2.3.Строение гена План лекции Эволюция концепции гена. Структура,

2.3.Строение гена

План лекции Эволюция концепции гена. Структура, локализация и функции генов. Классификация и строение эукариотных генов. Особенности организации генов прокариот.

1. Эволюция концепции гена

2. Современная концепция гена?

Физическое определение – ген это участок хромосомы, который содержит последовательность нуклеотидов

Функциональное определение- ген это информационная единица, которая обеспечивает синтез РНК

Генетическое определение – ген это единица наследственности, которая определяет отдельный признак организма

Ген – участок ДНК, содержащий информацию о синтезе: - полипептидной цепи; - родственных полипептидныхцепей; - молекул РНК (тРНК, рРНК). Ген является структурной и функциональной единицей наследственности и изменчивости организмов

Общее строение генов

Локализация генов: Гены расположены вдоль молекулы ДНК; Гены представлены уникальными и повторяющимися последовательностями; Гены разделены некодирующими последовательностями (spacer); Гены не располагают строгими морфологическими рамками ; они разделены лишь функционально; Размеры генов варьируют.

Функции генов: На молекулярном уровне – контроль синтеза полипептида, образование функциональных белков На клеточном уровне – образование клеточных структур, метаболической цепи и др. На тканевом и органном уровне – реализация специфических функций (дыхание, питание, мышечное сокращение и др.) На уровне организма определение специфического признака

Количество и размер генов у разных организмов

Размер генома человека– 3,3 x 109 p.n. - 2% генома человека кодирует белки - количество генов ≈ 30 000 пар - локализация генов – в хромосомах (37 генов в митохондриях) - в 1-й хромосоме больше всего генов – 2968 - в Y хромосоме меньше всего генов – 307 - выполняемые функции известны для более 50% генов - Размер генов – в среднем 10-15kb - ген β-глобина – 1,5 kb - ген инсулина – 1,7 kb - ген каталазы – 34 kb - ген дистрофина – 2,4 Mb

3.Классификация генов у эукариот Гены класса I – кодируют рРНК (5.8S; 18S; 28 S); Гены класса II – кодируют белки, транскрибируются в мРНК; Гены класса III – кодируют 5S рРНК и тРНК.

Структура генов класса II

Структурный ген– представляет комплекс последовательностей ДНК с генетической и регуляторной функцией, обеспечивающий передачу информации в признак – pполипептид. Регуляторный участок Кодирующий участок экзоны интроны 1.Промотор - проксимальные элементы (ТАТА, СААТ, GC) - дистальные элементы (Enh, S) 2. Терминаторr - сигнальный участок, - участок для полиаденилирования, - терминатор

Кодирующий участок Site- инициации с кодоном ATG. Кодирующий участок: - eэкзоны, - интроны. Экзоны – кодирующие участки генов которые транскрибируются в мРНК и реализуются в последовательности аминокислот в молекуле белка. Интроны – неинформационные участки, которые транскрибируются, но затем удаляются в процессе созревания мРНК.

Функции интронов

Размеры экзонов и интронов в различных генах человека

Промотор Специальный участок на конце 5´ гена, который отвечает за прикрепление РНК-полимеразы и инициацию транскрипции. Включает: - ТАТА бокс – обеспечивает правильную ориентацию РНК-полимеразы, - СААТ бокс – управляет прикрепление инициирующих белков к РНК-полимеразе, - GC бокс – определяет направление транскрипции, - октамерный бокс– участки для прикрепления факторов транскрипции.

Структурные элементы промотора генов эукариот

Терминатор расположен на конце 3´кодогенной цепи и представлен обратным повтором

Модулирующие участки Enh, S расположены на конце 5´или в интронах, служат для прикрепления специальных белков, которые увеличивают или уменьшают скорость транскрипции.

Структура генов класса I (рРНК) кодируют 5,8S; 18S; 28S РНК, расположены вблизи организатора ядрышка, организованы в смешанных транскриптах с умеренными повторами (до 200-300 раз) и разделенв spacer-ами, не содержат интронов, промотор расположен на растоянии - 45+20

Организация генов классаIII кодируют 5S рРНК и тРНК, организованы в виде повторяющихся тандемов (до 3000 раз), промотор расположен внутри транскрибируемого участка (+55+80), смешивается с псевдогенами.

4. Особенности генетического материала у прокариот Геном бактерий состоит из двух типов генов: основные гены (эухромосомные) – расположены в бактериальной хромосоме вспомогательные гены (внехромосомные) – плазмиды, мобильные генетические элементы, фаги ДНК имеет кольцевую форму, Молекула ДНК не образует комплекса с гистоновыми и негистоновыми белками (голая), Геном бактерий представлен ограниченным количеством генов, Геном бактерий содержит одну группу сцепления

4. Особенности генетического материала у прокариот (продолжение) Бактерии являются гаплоидными организмами, но могут быть частично диплоидными или диплоидными в зависимости от синтеза ДНК, Передача наследственных признаков отличается от таковой у эукариот, т.к. отсутствует классический половой процесс, Структурные гены имеют более простую организацию и объединены в опероны, Оперон имеет промотор и несколько структурных генов, Интроны отсутствуют, а некодифицирующих участков очень мало

Характеристика генома E.coli ДНК имеет кольцевую форму, Длина ДНК: 1000-1400 μm, Диаметр молекулы ДНК: 2,5 nm, Количество нуклеотидов: 2,5 · 109- daltoni, Количество генов: около 4 000, Разнообразие плазмид – около 250 типов.

Разнообразие прокариотных генов Структурные гены определяют первичную структуру белков (около 90% из всех генов), в геноме могут быть организованы в опероны (Jacob, Monod, 1961) Регуляторные гены определяют активность структурных генов посредством своего продукта (репрессор или апорепрессор), Операторные гены представляют рецепторы для сигналов (репрессора или индуктора) обеспечивают функционирование оперона, являются составной частью оперона,

Разнообразие прокариотных генов (продолжение) Промотор представляет участок оперона к которому прикрепляется РНК-полимераза и определяет начало транскрипции, Терминатор представляет участок оперона который сигнализирует об окончании процесса транскрипции генетической информации, Репликатор представляет функциональные участки ДНК которые управляют rрепликацией, Инициатор ген определяющий синтез продукта который при взаимодействии с репликатором инициирцет репликацию ДНК,

Разнообразие прокариотных генов (продолжение) Участки инициации малые фрагменты ДНК (1-2 гена: около 800-1400 нуклеотидов) которые могут передвигаться в бактериальном геноме либо сами, либо в комплексе с структурными генами (транспозоны), Гены рРНК и тРНК определяют синтез рРНК (10-20 генов) и тРНК (около 50 генов), Участки связывания фрагменты ДНК которые прикрепляются к цитоплазматической мембране (мезосомы), Криптические (молчащие) гены гены которые обычно не проявляются на протяжении жизни бактерий.

Строение оперона у прокариот (F.Jacob, J.Monod, 1961)

Строение генов рРНК и тРНК у прокариот организованы в смешанных транскриптах и разделены spaceri- ми, “разбросаны” по геному и транскрибируются одновременно с другими генами

Транспозоны (мобильные генетические элементы) Участки ДНК, способные передвигаться по геному. У эукариот составляют 10-20% генома. Выделяются простые и сложные транспозоны.

Механизмы транспозиции Нерепликативная транспозиция Репликативная транспозиция Ретротранспозиция

Генетическая регуляция у прокариот 1. Индукция – данный тип регуляции характерен при синтезе ферментов катаболизма Фиксация белка супрессора к гену оператора при отсутствии субстрата в клетке и блокирование транскрипции функциональных генов Отсутствие синтеза ферментов которые участвуют в разложении субстрата Прикрепление субстрата (при наличии субстрата!) к репрессору Отсутствие прикрепления репрессора к операторному гену Активизация структурных генов, транскрипция иРНК и синтез специфических ферментов для метаболизации субстрата !!! До тех пор, пока в клетке присутствует субстрат, постоянно синтетизируется фермент его разлагающий !!! При истощении субстрата, освобождается репрессор и блокирует посредством оператора функционирование структурных генов

Генетическая регуляция у прокариот 2. Репрессия – данный тип регуляции характерен при синтезе ферментов анаболизма Белок репрессор блокирует оператор в ассоциации с субстратом В отсутствии субстрата оператор является свободным и структурные гены функционируют Процесс транскрипции иРНК и синтеза необходимых ферментов продолжается до появления избытка субстрата Избыток субстрата связывается с белком репрессором и блокирует оператор В итоге, структурные гены инактивируются и синтез соответствующих ферментов прекращается

Генетическая регуляция у эукариот У эукариот более сложные системы регуляции активности генов Регуляция активности генов эукариот осуществляется различными факторами: Наличием ядра, отделенного от цитоплазма двойной мембраной Строением хромосом и наличием комплекса ДНК - гистоны - Гены активируются одновременно с удалением гистонов гистон-геликазами Наличием различных систем регуляции характерных для организма (главным образом, гормонов) - Некоторые стероидные гормоны фиксируются в цитоплазме к специфическим рецепторам и в виде рецептор-гормон проникает в ядро где дифференциально активируют гены (Watson et al., 1983)

Уровни генетической регуляции у эукариот 1. Транскрипционный отбираются гены которые будут транскрибироваться в мРНК 2. Созревания мРНК определяется способ удаления интронов и сшивания экзонов в процессе образования мРНК - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 3. Транспорт мРНК отбираются молекулы зрелой мРНК которая переносится из ядра в цитоплазму 4. Трансляционный отбираются молекулы мРНК которые транслируются в белки 5. Разрушение мРНК отбираются молекулы мРНК которые подвергаются деградации

Механизмы транскрипционной регуляции 1. Отрицательная регуляция гены функционируют только при наличии белков-репресоров 2. Положительная регуляция гены функционируют только при наличии белков-индукторов - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - !!! Преобладает механизм положительной регуляции, т.к. экономнее синтезировать белки-индукторы для 7-10% ДНК, которые транскрибируется в мРНК, чем синтезировать белки-репресоры для 90-93% генома.

Выводы: Ген занимает определенное место(локус) в хромосоме Ген представляет функциональную единицу генетической информации В рамках гена могут происходить рекомбинации (реконы) и мутации (мутоны) Существуют функциональные и структурные гены Структурные гены кодируют белки Функциональные гены контролируют работу структурных генов Расположение триплетов нуклеотидов в структурных генах соответствует расположению аминокислот в белке, кодируемым данным геном Функция гена регулируется внешними и внутренними факторами Существуют различные системы регуляции активности генов

Вопросы ?!