллезная, ЖКСВ-Е – сыпнотифозная, против лихорадки Ку Коревая, оспенная, паротитная, полиомиелитная (Сэбина), желтой лихорадки, гриппозная, краснухи, ветряной оспы Инактивированные Лептоспирозная, коклюшная, гонококковая, бруцеллезная, холерная, брюшно-тифозная Гриппозная, клещевого энцефалита, полиомиелитная (Солка), антирабическая Анатоксины Стафилококковый, дифтерийный (АД), столбнячный (АС), АДС, АКДС Химические (субъединичные) Сыпно-тифозная, холерная, менингококковая, против гемофильной палочки, брюшнотифозная Рекомбинантные Гриппозная Против гепатита В
Ассоциированные вакцины АКДС; n Вакцина против полиомиелита n вакцина против кори, паротита и краснухи. n
Схема применения вакцин n n n Живые вакцины, как правило, применяют однократно, убитые — многократно. При первичной вакцинации создаются граундиммунитет, в результате чего при повторном введении вакцины организм более активно и быстро отвечает на АГ. Ревакцинации обеспечивают длительное поддержание иммунитета на защитном уровне. Обязательная вакцинация – календарь прививок. Прививки по эпидемическим показаниям проводятся группы риска.
Календарь профилактической вакцинации в России Наименование вакцины Сроки вакцинации Рекомбинантная вакцина против гепатита В Новорожденные в первые 12 ч жизни; 1 мес жизни; 6 мес. Параэнтеральная туберкулезная вакцина (БЦЖ) 4 -7 день жизни; в 7 и 14 лет при «отрицательной» реакции Манту АКДС 3 мес; 4, 5 мес; 6 мес; 18 мес; 7 лет – АДС-М; 14 лет – АДС-М; каждые 10 лет – АДС-М или АД-М. Оральная живая полиомиелитная вакцина 3 мес; 4, 5 мес; 6 мес; 18 мес; 20 мес; 14 лет. Живая коревая вакцина 12 -15 мес; 6 лет. Живая паротитная вакцина 12 -15 мес; 6 лет. Живая вакцина против краснухи 12 -15 мес; 6 лет.
Цели применения вакцин Профилактика: чаще – плановая, но может быть и экстренная (бешенство, столбняк). n Лечение: бруцеллез, стафилококковые инфекции, гонорея, герпес, инфекции, вызванные УПМ. Аутовакцины. n Диагностика: гонорея (провокация). n
Иммуноглобулины и антитоксические сыворотки состав n n n Действующее начало — специфические АТ. Их можно использовать для экстренной профилактики и лечения инфекций, при которых ведущим фактором невосприимчивости является гуморальный иммунитет. АТ Иммунные сыворотки и иммуноглобулины создают пассивный специфический иммунитет, который сохраняется при введении гомологичных сывороток до 1— 1, 5 мес и гетерологичных — до 10— 20 сут.
Сывороточные препараты Иммунные сыворотки Гетерологические Иммуноглобулины Гетерологические Гомологичные
Антитоксические сыворотки n n Гетерологичные: гипериммунизация крупных животных (лошадей, волов, быков, коров, мулов). Принцип получения: лошадей гипериммунизируют большими дозами АГ; на пике антителообразования у иммунных животных забирают кровь, освобождают ее от форменных элементов и фибрина; сыворотки очищают и концентрируют ферментативным способом в сочетании с диализом (метод «Диаферм» ), осаждением спиртом на холоде, хроматографией и др. ; стандартизируют по концентрации АТ (антитоксинов); контролируют: на титр специфических АТ, на протективность, реактогеность, аллергенность, стерильность.
Иммуноглобулины n n Иммуноглобулины содержат меньше балластного белка и имеют более высокую концентрацию АТ. Из сыворотки выделяют чистую фракцию гаммаглобулинов. Гетерологические иммуноглобулины получают из крови лошадей, гомологичные – из крови вакцинированных доноров. Иммуноглобулины вводят внутримышечно или наносят на слизистые. Иммуноглобулины, предназначенные для внутривенного введения, подвергают дополнительной обработке с целью удаления агрегатов и снижения реактогенности.
Нормальный иммуноглобулин человека n n n Нормальный иммуноглобулин человека — препарат, приготовленный из смеси образцов крови неиммунизированных доноров, но содержащий АТ к возбудителям банальных инфекций. Используется для больных гипогаммаглобулинемией; для экстренной профилактики и лечения часто встречающихся инфекций и инфекций, от возбудителей которых существует плановая вакцинация.
n n Правила введения гетерологических сывороточных препаратов Осложнения: сывороточная болезнь, анафилактический шок. Для профилактики анафилактического шока обязательна постановка внутрикожной пробы. При отрицательной кожной пробе через 3060 мин внутримышечно вводят назначенную дозу сыворотки. При положительной кожной пробе препарат применяют только по жизненным показаниям. Для десенсибилизации сыворотку вводят дробно (Метод Безредка).
Пассивная иммунизация Болезни Видовая принадлежность АТ Назначение Дифтерия Человек, лошадь Для профилактики и лечения Столбняк Человек, лошадь Для профилактики и лечения Газовая гангрена Лошадь Экстренная профилактика Ботулизм Лошадь, человек Экстренная профилактика и лечение Стафилококковая инфекция Человек Лечение Лептоспироз Вол Лечение тяжелых форм Сибирская язва Лошадь Экстренная профилактика и лечение Укус ядовитой змеи или скорпиона Лошадь Экстренная профилактика и лечение
Пассивная иммунизация Болезни Видовая принадлежность АТ Назначение Бешенство Человек, лошадь Экстренная профилактика Грипп Человек Экстренная профилактика и лечение тяжелых форм Корь, коклюш, полиомиелит, грипп, генер. формы менингококковой инфекции Нормальный иммуноглобулин человека Экстренная профилактика и лечение Гепатит А Нормальный иммуноглобулин человека Профилактика (путешествие) Гепатит В Человек Экстренная профилактика Клещевой энцефалит Человек Экстренная профилактика и лечение Ветряная оспа (опоясывающий лишай) Человек Лечение при иммунологической недостаточности
Диагностические препараты АТ-содержащие Диагностические сыворотки АГ-содержащие Диагностикумы Агглютинирующие Эритроцитарные диагностикумы Преципитирующие Антигены Люминисцентные Аллергены Б А К Т Е Р И О Ф А Г И
Диагностические сыворотки n n n Применяются для выявления АГ возбудителей в клиническом материале и для определения вида или типа возбудителя (серологическая идентификация микроорганизмов). Диагностические сыворотки: видовые состав (видоспецифические), групповые (группоспецифические), типовые (типоспецифические). Устранить групповую агглютинацию можно, удалив из сыворотки АТ против общих АГ (добавление к сыворотке микробов, дающих групповую агглютинацию). После центрифугирования в сыворотке остаются только типовые АТ (метод адсорбции сывороток по Кастеллани). АТ
Получение диагностических сывороток Иммунизация животных (чаще кроликов) живыми или убитыми микроорганизмами; n из крови получают сыворотку, при необходимости адсорбируют и лиофилизируют; n контролируют стерильность, специфичность, высоту титра. n АТ
Получение люминисцирующих сывороток n n n РИФ – метод экспрессдиагностики для определения возбудителей в материале от больного. Люминесцентные сыворотки готовят из специфических иммунных сывороток, из которых извлекают иммуноглобулиновую фракцию. Полученные глобулины обрабатывают АТ флюорохромами.
Антигенсодержащие препараты n n Диагностикумы, эритроцитарные диагностикумы, антигены, аллергены. Диагностикумы – это взвесь убитых возбудителей или их отдельных компонентов, чаще всего в физиологическом растворе. Применяют для определения специфических АТ в серологических реакциях. Получение: культивирование микроорганизмов, инактивация, очистка, контроль на стерильность и специфическую активность, при необходимости лиофилизация. Антигены готовят путем обработки бактерий температурой, УЗ, спиртом, кислотой, многократным замораживанием о оттаиванием и т. д. АГ
Антигенсодержащие препараты n n n Эритроцитарные диагностикумы: АГ (диагностикум) соединяют с эритроцитами. Контроль: отсутствие спонтанной агглютинации, специфическую активность с соответствующими иммунными сыворотками. РНГА. Аллергены при одних заболеваниях (туберкулез, бруцеллез) представляют собой фильтраты бульонных культур, при других (туляремия) – взвесь убитых нагреванием бактерий. Используют в кожно-аллергических пробах. Туберкулин, бруцеллин, тулярин, антраксин, токсоплазмин. Туберкулин – белковая вытяжка из культуры туберкулезной палочки в физиологическом растворе с твином в качестве консерванта и фенолом – стабилизатора. Вводят внутрикожно (реакция Манту). АГ
Бактериофаги – это иммунобиологические препараты, состоящие из вирусов бактерий. n Получение: инфицирование фагом выращенной в производственных условиях культуры бактерий, чувствительной к данному фагу; фильтрация, очистка, стандартизация, при необходимости лиофилизация, контроль на специфичность и титр фага. n Бактериофаги выпускают в виде таблеток, в жидком виде. n
Применение бактериофагов n n Бактериофаги применяют для профилактики и лечения ряда бактериальных инфекций. Препарат назначают перорально, а в случаях раневых инфекций – орошают раны. Фаги используют в диагностике бактериальных инфекций с целью их фаготипирования. По спектру действия выделяют поливалентные (лизирующие родственные бактерии, в том числе близких видов), моновалентные (лизирующие бактерии одного вида) и типоспецифические.
Эубиотики состоят из живых микроорганизмов – представителей микрофлоры человека. Они используются для профилактики и лечения дисбактериозов. n Эубиотики получают путем выращивания бактерий на питательных средах, концентрирования, стандартизации и лиофилизации. n «Колибактерин» , «бифидумбактерин» , «лактобактерин» , «бификол» и др. n
УДАЧИ В НОВОМ ГОДУ!
Скачать презентацию ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ М Р Карпова Принципы работы
ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ2.ppt